Waiting
로그인 처리 중...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Behavior
Click here for the English version

Behavior

Träning av laboratoriekaniner för att förfina rutinmässiga uppfödningsprocedurer

Published: February 16, 2024 doi: 10.3791/66008
Automatic Translation
1, 1, 1, 1
1German Centre for the Protection of Laboratory Animals (Bf3R), German Federal Institute for Risk Assessment

Summary

Träningsprotokoll som involverar positiv förstärkning för rutinmässiga uppfödningsprocedurer hos kaniner utvecklades och visade sig vara framgångsrika, eftersom kaninerna på ett tillförlitligt sätt visade de tränade beteendena vid den veckovisa allmänna undersökningen. Att plocka upp kaninerna med transportlådan var mindre motbjudande än den konventionella hanteringstekniken.

Abstract

Icke-aversiv hanterings- och träningsteknik för försöksdjur krävs för att underlätta experimentella och rutinmässiga djurhållningsförfaranden och förbättra både djurens välbefinnande och den vetenskapliga kvaliteten. Klickerträning användes för att utveckla träningsprotokoll för kaniner för att förfina stressiga rutinmässiga uppfödningsprocedurer som vanligtvis förknippas med att lyfta (dvs. plockas upp från golvet)/hålla fast (dvs. hållas i armarna på en människa) dem. Tretton vita kaninhonor från Nya Zeeland tränades under tre veckor. Alla kaniner lärde sig de fördefinierade målbeteendena: de följde målpinnen, hoppade upp på vågen, gick in i en transportlåda och stegrade sig samtidigt som de placerade sina framtassar på tränarens hand. Dessutom hoppade tio djur från golvet upp i den sittande tränarens knä och tillät tränaren att lyfta sina tassar från ytan medan de satt i tränarens knä. För vissa individer var man tvungen att anpassa protokollen genom ytterligare mellanliggande steg. I slutet av träningen visade kaninerna på ett tillförlitligt sätt de förväntade målbeteendena, även efter korta och långa träningspauser. Med några få undantag kunde en bekant person förutom tränaren framkalla målbeteendena från kaninerna (generalisering), även om ytterligare sessioner krävdes för generalisering. I det frivilliga inflygningstestet föredrog kaninerna att interagera med tränaren i det 1:a försöket men tillbringade lika mycket tid med en obekant person som med tränaren i detandra försöket . Beteendeobservationerna tydde på att det var mindre motbjudande att plocka upp kaninerna med transportlådan, som beskrivits i protokollet, istället för att hålla fast dem med nackskinnet och lyfta dem på armen. Sammantaget var träningsprotokollen genomförbara och kan fungera som en förfiningstrategi i försöksdjursanläggningar. Med hänsyn till djurens välbefinnande bör utbildningsprotokollen tillämpas när så är möjligt.

Introduction

Mellan 2015 och 2019 användes mer än 49 miljoner djur för vetenskapliga ändamål i Europeiska unionen (och Norge). Av dem var 1 745 037 (3,5 %)kaniner. Kaniner används främst för regulatorisk forskning (t.ex. kvalitetskontroll, toxicitet och andra säkerhetstester, inklusive farmakologi) och rutinmässig produktion av biologiska ämnen (t.ex. blodbaserade produkter)2. Även om det görs ansträngningar för att ersätta djurförsök med djurfria metoder, är det fortfarande nödvändigt att använda djur för vissa av dessa ändamål. När ett djurförsök inte kan ersättas är det avgörande att minska antalet djur och förbättra försöks-, inhysnings- och djurhållningsförhållandena för att minimera lidandet. Russel och Burch beskrev denna strategi som 3R-principen (replace, reduce, refine) 19593 och 2010 implementerades den i direktiv 2010/63/EU om skydd av försöksdjur som används för vetenskapliga ändamål4. Den roll av förfining som ibland kallas "Askungen" i 3R5 har fått allt större betydelse. Ersättning och begränsning är långsiktiga strategier för att uppnå direktivets slutliga mål att helt ersätta djurförsök, men förfining möjliggör en omedelbar förbättring av djurskyddet5, vilket i sin tur har potential att förbättra den vetenskapliga kvaliteten6. Viktiga delar av förfiningen är djurhantering och utbildning, vilket påpekas i bilaga III till direktiv 2010/63/EU. Direktivet föreskriver att djuranläggningar ska utforma tillvänjnings- och träningsprogram för försöksdjuren anpassade till art, förfarande och projekt4. I bilaga A till ETS nr 123 föreslås att försöksdjurspersonalen ägnar tid åt att "prata med, hantera, träna och sköta djur"7.

