Summary

Cartographie cérébrale à l’aide d’un réseau d’électrodes en graphène

Published: October 20, 2023
doi:

Summary

Nous présentons une procédure de cartographie cérébrale basée sur des réseaux de graphène pour réduire le caractère invasif et améliorer la résolution spatio-temporelle. Les électrodes de surface à base de graphène présentent une biocompatibilité à long terme, une flexibilité mécanique et une aptitude à la cartographie cérébrale dans un cerveau alambiqué. Ce protocole permet de construire plusieurs formes de cartes sensorielles simultanément et séquentiellement.

Abstract

Les cartes corticales représentent l’organisation spatiale des réponses neuronales dépendantes de l’emplacement aux stimuli sensorimoteurs dans le cortex cérébral, permettant la prédiction de comportements physiologiquement pertinents. Diverses méthodes, telles que les électrodes pénétrantes, l’électroencéphalographie, la tomographie par émission de positons, la magnétoencéphalographie et l’imagerie par résonance magnétique fonctionnelle, ont été utilisées pour obtenir des cartes corticales. Cependant, ces méthodes sont limitées par une faible résolution spatio-temporelle, un faible rapport signal/bruit (SNR), des coûts élevés et la non-biocompatibilité ou causent des dommages physiques au cerveau. Cette étude propose une méthode de cartographie somatosensorielle basée sur des réseaux de graphène en tant que caractéristique de l’électrocorticographie qui offre une biocompatibilité supérieure, une résolution spatio-temporelle élevée, un rapport signal/bruit souhaitable et des lésions tissulaires minimisées, surmontant ainsi les inconvénients des méthodes précédentes. Cette étude a démontré la faisabilité d’un réseau d’électrodes en graphène pour la cartographie somatosensorielle chez le rat. Le protocole présenté peut être appliqué non seulement au cortex somatosensoriel, mais aussi à d’autres cortex tels que le cortex auditif, visuel et moteur, fournissant une technologie de pointe pour la mise en œuvre clinique.

Introduction

Une carte corticale est un ensemble de patchs locaux représentant les propriétés de réponse aux stimuli sensorimoteurs dans le cortex cérébral. Il s’agit d’une formation spatiale de réseaux neuronaux qui permettent de prédire la perception et la cognition. Par conséquent, les cartes corticales sont utiles pour évaluer les réponses neuronales aux stimuli externes et traiter les informations sensorimotrices 1,2,3,4. Des méthodes invasives et non invasives sont disponibles pour la cartographie corticale. L’une des méthodes invasives les plus courantes implique l’utilisation d’électrodes intracorticales (ou pénétrantes) pour cartographier 5,6,7,8.

L’évaluation des cartes corticales à haute résolution à la demande à l’aide d’électrodes pénétrantes s’est heurtée à plusieurs obstacles. La méthode est trop laborieuse pour obtenir une carte décente et trop invasive pour être mise en œuvre pour un usage clinique, ce qui empêche tout développement ultérieur. Des technologies plus récentes telles que l’électroencéphalographie (EEG), la tomographie par émission de positons (TEP), la magnétoencéphalographie (MEG) et l’imagerie par résonance magnétique fonctionnelle (IRMf) ont gagné en popularité parce qu’elles sont moins invasives et reproductibles. Cependant, compte tenu de leurs coûts prohibitifs et de leur faible résolution, ils sont utilisés dans un nombre limité de cas 9,10,11. Récemment, les électrodes de surface flexibles avec une fiabilité de signal supérieure ont attiré une attention considérable. Les électrodes de surface à base de graphène démontrent une biocompatibilité à long terme et une flexibilité mécanique, fournissant des enregistrements stables dans un cerveau alambiqué 12,13,14,15,16. Notre groupe a récemment mis au point un réseau multicanal à base de graphène pour l’enregistrement haute résolution et la neurostimulation spécifique au site sur la surface corticale. Cette technologie nous permet de garder une trace des représentations corticales de l’information sensorielle pendant une période prolongée.

