Application de la tomographie par cohérence optique à un modèle murin de rétinopathie
Summary
Nous décrivons ici une technique d’imagerie in vivo utilisant la tomographie par cohérence optique pour faciliter le diagnostic et la mesure quantitative de la rétinopathie chez la souris.
Abstract
La tomographie par cohérence optique (TCO) offre une méthode non invasive pour le diagnostic de la rétinopathie. La machine OCT peut capturer des images en coupe transversale rétinienne à partir desquelles l’épaisseur rétinienne peut être calculée. Bien que la TCO soit largement utilisée dans la pratique clinique, son application en recherche fondamentale n’est pas aussi répandue, en particulier chez les petits animaux tels que les souris. En raison de la petite taille de leurs globes oculaires, il est difficile de mener des examens d’imagerie du fond d’œil chez la souris. Par conséquent, un système d’imagerie rétinienne spécialisé est nécessaire pour permettre l’imagerie OCT sur les petits animaux. Cet article présente un système spécifique aux petits animaux pour les procédures d’examen OCT et une méthode détaillée pour l’analyse d’images. Les résultats de l’examen OCT rétinien de souris knockout du récepteur des lipoprotéines de très basse densité (Vldlr) et des souris C57BL / 6J sont présentés. Les images OCT de souris C57BL / 6J montraient des couches rétiniennes, tandis que celles de souris knockout Vldlr présentaient une néovascularisation sous-rétinienne et un amincissement de la rétine. En résumé, l’examen OCT pourrait faciliter la détection et la mesure non invasives de la rétinopathie dans des modèles murins.
Introduction
La tomographie par cohérence optique (TCO) est une technique d’imagerie qui permet de fournir in vivo une imagerie à haute résolution et en coupe transversale pour les tissus 1,2,3,4,5,6,7,8, en particulier pour l’examen non invasif de la rétine 9,10,11,12 . Il peut également être utilisé pour quantifier certains biomarqueurs importants, tels que l’épaisseur rétinienne et l’épaisseur de la couche de fibres nerveuses rétiniennes. Le principe de l’OCT est la réflectométrie par cohérence optique, qui obtient des informations de tissu transversal à partir de la cohérence de la lumière réfléchie par un échantillon et la convertit en une forme graphique ou numérique grâce à un système informatique7. La TCO est largement utilisée dans les cliniques d’ophtalmologie comme outil essentiel pour le diagnostic, le suivi et la prise en charge des patients atteints de troubles rétiniens. Il peut également fournir un aperçu de la pathogenèse des maladies de la rétine.
En plus des applications cliniques, l’OCT a également été utilisée dans les études animales. Bien que la pathologie soit l’étalon-or de la caractérisation morphologique, la TCO présente l’avantage de l’imagerie in vivo non invasive et du suivi longitudinal. De plus, il a été démontré que la TCO est bien corrélée à l’histopathologie dans les modèles animauxde rétinopathie 11,13,14,15,16,17,18,19,20. La souris est l’animal le plus couramment utilisé dans les études biomédicales. Cependant, ses petits globes oculaires posent un défi technique à la réalisation de l’imagerie OCT chez la souris.
Par rapport à l’OCT utilisé pour la première fois pour l’imagerie rétinienne chez la souris21,22, l’OCT chez les petits animaux a maintenant été optimisé en ce qui concerne les systèmes matériels et logiciels. Par exemple, l’OCT, en combinaison avec le tracker, réduit considérablement le rapport signal/bruit; Les mises à niveau du système logiciel OCT permettent de détecter automatiquement un plus grand nombre de couches rétiniennes; et le projecteur DLP intégré aide à réduire les artefacts de mouvement.
Le récepteur des lipoprotéines de très basse densité (Vldlr) est une protéine transmembranaire présente dans les cellules endothéliales. Il est exprimé sur les cellules endothéliales vasculaires rétiniennes, les cellules épithéliales pigmentaires rétiniennes et autour de la membrane limite externe23,24. La néovascularisation sous-rétinienne est le phénotype des souris knockout Vldlr 23. Par conséquent, les souris knockout Vldlr sont utilisées pour étudier la pathogenèse et le traitement potentiel de la néovascularisation sous-rétinienne. Cet article démontre l’application de l’imagerie OCT pour détecter les lésions rétiniennes chez les souris knockout Vldlr, dans l’espoir de fournir une référence technique pour la recherche sur la rétinopathie dans de petits modèles animaux.
Protocol
Representative Results
Discussion
Dans cette étude, l’imagerie OCT à l’aide d’un système d’imagerie rétinienne de petits animaux a été appliquée pour évaluer les changements rétiniens chez les souris knockout Vldlr , qui démontrent un décollement postérieur du vitré incomplet, une néovascularisation sous-rétinienne et un amincissement de l’épaisseur rétinienne. L’OCT est une méthode d’imagerie non invasive permettant d’examiner l’état de la rétine in vivo. La plupart des appareils OCT sont conçus p…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Source du projet : Fondation des sciences naturelles de la province du Guangdong (2018A0303130306). Les auteurs tiennent à remercier le Laboratoire de recherche en ophtalmologie, le Centre international de l’œil conjoint Shantou de l’Université de Shantou et l’Université chinoise de Hong Kong pour le financement et le matériel.
Materials
| 100-Dpt contact lens | Volk Optical,Inc, Mentor, OH | Accessory belonging to the RETImap | |
| Double aspheric 60-Dpt glass lens | Volk Optical,Inc, Mentor, OH | Accessory belonging to the RETImap | |
| Electric heating blanket | POPOCOLA | CW-DRT-01 | 50 x 35 cm |
| Injection syringe (1 mL) | Kaile | 0.45 x 16RWLB | |
| Levofloxacin Hydrochloride Eye Gel | EBE PHARMACEUTICAL Co.LTD | 5 g: 0.015 g | |
| Medical sodium hyaluronate gel | Alcon | 16H01E | |
| Microliter syringes | Shanghai high pigeon industry and trade co., LTD | Q31/0113000236C001-2017 | 50 µL |
| Povidone iodine solution | Guangdong medihealth pharmaceutical Co.,LTD | 100 mL | |
| RETImap | ROLAND CONSULT | 19-99_50-2.1_1.2E | cSLO/ERG/VEP/FA/OCT/GFP |
| Small animal ear studs | OSMO POCKET OT110 | INS1005-1S | |
| Tropicamide Phenylephrine Eye Drops | Santen Pharmaceutical Co.,LTD | 5 mg/mL | |
| Xylazin | Sigma | X1251-5G | 5 g |
| Zoletil 50 | Virbac.S.A | 7FRPA | Tiletamine 125 mg + Zolazepam 125 mg |
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