Summary

Mapeamento Cerebral Usando um Arranjo de Eletrodos de Grafeno

Published: October 20, 2023
doi:

Summary

Apresentamos um procedimento de mapeamento cerebral baseado em arranjo de grafeno para reduzir a invasividade e melhorar a resolução espaço-temporal. Eletrodos de superfície baseados em arranjo de grafeno exibem biocompatibilidade de longo prazo, flexibilidade mecânica e adequação para mapeamento cerebral em um cérebro complicado. Este protocolo permite a construção simultânea e sequencial de múltiplas formas de mapas sensoriais.

Abstract

Os mapas corticais representam a organização espacial das respostas neurais dependentes da localização a estímulos sensório-motores no córtex cerebral, permitindo a predição de comportamentos fisiologicamente relevantes. Vários métodos, como eletrodos penetrantes, eletroencefalografia, tomografia por emissão de pósitrons, magnetoencefalografia e ressonância magnética funcional, têm sido utilizados para a obtenção de mapas corticais. No entanto, esses métodos são limitados por baixa resolução espaço-temporal, baixa relação sinal-ruído (SNR), altos custos e não biocompatibilidade ou causam danos físicos ao cérebro. Este estudo propõe um método de mapeamento somatossensorial baseado em arranjo de grafeno como uma característica da eletrocorticografia que oferece biocompatibilidade superior, alta resolução espaço-temporal, SNR desejável e dano tecidual minimizado, superando as desvantagens dos métodos anteriores. Este estudo demonstrou a viabilidade de um arranjo de eletrodos de grafeno para mapeamento somatossensorial em ratos. O protocolo apresentado pode ser aplicado não apenas ao córtex somatossensorial, mas também a outros córtices, como o córtex auditivo, visual e motor, fornecendo tecnologia avançada para implementação clínica.

Introduction

Um mapa cortical é um conjunto de manchas locais que representam propriedades de resposta a estímulos sensório-motores no córtex cerebral. Eles são uma formação espacial de redes neurais e permitem a previsão para percepção e cognição. Portanto, mapas corticais são úteis na avaliação de respostas neurais a estímulos externos e no processamento de informações sensório-motoras1,2,3,4. Métodos invasivos e não invasivos estão disponíveis para mapeamento cortical. Um dos métodos invasivos mais comuns envolve o uso de eletrodos intracorticais (ou penetrantes) para mapeamento 5,6,7,8.

A avaliação de mapas corticais de alta resolução sob demanda usando eletrodos penetrantes tem enfrentado vários obstáculos. O método é muito trabalhoso para obter um mapa decente e muito invasivo para ser implementado para uso clínico, proibindo o desenvolvimento posterior. Tecnologias mais recentes, como eletroencefalografia (EEG), tomografia por emissão de pósitrons (PET), magnetoencefalografia (MEG) e ressonância magnética funcional (fMRI), têm ganhado popularidade por serem menos invasivas e reprodutíveis. No entanto, devido aos seus custos proibitivos e baixa resolução, são utilizados em um número limitado de casos 9,10,11. Recentemente, eletrodos de superfície flexíveis com confiabilidade de sinal superior têm atraído considerável atenção. Eletrodos de superfície à base de grafeno demonstram biocompatibilidade e flexibilidade mecânica a longo prazo, proporcionando registros estáveis em um cérebro complicado 12,13,14,15,16. Nosso grupo desenvolveu recentemente uma matriz multicanal baseada em grafeno para gravação de alta resolução e neuroestimulação sítio-específica na superfície cortical. Essa tecnologia nos permite acompanhar as representações corticais das informações sensoriais por um longo período.

Este artigo descreve as etapas envolvidas na aquisição de um mapa cerebral do córtex somatossensorial usando um arranjo multieletrodo de grafeno de 30 canais. Para medir a atividade cerebral, um arranjo de eletrodos de grafeno é colocado na área subdural do córtex, enquanto a pata ante, o membro anterior, a pata traseira, o membro posterior, o tronco e os bigodes são estimulados com uma vara de madeira. Os potenciais evocados somatossensoriais (PESs) são registrados para áreas somatossensoriais. Esse protocolo também pode ser aplicado a outras áreas cerebrais, como o córtex auditivo, visual e motor.

