Miglioramento della fissazione della sospensione con la giacca di ratto negli esperimenti di agopuntura del ratto

Summary

Qui, presentiamo un metodo di fissaggio della sospensione migliorato utilizzando una giacca di ratto per immobilizzare efficacemente i ratti durante gli esperimenti di agopuntura. Inoltre, viene chiarita la struttura e l’applicazione di questo apparecchio di fissazione, nonché le istruzioni e la valutazione per il suo utilizzo nella terapia di elettroagopuntura.

Abstract

Nella ricerca sperimentale di base sull’agopuntura, i ratti sono comunemente usati come animali da laboratorio. Tuttavia, è difficile per loro mantenere una postura fissa. Durante le procedure di elettroagopuntura, è essenziale una corretta immobilizzazione dei ratti. Attualmente vengono utilizzati vari metodi di fissazione dei ratti, tra cui la fissazione per anestesia, la fissazione a piattaforma alta, la fissazione vincolante e la fissazione con un cappotto per ratti autocostruito. Tuttavia, questi metodi hanno i loro limiti, che possono influenzare in una certa misura l’efficienza e l’operabilità dell’esperimento. Questo protocollo introduce un metodo per sospendere e fissare i ratti usando vestiti per topi. In primo luogo, i ratti sono vestiti con giacche da topo che si adattano alla forma del loro corpo, approfittando della loro preferenza per l’oscurità e la tana. L’operazione di agugliatura può quindi essere eseguita dopo che i ratti hanno indossato abiti per topi. Quando sono sospesi, i ratti sono relativamente immobili, poiché i loro arti non possono muoversi. Questo metodo di fissaggio offre non solo vantaggi economici e facili da usare, ma garantisce anche una fissazione stabile e affidabile dei ratti in una posizione comodamente rilassata. Inoltre, riduce al minimo il consumo di tempo, lo spazio sperimentale e le risorse di manodopera. Inoltre, questo metodo consente l’esposizione della maggior parte dei punti di agopuntura utilizzati per l’agopuntura nei ratti. Questo articolo si concentra principalmente sulla composizione del dispositivo, che comprende una giacca per topi appositamente progettata, un rack di fissaggio rialzato e le loro strutture di collegamento. Inoltre, verrà presentato un esempio illustrativo per dimostrare l’applicazione del metodo di fissazione della sospensione basato su indumenti per ratti nelle procedure di elettroagopuntura per ratti.

Introduction

L’agopuntura è una terapia tradizionale caratterizzata dall’agugliatura in punti di agopuntura specifici o in altre posizioni per prevenire e curare le malattie. L’elettroagopuntura combina aghi filiformi con la stimolazione elettrica¹, che consente un controllo preciso sulla quantità di stimolazione regolando i parametri rilevanti, promuovendo la standardizzazione del trattamento di agopuntura². Negli ultimi anni, la ricerca sui meccanismi dell’elettroagopuntura ha continuato ad espandersi e approfondire^3,4, il che ha portato a un aumento annuale degli studi incentrati sui meccanismi dell’elettroagopuntura⁵.

Nella ricerca di base sull’elettroagopuntura, i ratti sono gli animali più comunemente usati. Durante il trattamento di elettroagopuntura, il ricevente deve rimanere fermo per garantire una procedura senza intoppi. A differenza degli studi clinici su soggetti umani, i piccoli animali utilizzati negli esperimenti sugli animali non possono seguire consapevolmente i comandi durante le procedure di elettroagopuntura della durata di 15-30 minuti. Ciò pone i ricercatori di fronte a una sfida primaria per ottenere una fissazione stabile e affidabile. Una fissazione impropria può portare a emozioni negative come ansia, depressione e paura negli animali⁶, il che non solo aumenta il rischio di lesioni per i ratti e la possibilità di essere morsi per il personale sperimentale, ma influisce anche sulla stabilità e sulla persuasività dei risultati della ricerca.

In studi precedenti, i ricercatori hanno spesso utilizzato la fissazione per anestesia⁷, la fissazione a piattaforma alta⁸, la fissazione vincolante ^6,9 o la fissazione a cappotto di ratto¹⁰ prima delle operazioni di agopuntura o elettroagopuntura. Tuttavia, dati gli effetti dell’anestesia sul corpo¹¹ e sulla funzione cerebrale¹², e considerando che l’agopuntura viene eseguita su pazienti coscienti in casi clinici, l’anestesia può avere un impatto sui risultati della ricerca in una certa misura. Pertanto, rispetto alla fissazione dell’anestesia, la fissazione confortevole dei ratti in uno stato di veglia è un’opzione migliore.