Vissa hanteringsprocedurer orsakar stress, särskilt för landlevande bytesdjur som kaniner. Exempel är att bli inträngd i ett hörn, fasthållen (dvs. gripen av en människa, hållen i armarna på en människa eller immobiliserad av en anordning) och upplyft (dvs. upplockad från golvet) för en hälsoinspektion eller experimentella procedurer8. En undersökning med fokus på kaniner visade att 57-61 % av dem kämpade när de lyftes 9,10 och vissa visade till och med rädslorelaterad aggression (dvs. bitning)11. Detta understryker behovet av skonsam hantering och träningsteknik. Det har redan visats för andra små däggdjur som möss att skonsamma hanteringstekniker minskar ångest12. Dessutom minskar skonsam hantering i kombination med träning stress, ångest och depressionsliknande beteende hos möss13. Hos rhesusmakaker och schimpanser påverkades fysiologiska mått relaterade till stress mindre när de tidigare tränats på ett ingrepp14,15. Det kan antas att om ett djur kan välja att delta i träningen frivilligt kan det aktivt engagera sig i och kontrollera situationen, vilket förbättrar djurets välbefinnande och även kan bidra till mer robusta och tillförlitliga vetenskapliga data16.

Många djurträningsprocedurer är beroende av operant konditioneringsprinciper, särskilt användningen av positiv förstärkning och formning 17,18,19. Operant betingning kräver att ett djur framkallar beteenden som sedan kan ökaseller minskas. Det finns fyra vanliga kontingenser som används för att beskriva operant betingning: positiv och negativ förstärkning samt positiv och negativ bestraffning21,22. Hos kaniner används positiv bestraffning när en person närmar sig (oönskad stimulans) ett djur för att flytta det bort från eller mot en viss plats23. I samband med hantering av en kanin på undersökningsbordet är ett exempel på negativ förstärkning avlägsnandet av tryck (oönskad stimulans) på kaninens kropp när kaninen håller sig stilla; Ett exempel på negativ bestraffning är att dra tillbaka en matbelöning (önskad stimulans) när kaninen börjar kämpa. Varken positiv/negativ bestraffning eller negativ förstärkning rekommenderas i djurträning. Bestraffning orsakar negativa känslomässiga affekter24, såsom ångest som hos hundar25. Istället bör positiv förstärkning vara den metod som väljs vid träning av djur25,26. Positiv förstärkningsträning (PRT) innebär att ett önskvärt stimulus (t.ex. en matbelöning) ges efter att djuret visat ett önskat beteende, vilket ökar sannolikheten för att djuret kommer att uppvisa det önskade beteendet igen i framtiden27. PRT innebär ofta applicering av en konditionerad förstärkare. En betingad förstärkare (sekundär förstärkare) är vanligtvis ett neutralt stimulus som ett ljud, som djuret lär sig att associera med en obetingad förstärkare (primär förstärkare, t.ex. matbelöning)28. Efter att djuret har visat det önskade beteendet presenteras den konditionerade förstärkaren omedelbart, följt av presentationen av matbelöningen26. Ett välkänt exempel på PRT är klickerträning, där en klicker används för att producera ett klick som en sekundär förstärkare26.

