عزل وتوسيع وتمايز الخلايا الجذعية الوسيطة من وسادة الدهون تحت الرضفة لمفصل خنق الماعز
Summary
يمكن عزل الخلايا الجذعية الوسيطة تحت الرضفة (IFP-MSCs) بسهولة من وسادة الدهون تحت الرضفة في مفصل الركبة. تتكاثر بشكل جيد في المختبر ، وتشكل مستعمرات CFU-F ، وتتمايز إلى سلالات دهنية ، غضروفية ، وعظمية المنشأ. هنا ، يتم توفير منهجية عزل وتوسيع وتمييز IFP-MSCs عن مفصل خنق الماعز.
Abstract
يعمل IFP ، الموجود في مفصل الركبة ، كمصدر واعد ل MSCs. IFP هو نسيج يسهل الوصول إليه حيث يتم استئصاله والتخلص منه بشكل روتيني أثناء إجراءات تنظير المفاصل وجراحات استبدال الركبة. بالإضافة إلى ذلك ، ترتبط إزالته بالحد الأدنى من المراضة في موقع المانحين. وقد أظهرت الدراسات الحديثة أن IFP-MSCs لا تفقد قدرتها على الانتشار أثناء التوسع في المختبر ولديها إمكانية تمايز عظمي مستقل عن العمر. تمتلك IFP-MSCs إمكانات تمايز غضروفي فائقة مقارنة ب MSCs المشتقة من نخاع العظم (BMSCs) والخلايا الجذعية المشتقة من الدهون (ADSCs). على الرغم من أن هذه الخلايا يمكن الحصول عليها بسهولة من المرضى المسنين والمرضى ، إلا أن فعاليتها محدودة. ومن ثم ، فإن استخدام IFP-MSCs من متبرعين أصحاء أمر مهم لتحديد فعاليتها في التطبيقات الطبية الحيوية. نظرا لأن الوصول إلى متبرع بشري سليم يمثل تحديا ، يمكن أن تكون النماذج الحيوانية بديلا أفضل لتمكين الفهم الأساسي. تلعب الحيوانات الكبيرة مثل الكلاب والخيول والأغنام والماعز دورا مهما في البحث الانتقالي. من بين هؤلاء ، يمكن أن يكون الماعز نموذجا مفضلا لأن المفصل الخانق للماعز لديه أقرب تشريح لمفصل الركبة البشري. علاوة على ذلك ، يمكن ل goat-IFP تلبية أرقام MSC الأعلى اللازمة لتطبيقات تجديد الأنسجة. علاوة على ذلك ، فإن التكلفة المنخفضة والتوافر والامتثال لمبادئ 3R للبحوث الحيوانية تجعلها نموذجا جذابا. توضح هذه الدراسة بروتوكولا بسيطا لعزل IFP-MSCs عن المفصل الخانق للماعز وظروف الاستزراع في المختبر لتمددها وتمايزها. تم غسل IFP المعزول بشكل معقم من الماعز وفرمه وهضمه إنزيميا. بعد الترشيح والطرد المركزي ، تم استزراع الخلايا التي تم جمعها. كانت هذه الخلايا ملتصقة ، وكان لها مورفولوجيا تشبه MSCs ، وأظهرت قدرة استنساخ ملحوظة. علاوة على ذلك ، فقد تمايزوا إلى سلالات دهنية ، غضروفية ، وعظمية ، مما يدل على تعدد قدراتهم. في الختام ، توضح الدراسة عزل وتوسع MSCs ، والتي تظهر إمكانات في هندسة الأنسجة وتطبيقات الطب التجديدي.
Introduction
الخلايا الجذعية الوسيطة (MSCs) هي مرشح جذاب للعلاجات القائمة على الخلايا في الطب التجديدي 1,2. يمكن حصادها من مجموعة متنوعة من مصادر الأنسجة مثل نخاع العظام والحبل السري والمشيمة ولب الأسنان والأنسجة الدهنية تحت الجلد3. ومع ذلك ، نظرا لأن توافر الخلايا الجذعية لدى البالغين محدود وغالبا ما يكون إجراء عزلها غازيا (مما يؤدي إلى الإصابة بأمراض موقع المانحين) ، فمن المستحسن أن يكون لديك مصدر بديل للخلايا الجذعية يمكنه التحايل على هذه التحديات.
