Summary

ラット鍼治療実験におけるラットジャケットを用いた懸濁液固定の改善

Published: August 18, 2023
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Summary

ここでは、鍼治療実験中にラットを効果的に固定するために、ラットジャケットを用いた改良された懸濁液固定法を紹介します。さらに、この固定装置の構造と用途、ならびに電気鍼治療におけるその利用のための指示と評価が解明される。

Abstract

基礎的な実験鍼灸研究では、実験動物としてラットが一般的に用いられます。しかし、姿勢を固定することは困難です。電気鍼治療では、ラットの適切な固定が不可欠です。現在、ラット固定には、麻酔固定、高台固定、結合固定、自作ラットコートによる固定など、さまざまな方法が使用されています。しかし、これらの方法には限界があり、実験の効率や操作性にある程度影響する可能性があります。このプロトコルは、ラットの服を使用してラットを吊り下げて固定する方法を紹介します。まず、ネズミは体型に合ったネズミのジャケットを着せ、暗闇や穴を掘ることを好みます。ニードリング操作は、ラットがラットの服を着た後に実行できます。吊り下げられたとき、ネズミは手足を動かすことができないため、比較的静止しています。この固定方法は、経済的でユーザーフレンドリーな利点を提供するだけでなく、ラットを快適にリラックスした位置で安定して確実に固定することができます。また、時間消費、実験スペース、人的資源を効果的に最小限に抑えます。さらに、この方法では、ラットの鍼治療に使用されるほとんどの経穴の露出が可能になります。この記事では、主にデバイスの構成に焦点を当て、特別に設計されたラットジャケット、高架固定ラック、およびそれらの接続構造を網羅します。さらに、ラットの電気鍼治療手順におけるラットの衣服ベースの懸濁液固定法の適用を示すために、実例が提示されます。

Introduction

鍼治療は、病気の予防と治療のために特定のツボやその他の位置にニードルリングすることを特徴とする伝統的な治療法です。電気鍼治療は、糸状鍼と電気刺激1を組み合わせ、関連するパラメータを調整することで刺激量を正確に制御することができ、鍼治療標準化を促進します2。近年、電気鍼治療のメカニズムに関する研究は拡大・深化を続けており3,4、電気鍼治療のメカニズムに着目した研究が年々増加している5。

電気鍼治療の基礎研究では、ラットが最も一般的に使用される動物です。電気鍼治療中、レシピエントはスムーズな手順を確実にするために静止している必要があります。ヒトを対象とした臨床試験とは異なり、動物実験で使用される小動物は、15〜30分間の電気鍼治療手順中に意識的にコマンドに従うことはできません。これは、安定した信頼性の高い固定を実現するという主要な課題を研究者に提示します。不適切な固定は、動物に不安、抑うつ、恐怖などのネガティブな感情をもたらす可能性があり6、ラットの怪我のリスクや実験担当者の咬まれる可能性を高めるだけでなく、研究結果の安定性と説得力にも影響を与えます。

以前の研究では、研究者は鍼治療または電気鍼治療の手術の前に、麻酔固定7、高プラットフォーム固定8、結合固定6,9、またはラットコート固定10をしばしば使用してきました。しかし、麻酔が身体11や脳機能12に及ぼす影響や、臨床例では意識のある患者に鍼治療が行われていることを考えると、麻酔は研究成果にある程度影響を与える可能性がある。したがって、麻酔固定と比較して、覚醒状態でのラットの快適な固定はより良い選択肢です。

しかしながら、麻酔をかけていない状態では、ラット10のラットコートの被覆によるツボ曝露の制限、手術13、調整不可能な固定具サイズ14、または強制位置6におけるラットのストレス状態など、様々な固定方法にもそれぞれの限界がある.これらの技術的問題に対処するために、ラットの体のほとんどの部分で鍼治療に適したラットジャケットと固定ラックを設計しました。これは、研究者がラットの鍼治療を効率的に行うのに役立ちます。