Cet article décrit les étapes de l’acquisition d’une carte cérébrale du cortex somatosensoriel à l’aide d’un réseau multi-électrodes en graphène à 30 canaux. Pour mesurer l’activité cérébrale, un réseau d’électrodes en graphène est placé sur la zone sous-durale du cortex, tandis que la patte avant, le membre antérieur, la patte arrière, le membre postérieur, le tronc et les moustaches sont stimulés avec un bâton en bois. Les potentiels évoqués somatosensoriels (PES) sont enregistrés pour les aires somatosensorielles. Ce protocole peut également être appliqué à d’autres zones du cerveau, telles que le cortex auditif, visuel et moteur.

Protocol

Toutes les procédures de manipulation des animaux ont été approuvées par le Comité institutionnel de soins et d’utilisation des animaux de l’Université nationale d’Incheon (INU-ANIM-2017-08). 1. Préparation de l’animal à la chirurgie REMARQUE : Utilisez Sprague Dawley Rat (8-10 semaines) sans biais sexuel pour cette expérience. Anesthésier le rat avec 90 mg/kg de kétamine et 10 mg/kg de xylazine par voie intrapéritoné…

Representative Results

Ce protocole décrit comment un réseau multicanal de graphène est monté à la surface du cerveau. La carte somatosensorielle a été construite en acquérant des réponses neuronales à des stimuli physiques et en calculant l’amplitude de la réponse. La figure 1 montre le schéma de cette expérience. La figure 2A présente les caractéristiques structurelles d’un réseau d’électrodes en graphène. Il y a des trous traversa…

Discussion

Le protocole présenté fournit un processus approfondi, étape par étape, qui explique comment accéder aux réponses somatosensorielles des rats et les cartographier à l’aide d’un réseau d’électrodes en graphène. Les données acquises par le protocole sont des SEP qui fournissent des informations somatosensorielles qui sont synaptiquement liées à chaque partie du corps.

Plusieurs aspects de ce protocole doivent être pris en considération. Lors de l’extraction du liquide cép…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Ce travail a été soutenu par l’Université nationale d’Incheon (coopérative internationale) pour Sunggu Yang.

Materials

1mL syringe KOREAVACCINE CORPORATION injecting the drug for anesthesia 
3mL syringe KOREAVACCINE CORPORATION injecting the drug for anesthesia 
Bone rongeur Fine Science Tools 16220-14 remove the skull
connector Gbrain Connect graphene electrode to headstage
drill FALCON tool grind the skull
drill bits Osstem implant grind the skull
Graefe iris forceps slightly curved serrated vubu vudu-02-73010 remove the tissue from the skull or hold wiper
graphene multielectrode array Gbrain records signals from neuron
isoflurane Hana Pharm Corporation sacrifce the subject
ketamine yuhan corporation used for anesthesia
lidocaine(2%) Daihan pharmaceutical  local anesthetic
Matlab R2021b Mathworks Data analysis Software
mosquito hemostats Fine Science Tools 91309-12 fasten the scalp
ointment Alcon prevent eye from drying out 
povidone Green Pharmaceutical corporation disinfect the incision area
RHS 32ch Stim/Record headstage intan technologies M4032 connect connector to interface cable and contain intan RHS stim/amplifier chip
RHS 6-ft (1.8m) Stim SPI interface cable intan technologies M3206 connect graphene electrode to headstage
RHS Stim/Recording controller software intan technologies Data Acquisition Software
RHS stimulation/ Recording controller intan technologies M4200
saline JW Pharmaceutical
scalpel Hammacher HSB 805-03
stereotaxic instrument stoelting fasten the subject
sterile Hypodermic Needle KOREAVACCINE CORPORATION remove the dura mater
Steven Iris Tissue Forceps KASCO 50-2026 remove the dura mater
surgical blade no.11 FEATHER inscise the scalp
surgical sicssors Fine Science Tools 14090-09 inscise the scalp and remove the dura mater
wooden stick whisker stimulation
xylazine Bayer Korea used for anesthesia