مفصل الركبة عبارة عن مستودع لأنواع مختلفة من الخلايا ، مثل MSCs المشتقة من وسادة الدهون تحت الرضفة ، و MSCs المشتقة من الغشاء الزليلي ، و MSCs المشتقة من السائل الزليلي ، والخلايا الليفية في الرباط ، والخلايا الغضروفية المفصلية ، إلخ4،5،6. هذه الخلايا لديها القدرة على استكشافها على نطاق واسع في البحوث القائمة على هندسة الأنسجة العضلية الهيكلية. لذلك ، يمكن أن يكون مفصل الركبة مصدرا ممكنا وموثوقا لأنواع متعددة من MSCs. يعد مستودع الدهون الموجود في مفصل الركبة ، والمعروف باسم وسادة الدهون تحت الرضفة (IFP) أو وسادة الدهون في Hoffa ، خيارا واعدا وبديلا لمستودع MSC. يعد IFP مصدرا يسهل الوصول إليه نسبيا ويمكن الحصول عليه سريريا من MSCs ، حيث يتم استئصاله بشكل روتيني والتخلص منه كنفايات جراحية أثناء تنظير الركبة أو جراحة الركبة المفتوحة. ترتبط إزالة IFP بالحد الأدنى من المراضة في موقع المتبرع ، مما يجعله أيضا مصدرا جذابا للأنسجة. على الرغم من وجود نمط ظاهري مماثل، فإن MSCs من IFP-MSCs قد عززت إمكانات استنساخ عند مقارنتها بالخلايا الجذعية الوسيطة المشتقة من نخاع العظم (BM-MSCs)6 وقدرة تكاثرية أفضل مقارنة بالخلايا الجذعية المشتقة من الدهون تحت الجلد (ADSCs)7. ومن المثير للاهتمام ، بالمقارنة مع MSCs المشتقة من السائل الزليلي (SF-MSCs) ، لا تفقد IFP-MSCs قدرتها على التكاثر في الممرات المتأخرة ، ولا تزيد مضاعفة الوقت في الممرات المتأخرة. يشير هذا إلى أنه أثناء توسع الخلايا ، يمكن ل IFP-MSCs تحقيق عدد كبير بما فيه الكفاية من الخلايا لتطبيقات هندسة الأنسجة في المختبر دون المساس بمعدل انتشارها8. أشارت الدراسات الحديثة أيضا إلى أن IFP-MSCs تمتلك إمكانات تمايز غضروفي فائقة مقارنة ب MSCs المشتقة من نخاع العظم (BMSCs) و MSCs المشتقة من الدهون (ADSCs) ، ربما بسبب قربها التشريحي من الغضروف المفصلي ، مما يشير إلى ملاءمتها لهندسة أنسجة الغضاريف6،7،9،10. علاوة على ذلك ، لديهم أيضا إمكانية التمايز العظمي المستقل عن العمر11. ثبت أن الحقن داخل المفصل ل IFP-MSCs يقلل الألم ويحسن وظائف مفصل الركبة لدى مرضى هشاشة العظام (OA) 12,13. علاوة على ذلك ، تم الإبلاغ أيضا عن استجابات قوية مثبطة للمناعة وخصائص مناعية محسنة ل IFP-MSCs في وجود السيتوكينات الالتهابية أثناء الحالات المرضية6.
