Hochauflösende Sonographie zur Analyse orthotoper ATC-Tumoren in einem gentechnisch veränderten Mausmodell
Summary
Das vorliegende Protokoll beschreibt die Hochfrequenz-Sonographie zur Darstellung der gesamten Schilddrüse der Maus und zur Überwachung des Wachstums des anaplastischen Schilddrüsenkarzinoms.
Abstract
Das anaplastische Schilddrüsenkarzinom (ATC) ist mit einer schlechten Prognose und einer kurzen medianen Überlebenszeit verbunden, aber keine wirksame Behandlung verbessert die Ergebnisse signifikant. Gentechnisch veränderte Mausmodelle, die das Fortschreiten von ATC nachahmen, könnten Forschern helfen, Behandlungen für diese Krankheit zu untersuchen. Kreuzung von drei verschiedenen Genotypen von Mäusen, einem TPO-cre/ERT2; BrafCA/wt; Trp53 Δex2-10/Δex2-10 transgenes ATC-Modell wurde entwickelt. Das ATC-Mausmodell wurde durch eine intraperitoneale Injektion von Tamoxifen mit Überexpression von BrafV600E und Deletion von Trp53 induziert, und die Tumoren wurden innerhalb von etwa 1 Monat erzeugt. Mittels hochauflösendem Ultraschall wurde die Tumorinitiation und -progression untersucht und die dynamische Wachstumskurve durch Messung der Tumorgrößen ermittelt. Im Vergleich zur Magnetresonanztomographie (MRT) und Computertomographie hat Ultraschall Vorteile bei der Beobachtung des ATC-Mausmodells, z. B. nicht-invasiv, tragbar, in Echtzeit und ohne Strahlenbelastung. Hochauflösender Ultraschall eignet sich für dynamische und Mehrfachmessungen. Die ultrasonographische Untersuchung der Schilddrüse bei Mäusen erfordert jedoch einschlägige anatomische Kenntnisse und Erfahrungen. In diesem Artikel wird ein detailliertes Verfahren zur Verwendung von hochauflösendem Ultraschall zum Scannen von Tumoren im transgenen ATC-Modell beschrieben. In der Zwischenzeit werden die Einstellung der Ultraschallparameter, die Fähigkeiten des Ultraschallscans, die Anästhesie und die Genesung der Tiere sowie andere Elemente, die während des Prozesses beachtet werden müssen, aufgelistet.
Introduction
Obwohl das anaplastische Schilddrüsenkarzinom (ATC) weniger als 2 % der Schilddrüsenkrebserkrankungen ausmacht, verursacht es jährlich mehr als 50 % der Todesfälle im Zusammenhang mit Schilddrüsenkrebs. Die mediane Überlebenszeit nach der Diagnose mit ATC beträgt nur etwa 6 Monate, und es gibt keine Behandlungen, die das Überleben signifikant verbessern 1,2.
Die Seltenheit von ATC hat die Erforschung des Beginns und des aggressiven Fortschreitens der Krankheit behindert. Seit kurzem gibt es gentechnisch veränderte Mausmodelle, die die Krankheit nachahmen und Einblicke in die Krankheitund ihr Ansprechen auf mögliche Behandlungen geben 3,4,5. Solche Untersuchungen erfordern eine genaue Bildgebung des Tumors für Messungen und Überwachung, die in der Regel mit Magnetresonanztomographie, Computertomographie oder hochauflösendem Ultraschall durchgeführt wird 6,7. Die Ultraschalluntersuchung ist bei Mausorganen weit verbreitet. Es hat Vorteile gegenüber der Magnetresonanztomographie und der Computertomographie, da es in Echtzeit durchgeführt werden kann und das Subjekt keiner Strahlung ausgesetzt ist, und die erforderliche Ausrüstung klein genug ist, um tragbar zu sein 8,9. Studien zur kontinuierlichen Überwachung des ATC-Wachstums mittels Ultraschall sind jedoch selten. Daher untersucht diese Arbeit den Nutzen von Ultraschall in diesem Zusammenhang.
In dieser Arbeit wird ein Protokoll zur Verwendung hochauflösender Ultraschalluntersuchungen zur genauen Untersuchung, Überwachung und Vermessung von Tumoren in einem Mausmodell der ATC vorgestellt.
Protocol
Representative Results
Discussion
Dieses Protokoll verwendet hochauflösende Ultraschalluntersuchungen, um orthotope ATC-Tumore in einem gentechnisch veränderten Mausmodell zu analysieren. Das transgene Modell mit einem Genotyp von TPO-cre/ERT2; BrafCA/wt; Trp53 Δex2-10/Δex2-10 wurde in unserem Labor entwickelt. Die Tiere überexprimieren BrafV600E und es fehlt Trp53; Die intraperitoneale Injektion von Tamoxifen führt nach ca. 1 Monat zu einem Tumorwachstum10. Die Tumore wachs…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Diese Forschung erhielt keine spezifischen Zuschüsse von öffentlichen, kommerziellen oder gemeinnützigen Förderorganisationen.
Materials
| Adhesive tape | Winner | ||
| Anesthesia system | RWDlifescience | ||
| Brafflox/wt mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
| Chamber for anesthesia induction | RWDlifescience | ||
| Cotton swabs | Winner | ||
| Depilatory cream | Veet | ||
| Electric heating blanket | Petbee | ||
| Isoflurane vaporizer | RWDlifescience | ||
| Medical gloves | Winner | ||
| Paper towels | Breeze | B914JY | |
| TPO-cre/ERT2 mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
| Trp53flox/wt mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
| Ultrasound gel | Keppler | KL-250 | |
| Ultrasound machine | VisualSonics | Vevo 3100 |
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