References

  1. Leergaard, T. B., et al. Rat somatosensory cerebropontocerebellar pathways: spatial relationships of the somatotopic map of the primary somatosensory cortex are preserved in a three-dimensional clustered pontine map. Journal of Comparative Neurology. 422 (2), 246-266 (2000).
  2. Craner, S. L., Ray, R. H. Somatosensory cortex of the neonatal pig: I. Topographic organization of the primary somatosensory cortex (SI). Journal of Comparative Neurology. 306 (1), 24-38 (1991).
  3. Benison, A. M., Rector, D. M., Barth, D. S. Hemispheric mapping of secondary somatosensory cortex in the rat. Journal of Neurophysiology. 97 (1), 200-207 (2007).
  4. Lee, M., et al. Graphene-electrode array for brain map remodeling of the cortical surface. NPG Asia Materials. 13 (1), (2021).
  5. Yang, S. C., Weiner, B. D., Zhang, L. S., Cho, S. J., Bao, S. W. Homeostatic plasticity drives tinnitus perception in an animal model. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 108 (36), 14974-14979 (2011).
  6. Yang, S., Zhang, L. S., Gibboni, R., Weiner, B., Bao, S. W. Impaired development and competitive refinement of the cortical frequency map in tumor necrosis factor-alpha-deficient mice. Cerebral Cortex. 24 (7), 1956-1965 (2014).
  7. Miyakawa, A., et al. Tinnitus correlates with downregulation of cortical glutamate decarboxylase 65 expression but not auditory cortical map reorganization. Journal of Neuroscience. 39 (50), 9989-10001 (2019).
  8. Yang, S., Su, W., Bao, S. Long-term, but not transient, threshold shifts alter the morphology and increase the excitability of cortical pyramidal neurons. Journal of Neurophysiology. 108 (6), 1567-1574 (2012).
  9. Beniczky, S., Schomer, D. L. Electroencephalography: basic biophysical and technological aspects important for clinical applications. Epileptic Disorders. 22 (6), 697-715 (2020).
  10. Kim, S. G., Richter, W., Uğurbil, K. Limitations of temporal resolution in functional MRI. Magnetic Resonance Medicine. 37 (4), 631-636 (1997).
  11. Cho, Z. H., et al. A fusion PET-MRI system with a high-resolution research tomograph-PET and ultra-high field 7.0 T-MRI for the molecular-genetic imaging of the brain. Proteomics. 8 (6), 1302-1323 (2008).
  12. Viventi, J., et al. Flexible, foldable, actively multiplexed, high-density electrode array for mapping brain activity in vivo. Nature Neuroscience. 14 (12), 1599-1605 (2011).
  13. Masvidal-Codina, E., et al. High-resolution mapping of infraslow cortical brain activity enabled by graphene microtransistors. Nature Materials. 18 (3), 280-288 (2019).
  14. Blaschke, B. M., et al. Mapping brain activity with flexible graphene micro-transistors. 2D Materials. 4 (2), 025040 (2017).
  15. Park, S. W., et al. Epidural electrotherapy for epilepsy. Small. 14 (30), 1801732 (2018).
  16. Lim, J., et al. Hybrid graphene electrode for the diagnosis and treatment of epilepsy in free-moving animal models. NPG Asia Materials. 15 (1), 7 (2023).
  17. Hermanns, H., et al. Molecular mechanisms of action of systemic lidocaine in acute and chronic pain: a narrative review. British Journal of Anaesthesia. 123 (3), 335-349 (2019).
  18. Tchoe, Y., et al. Human brain mapping with multithousand-channel PtNRGrids resolves spatiotemporal dynamics. Science Translational Medicine. 14 (628), (2022).
  19. Wilent, W. B., Contreras, D. Dynamics of excitation and inhibition underlying stimulus selectivity in rat somatosensory cortex. Nature Neuroscience. 8 (10), 1364-1370 (2005).
  20. Insanally, M. N., Köver, H., Kim, H., Bao, S. Feature-dependent sensitive periods in the development of complex sound representation. Journal of Neuroscience. 29 (17), 5456-5462 (2009).
check_url/kr/64910?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Kim, D., Jeong, M., Kim, E., Kim, G., Na, J., Yang, S. Brain Mapping Using a Graphene Electrode Array. J. Vis. Exp. (200), e64910, doi:10.3791/64910 (2023).

View Video