وتشكل هذه الأفرقة مصدرا واعدا وبديلا للأفرقة المتنقلة؛ ومع ذلك ، فإن فائدتها العلاجية في هندسة الأنسجة والطب التجديدي أقل استكشافا نسبيا. استخدمت الدراسات الحالية على IFP-MSCs بشكل رئيسي خلايا من متبرعين بشريين. من بين هذه الدراسات ، قامت بعض الدراسات الحديثة بالتحقيق في IFP-MSCs من متبرعين بشريين أصحاء (مرضى غير مصابين بالتهاب المفاصل ، تتراوح أعمارهم بين 17-60 عاما) 6,14 ، في حين استخدمت معظم الدراسات IFP-MSCs من المرضى المسنين الذين يخضعون لجراحة استبدال الركبة بالكامل (المرضى المرضى ، الذين تتراوح أعمارهم بين 70-80 عاما). نظرا لأنه من المعروف أن كلا من العمر والمرض يغيران الأداء الطبيعي للخلايا الجذعية (انخفاض العدد وفقدان الإمكانات الوظيفية) ، فقد يؤدي ذلك إلى تناقضات في نتائج الدراسات المستندة إلى MSC7،15،16،17. بالإضافة إلى ذلك ، فإن استخدام IFP-MSCs من المرضى الذين يعانون من حالات فسيولوجية مرضية (مثل التهاب المفاصل والسمنة) يشكل أيضا صعوبة في فهم الخصائص الأساسية للخلايا السليمة في المختبر ، وبالتالي يعمل كعامل مقيد في تطوير العلاجات القائمة على MSCs. للتغلب على هذه المشكلات ، يعد استخدام IFP-MSCs من الجهات المانحة الصحية أمرا حيويا. نظرا لأن الوصول إلى متبرع بشري سليم يمثل تحديا ، يمكن أن تكون النماذج الحيوانية بديلا أفضل. في هذا الصدد ، هناك عدد قليل من الدراسات حيث تم عزل IFP من الفئران18. ومع ذلك ، نظرا لصغر حجم وسادة الدهون في الفئران العادية ، فقد تم دمج الأنسجة الدهنية من متعددة للحصول على أنسجة كافية لتنفيذ إجراءات تجريبية معقدة19. وبالتالي ، هناك حاجة إلى نموذج حيواني كبير ، والذي يمكن أن يفي بمتطلبات العدد الأكبر من الخلايا ويتوافق في نفس الوقت مع مبادئ 3R (التحسين والاستبدال والتقليل) في الأبحاث الحيوانية20. استخدام الحيوانات الكبيرة له آثار كبيرة في البحوث الانتقالية. على وجه التحديد ، في هندسة الأنسجة العضلية الهيكلية ، تم التحقيق في مجموعة من الحيوانات الكبيرة مثل الكلاب والخنازير والأغنام والماعز والخيول21. الماعز (Capra aegagrus hircus) هو اختيار ممتاز للحيوان الكبير لأن مفصله الخانق لديه أقرب تشريح لمفصل الركبة البشري22،23،24. يتشابه الهيكل التربيقي العظمي تحت الغضروفي وسمك عظم الماعز تحت الغضروف مع البشر ، كما تم الإبلاغ عن نسبة الغضروف إلى العظام لتكون قريبة من البشر21. بالإضافة إلى ذلك ، تم تدجين الماعز على نطاق واسع في جميع أنحاء العالم ، مما يجعلها متاحة بسهولة عندما تنضج هيكليا. علاوة على ذلك ، فإن تكاليف الصيانة المنخفضة وسهولة التعامل معها جعلتها نموذجا حيوانيا جذابا للبحث22.
في هذه الدراسة ، تم توضيح بروتوكول بسيط لعزل IFP-MSCs من المفصل الخانق ل Capra aegagrus hircus (الماعز) وظروف الاستزراع في المختبر لتمددها وتمايزها. الخلايا المعزولة ملتصقة ، ولها مورفولوجيا تشبه MSC ، وتشكل مستعمرات CFU-F (الخلايا الليفية المكونة للمستعمرة) ، وتمتلك إمكانات تمايز دهنية ، غضروفية ، وعظمية. لذلك ، تظهر IFP-MSCs إمكانات كمصدر بديل ل MSCs للتطبيقات الطبية الحيوية.
Protocol
Representative Results
Discussion
في البروتوكول الحالي ، تم توفير طريقة بسيطة وموثوقة وقابلة للتكرار لعزل MSCs من IFP الماعز. تم استخدام الخلايا المعزولة باستخدام هذه الطريقة بنجاح في دراساتنا السابقة لتجديد الأنسجة في المختبر. لوحظ أن الخلايا المعزولة كانت تكاثرية ، وكانت تستجيب لعوامل النمو المختلفة ، واحتفظت بنشاطه?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
تقر SH بالدعم المقدم من زمالة معهد ما بعد الدكتوراه في IIT Kanpur ومنحة SYST من DST (قسم SEED) (SP / YO / 618/2018). تعترف AM بالمعهد الهندي للتكنولوجيا – كانبور (IIT-Kanpur) للحصول على زمالة المعهد. تعترف DSK بأستاذ كرسي Gireesh Jankinath وقسم التكنولوجيا الحيوية ، الهند ، للتمويل (BT / PR22445 / MED / 32/571/2016). تشكر AM و SH و DSK مركز عائلة ميهتا للهندسة في الطب في IIT-Kanpur على دعمهم السخي.