Tuttavia, nello stato non anestetizzato, vari metodi di fissazione possiedono anche le rispettive limitazioni, tra cui l’esposizione limitata dei punti di agopuntura a causa della copertura del mantello del ratto sui ratti 10, la necessità di almeno due individui per eseguire l’operazione¹³, la dimensione del fissatore non regolabile¹⁴ o lo stato di stress dei ratti in posizione forzata⁶. Per risolvere questi problemi tecnici, abbiamo progettato una giacca per ratti e una rastrelliera di fissaggio adatta alla manipolazione dell’agopuntura nella maggior parte delle parti del corpo del ratto. Questo può aiutare i ricercatori a eseguire in modo efficiente le procedure di agopuntura con i ratti.

La logica di questo protocollo è la seguente: in primo luogo, il copricapo chiuso sulla giacca del ratto sfrutta la naturale inclinazione dei ratti per l’oscurità e la tanta, limitando così il loro raggio d’azione. In secondo luogo, le corde di legatura vicino alle articolazioni degli arti dei ratti forniscono un contenimento fisico della compressione, imponendo alcune limitazioni ai loro movimenti. Tuttavia, i ratti sono ancora in grado di saltare e muoversi orizzontalmente anche indossando la giacca. Infine, poiché i ratti non possono toccare il suolo senza un punto di forza fisso quando sono sospesi, abbiamo aggiunto un dispositivo di fissaggio della sospensione alla giacca del ratto, limitando ulteriormente i loro movimenti e garantendo la ritenzione dell’ago. La composizione del dispositivo di fissaggio è mostrata nella Figura 1.

Figura 1: Diagramma schematico della giacca di ratto e del fissaggio della sospensione. (A) L’aspetto generale della giacca di ratto in una vista piana. (B) Vista tridimensionale della giacca del ratto. (C) Giacca da ratto appositamente confezionata con un’incisione vicino ai punti di agopuntura sulla testa e sulla vita posteriore. (D) Illustrazione di più ratti sospesi simultaneamente sulla rastrelliera sopraelevata. 1: Vista d’insieme del tessuto; 2: Uscita degli arti anteriori; 3: Uscita degli arti posteriori; 4: Corda di legatura; 5: Cavità formatasi dopo la sutura; 6: Incisione per esporre i punti di agopuntura della testa; 7: Incisione per esporre i punti di agopuntura della schiena e della vita. 8: Posizione di sutura. Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

Protocol

Tutte le procedure condotte sui ratti in questo studio hanno aderito allo standard nazionale per il benessere degli animali da laboratorio e alle linee guida per la revisione dell’etica (2018) ufficialmente adottate dalla Repubblica popolare cinese e alla Guida per la cura e l’uso degli animali da laboratorio della National Academies Press15. Questo protocollo è composto da tre fasi principali. In primo luogo, le giacche da ratto sono su misura e aderenti in base alle forme individuali del corpo …

Representative Results

In questo esperimento, un totale di 12 ratti sono stati selezionati per il trattamento di elettroagopuntura e sono state osservate le loro reazioni con il metodo di fissazione (come mostrato nella Tabella 2). Tra i 12 ratti, solo 1 ratto ha mostrato una lotta intensa durante il periodo di ritenzione dell’ago di elettroagopuntura di 15 minuti. Come risultato dei suoi movimenti vigorosi, l’ago si è staccato a metà, rappresentando l’8,33% del numero totale di ratti. Questo risultato suggerisce che il meto…

Discussion

È stato dimostrato che l’elettroagopuntura ha buoni effetti terapeutici su varie malattie come il deterioramento cognitivo 16,17^, il danno miocardico¹⁸ e il dolore infiammatorio¹⁹. Per comprendere il suo meccanismo d’azione, sono stati condotti esperimenti sugli animali utilizzando principalmente i ratti. La fissazione degli animali durante le procedure è fondamentale per ottenere risultati accurati. Mentre molti …

Materials

75% alcohol	Shandong Lircon medical technology co., ltd	2002-0059	Disinfection
acupuncture needles	Beijing Luo ya shan chuan medical equipment co., Ltd.		needling
Adult Sprague-Dawley (SD) rats	Liaoning Changsheng biotechnology co., Ltd.	SCXK 2020-0001	The recipient  subjected to fixation
an elevated fixation rack	Taizhou shiai instruments and equipments for scientific and teaching research  Co., ltd	/	Fix rats
Hans electronic acupuncture apparatus	Beijing Huayun Ante Science and Technology Co. Ltd.	HANS-200A	electroacupuncture
Medical cotton ball	Jiangsu Misawa Medical Supplies Co., Ltd.	20172142357	Disinfection
Pet electric clipper	Fenghua Xikou Lubao Knives & Scissors Electrical Appliance Factory	/	Shave the hair of rats
Tweezers	Qingdao Schultz Biotechnology Co., ltd		Pinch cotton balls