Protocol

Todos os procedimentos de manejo de animais foram aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Universidade Nacional de Incheon (INU-ANIM-2017-08). 1. Preparo do animal para a cirurgia NOTA: Use Sprague Dawley Rat (8-10 semanas de idade) sem o viés sexual para este experimento. Anestesiar o rato com 90 mg/kg de cetamina e 10 mg/kg de coquetel de xilazina por via intraperitoneal. Para manter a profundidade de aneste…

Representative Results

Este protocolo descreve como uma matriz multicanal de grafeno é montada na superfície do cérebro. O mapa somatossensorial foi construído por meio da aquisição de respostas neurais a estímulos físicos e do cálculo da amplitude da resposta. A Figura 1 mostra o esquema desse experimento. A Figura 2A apresenta as características estruturais de um arranjo de eletrodos de grafeno. Há furos do substrato entre os eletrodos. Esses o…

Discussion

O protocolo apresentado fornece um processo detalhado e passo a passo que explica como acessar e mapear as respostas somatossensoriais de ratos usando um arranjo de eletrodos de grafeno. Os dados adquiridos pelo protocolo são SEPs que fornecem informações somatossensoriais que estão sinapticamente ligadas a cada parte do corpo.

Vários aspectos desse protocolo devem ser considerados. Ao extrair o líquido cefalorraquidiano para prevenir o edema cerebral e atenuar a inflamação, é crucial…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Este trabalho foi apoiado pela Universidade Nacional de Incheon (Cooperativa Internacional) para Sunggu Yang.

Materials

1mL syringe KOREAVACCINE CORPORATION injecting the drug for anesthesia 
3mL syringe KOREAVACCINE CORPORATION injecting the drug for anesthesia 
Bone rongeur Fine Science Tools 16220-14 remove the skull
connector Gbrain Connect graphene electrode to headstage
drill FALCON tool grind the skull
drill bits Osstem implant grind the skull
Graefe iris forceps slightly curved serrated vubu vudu-02-73010 remove the tissue from the skull or hold wiper
graphene multielectrode array Gbrain records signals from neuron
isoflurane Hana Pharm Corporation sacrifce the subject
ketamine yuhan corporation used for anesthesia
lidocaine(2%) Daihan pharmaceutical  local anesthetic
Matlab R2021b Mathworks Data analysis Software
mosquito hemostats Fine Science Tools 91309-12 fasten the scalp
ointment Alcon prevent eye from drying out 
povidone Green Pharmaceutical corporation disinfect the incision area
RHS 32ch Stim/Record headstage intan technologies M4032 connect connector to interface cable and contain intan RHS stim/amplifier chip
RHS 6-ft (1.8m) Stim SPI interface cable intan technologies M3206 connect graphene electrode to headstage
RHS Stim/Recording controller software intan technologies Data Acquisition Software
RHS stimulation/ Recording controller intan technologies M4200
saline JW Pharmaceutical
scalpel Hammacher HSB 805-03
stereotaxic instrument stoelting fasten the subject
sterile Hypodermic Needle KOREAVACCINE CORPORATION remove the dura mater
Steven Iris Tissue Forceps KASCO 50-2026 remove the dura mater
surgical blade no.11 FEATHER inscise the scalp
surgical sicssors Fine Science Tools 14090-09 inscise the scalp and remove the dura mater
wooden stick whisker stimulation
xylazine Bayer Korea used for anesthesia

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Cite This Article
Kim, D., Jeong, M., Kim, E., Kim, G., Na, J., Yang, S. Brain Mapping Using a Graphene Electrode Array. J. Vis. Exp. (200), e64910, doi:10.3791/64910 (2023).

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