Materials
| β-glycerophosphate | Sigma-Aldrich | G9422-10G | 10 mM |
| 0.25% Trypsin- 0.02% EDTA | Hi-Media | TCL049 | |
| 15-mL centrifuge tube | Corning | ||
| 2-Phospho-L-ascorbic acid trisodium salt | Sigma | 49752-10G | 50 µg/mL |
| 2-Propanol | Sigma-Aldrich | I9516 | |
| 4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid (HEPES) | HiMedia | TCL021-50ml | 10 mM |
| 50-mL centrifuge tube | Corning | ||
| Alcian Blue | Hi-Media | RM471 | For sufated gycosaminoglycans staining |
| Alizarin Red S | S D Fine-Chem Limited | 26048-25G | For calcium deposition |
| Amphotericin B | HiMedia | A011 | 2.5 µg/mL |
| Basic fibroblast growth factor (bFGF) | Sino Biologicals | 10014-HNAE | 5 ng/mL |
| BCIP/NBT ALP Substrate | Sigma | B5655-5TAB | For ALP staining |
| Biological safety cabinet | |||
| BSA | HiMedia | MB-083 | Long name: Bovine Serum Albumin (1.25 mg/mL ) |
| Cell strainer | HiMedia | TCP-182 | 70 µm |
| Centrifuge | REMI | ||
| Ciprofloxacin | RANBAXY LAB. Limited | B17407T1 | 2.5 µg/mL |
| Crystal Violet | S D Fine-Chem Limited | 42555 | |
| D(+)-glucose | Merck | 1.94925.0521 | 25 mM |
| Dexamethasone | Sigma-Aldrich | D2915 | 1 µM |
| DMEM LG | SIGMA | D5523 | Long name: Dulbecco’s Modified Eagle’s Media Low Glucose |
| Ethanol | Merck | 100983 | |
| FBS | Gibco | 10270 | Long name: Fetal Bovine Serum |
| Formaldehyde solution 37%-41% | Merck | 61780805001730 | |
| Indomethacin | Sigma-Aldrich | I7378 | 100 µM |
| Insulin | Sigma-Aldrich | I9278 | 10 µg/mL |
| Inverted microscope | Nikon Eclipse TS 100 | ||
| ITS + 1 | Sigma-Aldrich | I2521-5mL | Long name: insulin, transferrin, sodium selenite + linoleic-BSA |
| L-Proline | HiMedia | TO-109-25G | 1 mM |
| Magnesium chloride | Merck | 61751605001730 | For lysis buffer |
| Methanol | Meck | 1.07018.2521 | |
| Micropipettes and sterile tips (20 µL, 200 µL, 1000 µL) | Thermoscientific | ||
| MUSE Cell analyser | Merck Millipore | For cell counting | |
| OCT compound | Tissue-Tek | 4583 | Long name: Optimal Cutting Temperature |
| Oil Red O dye | S D Fine-Chem Limited | 54304 | For lipid vacuole staining |
| Penicillin-Streptomycin | HiMedia | A007 | 100 U/mL |
| Petri dishes (150 mm and 90 mm) | NEST | ||
| Safranin O | S D Fine-Chem Limited | 50240 | For sufated gycosaminoglycans staining |
| Sodium citrate | Sigma-Aldrich | C3434 | 3.4 % (w/v) |
| Sterile scissors, forceps and scalpels | For isolation of IFP-MSC | ||
| Sucrose | Merck | 1.94953.0521 | 35 % (w/v) |
| TGF-β1 | Sino Biologicals | Long name: Transforming growth factor- β1 (10 ng/mL) | |
| Tissue culture incubator 37 °C, 5% CO2 | Thermoscientific | ||
| Tris buffer | Merck | 61771405001730 | For lysis buffer |
| Triton X100 | S D Fine-Chem Limited | 40632 | For lysis buffer |
| Type II collagenase | Gibco | 17101015 | 1.5 mg/mL |
| Vitamin D3 | Sigma | C9756-1G | 10 nM |
| Well plates (6 -WP and 24-WP) | NEST |
References
- Han, Y., et al. Mesenchymal stem cells for regenerative medicine. Cells. 8 (8), (2019).
- Pittenger, M. F., et al. Mesenchymal stem cell perspective: cell biology to clinical progress. NPJ Regenerative Medicine. 4 (1), 22 (2019).
- Guo, Y., Yu, Y., Hu, S., Chen, Y., Shen, Z. The therapeutic potential of mesenchymal stem cells for cardiovascular diseases. Cell Death & Disease. 11 (5), 349 (2020).