このプロトコルの理論的根拠は、まず、ネズミのジャケットの閉じたヘッドギアが、ネズミの暗闇や穴掘りに対する自然な傾向を利用し、活動範囲を制限することです。第二に、ラットの手足の関節の近くにある縛りロープは、物理的な圧迫拘束を提供し、ラットの動きに一定の制限を課します。しかし、ネズミはジャケットを着ていてもジャンプしたり、水平に移動したりすることができます。最後に、ラットは吊り下げられた状態では一定の力点がないと地面に触れることができないため、ラットジャケットにサスペンション固定装置を追加し、ラットの動きをさらに制限し、針の保持を確保しました。固定装置の構成を 図1に示す。

Figure 1
1:ラットジャケットとサスペンション固定の模式図。(A)平面図でのラットジャケットの一般的な外観。(B)ラットジャケットの3次元図。(C)頭と腰の後ろのツボ付近に切り込みが入った特製仕立てのラットジャケット。(D)高架ラックに同時に吊り下げられた複数のネズミのイラスト。1:生地の全体像。2:前肢出口;3:後肢の出口;4:ロープを結ぶ;5:縫合後に形成された空洞;6:頭のツボを露出させるための切開。7:背中と腰のツボを露出させるための切開。8:縫合位置。この図の拡大版をご覧になるには、ここをクリックしてください。

Protocol

この研究でラットに実施されたすべての手順は、中華人民共和国によって正式に採択された実験動物福祉および倫理審査ガイドライン(2018)の国家基準および国立アカデミープレスの実験動物のケアと使用に関するガイド15に準拠していました。このプロトコルは、3つの主要なステップで構成されています。まず、ラットジャケットは、体重の異なるラットの個々の体型に基?…

Representative Results

本実験では、合計12匹のラットを電気鍼治療用に選別し、固定法下での反応を観察した( 表2参照)。12匹のラットのうち、15分間の電気鍼保持期間中に激しい闘争を示したのは1匹のみであった。その激しい動きの結果、針は途中で外れ、ネズミの総数の8.33%を占めました。この結果は、一般的に使用される固定法が顕著な安定性と信頼性を示すことを示唆しています。1匹のラットが…

Discussion

電気鍼治療は、認知障害16,17、心筋損傷18、炎症性疼痛19などのさまざまな疾患に良好な治療効果があることが示されています。その作用機序を理解するために、主にラットを用いた動物実験が行われています。正確な結果を得るためには、処置中の動物の固定が重要です。多くの研究が動物の麻酔後に電気鍼治?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

著者らは、本論文の図2の作成に使用した資料を認証ライセンスID:URUUO5699eで提供してくれたHome for ResearchersのFigdraw科学研究図面プラットフォームに感謝の意を表します。この研究は、中国国家自然科学基金会(81873380、82074566年)、湖北省自然科学基金会(2022CFCO43)、および国家中医薬管理局の全国有名漢方薬遺産スタジオ建設プロジェクト([2022] No.5、[2022] No.75)の助成金から支援を受けています。

Materials

75% alcohol Shandong Lircon medical technology co., ltd 2002-0059 Disinfection
acupuncture needles Beijing Luo ya shan chuan medical equipment co., Ltd. needling
Adult Sprague-Dawley (SD) rats Liaoning Changsheng biotechnology co., Ltd. SCXK 2020-0001 The recipient  subjected to fixation
an elevated fixation rack  Taizhou shiai instruments and equipments for scientific and teaching research  Co., ltd / Fix rats
Hans electronic acupuncture apparatus Beijing Huayun Ante Science and Technology Co. Ltd.  HANS-200A electroacupuncture
Medical cotton ball Jiangsu Misawa Medical Supplies Co., Ltd. 20172142357 Disinfection
Pet electric clipper Fenghua Xikou Lubao Knives & Scissors Electrical Appliance Factory / Shave the hair of rats
Tweezers Qingdao Schultz Biotechnology Co., ltd Pinch cotton balls

References

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Cite This Article
Liu, Q., Xiong, C., Liu, B., You, M., Du, Y., Liu, J. Improved Suspension Fixation Using Rat Jacket in Rat Acupuncture Experiments. J. Vis. Exp. (198), e65652, doi:10.3791/65652 (2023).

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