- Ge, Z., Goh, J. C. H., Lee, E. H. Selection of cell source for ligament tissue engineering. Cell Transplantation. 14 (8), 573-583 (2005).
- Harvanová, D., Tóthová, T., Sarissky, M., Amrichová, J., Rosocha, J. Isolation and characterization of synovial mesenchymal stem cells. Folia Biologica. 57 (3), 119-124 (2011).
- Kouroupis, D., et al. Infrapatellar fat pad-derived MSC response to inflammation and fibrosis induces an immunomodulatory phenotype involving CD10-mediated Substance P degradation. Scientific Reports. 9 (1), 10864 (2019).
- Lopa, S., et al. Donor-matched mesenchymal stem cells from knee infrapatellar and subcutaneous adipose tissue of osteoarthritic donors display differential chondrogenic and osteogenic commitment. European Cells & Materials. 27, 298-311 (2014).
- Garcia, J., et al. Characterisation of synovial fluid and infrapatellar fat pad derived mesenchymal stromal cells: The influence of tissue source and inflammatory stimulus. Scientific Reports. 6 (1), 24295 (2016).
- Tangchitphisut, P., et al. Infrapatellar fat pad: an alternative source of adipose-derived mesenchymal stem cells. Arthritis. 2016, 4019873 (2016).
- Ding, D. -. C., et al. Human infrapatellar fat pad-derived stromal cells have more potent differentiation capacity than other mesenchymal cells and can be enhanced by hyaluronan. Cell Transplantation. 24 (7), 1221-1232 (2015).
- Khan, W., Adesida, A., Tew, S., Andrew, J., Hardingham, T. The epitope characterisation and the osteogenic differentiation potential of human fat pad-derived stem cells is maintained with ageing in later life. Injury. 40 (2), 150-157 (2009).
- Koh, Y. G., et al. Mesenchymal stem cell injections improve symptoms of knee osteoarthritis. Arthroscopy. 29 (4), 748-755 (2013).
- Koh, Y. G., Choi, Y. J. Infrapatellar fat pad-derived mesenchymal stem cell therapy for knee osteoarthritis. Knee. 19 (6), 902-907 (2012).
- Kouroupis, D., Willman, M. A., Best, T. M., Kaplan, L. D., Correa, D. Infrapatellar fat pad-derived mesenchymal stem cell-based spheroids enhance their therapeutic efficacy to reverse synovitis and fat pad fibrosis. Stem Cell Research & Therapy. 12 (1), 44 (2021).
- Stocco, E., et al. Infrapatellar fat pad stem cells responsiveness to microenvironment in osteoarthritis: from morphology to function. Frontiers in Cell and Developmental Biology. 7, 323 (2019).
- Hindle, P., Khan, N., Biant, L., Péault, B. The infrapatellar fat pad as a source of perivascular stem cells with increased chondrogenic potential for regenerative medicine. Stem Cells Translational Medicine. 6 (1), 77-87 (2017).
- Stolzing, A., Jones, E., McGonagle, D., Scutt, A. Age-related changes in human bone marrow-derived mesenchymal stem cells: consequences for cell therapies. Mechanisms of Ageing and Development. 129 (3), 163-173 (2008).
- Wu, C. L., Diekman, B. O., Jain, D., Guilak, F. Diet-induced obesity alters the differentiation potential of stem cells isolated from bone marrow, adipose tissue and infrapatellar fat pad: the effects of free fatty acids. International Journal of Obesity (2005). 37 (8), 1079-1087 (2013).
- Barboza, E., et al. Profibrotic infrapatellar fat pad remodeling without M1 macrophage polarization precedes knee osteoarthritis in mice with diet-induced obesity. Arthritis & Rheumatology. 69 (6), 1221-1232 (2017).
- Allen, M. J., Hankenson, K. D., Goodrich, L., Boivin, G. P., von Rechenberg, B. Ethical use of animal models in musculoskeletal research. Journal of Orthopaedic Research. 35 (4), 740-751 (2017).
- Moran, C. J., et al. The benefits and limitations of animal models for translational research in cartilage repair. Journal of Experimental Orthopaedics. 3 (1), (2016).
- Kuyinu, E. L., Narayanan, G., Nair, L. S., Laurencin, C. T. Animal models of osteoarthritis: classification, update, and measurement of outcomes. Journal of Orthopaedic Surgery and Research. 11 (1), 19 (2016).
- Chu, C. R., Szczodry, M., Bruno, S. Animal models for cartilage regeneration and repair. Tissue Engineering Part B: Reviews. 16 (1), 105-115 (2010).
- Proffen, B. L., McElfresh, M., Fleming, B. C., Murray, M. M. A comparative anatomical study of the human knee and six animal species. The Knee. 19 (4), 493-499 (2012).
- Bhutada, S. S., Sriram, M., Katti, D. S. Sulfated carboxymethylcellulose conjugated electrospun fibers as a growth factor presenting system for tissue engineering. Carbohydrate Polymers. 268, 118256 (2021).
- Waghmare, N. A., Arora, A., Bhattacharjee, A., Katti, D. S. Sulfated polysaccharide mediated TGF-β1 presentation in pre-formed injectable scaffolds for cartilage tissue engineering. Carbohydrate Polymers. 193, 62-72 (2018).
- Arora, A., Mahajan, A., Katti, D. S. TGF-β1 presenting enzymatically cross-linked injectable hydrogels for improved chondrogenesis. Colloids & Surfaces B: Biointerfaces. 159, 838-848 (2017).
- Arora, A., Sriram, M., Kothari, A., Katti, D. S. Co-culture of infrapatellar fat pad-derived mesenchymal stromal cells and articular chondrocytes in plasma clot for cartilage tissue engineering. Cytotherapy. 19 (7), 881-894 (2017).
- Mahajan, A., Singh, A., Datta, D., Katti, D. S. Bioinspired injectable hydrogels dynamically stiffen and contract to promote mechanosensing-mediated chondrogenic commitment of stem cells. ACS Applied Materials & Interfaces. 14 (6), 7531-7550 (2022).
- Nakano, T., Wang, Y. W., Ozimek, L., Sim, J. S. Chemical composition of the infrapatellar fat pad of swine. Journal of Anatomy. 204 (4), 301-306 (2004).
- Sun, Y., Chen, S., Pei, M. Comparative advantages of infrapatellar fat pad: an emerging stem cell source for regenerative medicine. Rheumatology. 57 (12), 2072-2086 (2018).
- Han, W., et al. Infrapatellar fat pad in the knee: is local fat good or bad for knee osteoarthritis. Arthritis Research & Therapy. 16 (4), 1-8 (2014).
- Bae, S. H., et al. L-ascorbic acid 2-phosphate and fibroblast growth factor-2 treatment maintains differentiation potential in bone marrow-derived mesenchymal stem cells through expression of hepatocyte growth factor. Growth Factors. 33 (2), 71-78 (2015).
- Priya, N., Sarcar, S., Majumdar, A. S., SundarRaj, S. Explant culture: a simple, reproducible, efficient and economic technique for isolation of mesenchymal stromal cells from human adipose tissue and lipoaspirate. Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 8 (9), 706-716 (2014).
- Tsuji, K., et al. Effects of different cell-detaching methods on the viability and cell surface antigen expression of synovial mesenchymal stem cells. Cell Transplantation. 26 (6), 1089-1102 (2017).
- Jing, W., et al. Explant culture: an efficient method to isolate adipose-derived stromal cells for tissue engineering. Artificial Organs. 35 (2), 105-112 (2011).
- Sherman, L. S., Condé-Green, A., Naaldijk, Y., Lee, E. S., Rameshwar, P. An enzyme-free method for isolation and expansion of human adipose-derived mesenchymal stem cells. Journal of Visualized Experiments. (154), e59419 (2019).
- Muttigi, M. S., et al. Matrilin-3 codelivery with adipose-derived mesenchymal stem cells promotes articular cartilage regeneration in a rat osteochondral defect model. Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 12 (3), 667-675 (2018).
- Toghraie, F., et al. Treatment of osteoarthritis with infrapatellar fat pad derived mesenchymal stem cells in Rabbit. The Knee. 18 (2), 71-75 (2011).
- Chen, H. -. H., et al. Infrapatellar fat pad-derived mesenchymal stromal cell product for treatment of knee osteoarthritis: a first-in-human study with evaluation of the potency marker. Cytotherapy. 24 (1), 72-85 (2022).
- Kouroupis, D., Bowles, A. C., Best, T. M., Kaplan, L. D., Correa, D. CD10/Neprilysin enrichment in infrapatellar fat pad-derived mesenchymal stem cells under regulatory-compliant conditions: implications for efficient synovitis and fat pad fibrosis reversal. The American Journal of Sports Medicine. 48 (8), 2013 (2020).