Träningen bör följa förutsägbara mönster, vilket uppnås genom att utforma ett träningsprotokoll. Träningsprotokollet beskriver hur ett målbeteende kan uppnås steg för steg (dvs. beteendeformning) medan varje steg definieras av objektiva kriterier och bör vara lätt att uppnå26. Om träningen följer ett visst protokoll är det möjligt att försöksdjurens personal växlar med att träna djuren. Det är viktigt att notera att personalen måste känna till principerna för inlärning och träningstekniker för att kunna tillämpa dem på rättsätt. Djurträning innehåller ofta beteendeformning. Beteendeformning för hand användes medvetet för första gången av Skinner och kollegor i början av 1940-talet. I kontrast till detta har Skinner i tidigare arbeten snarare fokuserat på "att göra små förändringar i den fysiska miljön för att genomföra ett program med successiv approximation"29. I en artikel publicerad i Scientific American förklarade han att om man förstärker ett beteende ökar sannolikheten för att beteendet kommer att upprepas, vilket "gör det möjligt att forma ett djurs beteende nästan som en skulptör formar en lerklump"30. Sedan dess har formning fått en allt större betydelse för djur i fångenskap 29,30,31,32. För att reproducera och förbättra formningsprotokoll är det avgörande att bedöma protokollen på ett systematiskt och objektivt sätt 33,34,35,36.

En nyligen publicerad systematisk genomgång och metaanalys av Pfaller-Sadovsky et al. fann att konditionerad förstärkning oftast studerades hos hästar och hundar, även om katter, nötkreatur, fiskar, getter och icke-mänskliga primaterockså undersöktes. Inom försöksdjursvetenskap används PRT i stor utsträckning för icke-mänskliga primater 38,39,40 och hundar41,42. Dessutom tränades grisar43, getter44 och till och med små däggdjur, som möss13 och råttor 45,46,47, framgångsrikt med hjälp av en klicker i laboratoriemiljö. Såvitt författarna känner till har introduktionen av spårtaxi för laboratoriekaniner endast rapporterats sällanännu. Den referentgranskade litteratur som redan finns för flera decennier sedan är föråldrad och uppfyller inte kriterierna för modern etisk forskning. Även om få icke-expertgranskade uppgifter tyder på att kaniner kan tränas framgångsrikt med hjälp av PRT49, verkar det finnas en brist på kunskap om lämpliga träningsprotokoll för kaniner som hålls i försöksdjuranläggningar. De bakomliggande orsakerna kan variera. Det kan till exempel hända att de träningstekniker som används inte beskrivs i detalj i forskningsartiklar eller att data genereras för regulatorisk forskning och därför inte publiceras. Dessutom är kaniner kanske inte huvudfokus för förfiningsforskning eftersom andra arter som möss och råttor används oftare i forskningen. Eftersom kaniner kan maskera stress och obehag extremt bra, kan deras negativa känslomässiga tillstånd när de hanteras ofta förbli okända. Storleken på en kanin gör det möjligt för människor att hålla fast dessa djur för ingrepp, medan andra arter, t.ex. icke-mänskliga primater, inte får hållas med händerna för liknande ingrepp utan att skadas allvarligt. Dessa fakta bör dock inte hindra utveckling eller utbyte av PRT-protokoll för laboratoriekaniner.

När det gäller de potentiella fördelarna med PRT gjordes de första försöken att fylla kunskapsluckan om lämpliga träningsprotokoll för laboratoriekaniner. För att underlätta rutinprocedurer som hantering, hälsoinspektioner och vägning utvecklades träningsprotokoll och deras genomförbarhet för vita kaninhonor från Nya Zeeland utvärderades. Jämförelser genomfördes för att bedöma om den alternativa hanteringstekniken som beskrevs i träningsprotokollen var mindre motbjudande än den konventionella hanteringstekniken och om träningsprotokollen kan fungera som förfiningsåtgärder. Figur 1 visar tidsplanen för den aktuella studien.

Djurens skötsel

Tretton vita kaninhonor från Nya Zeeland erhölls från kommersiella källor (ankomst till djuranläggningen vid ungefär sju veckors ålder). Djuren var fria från alla virala, bakteriella och parasitära patogener som anges i FELASA:s rekommendationer51. Skyddskläder och utrustning (handskar, masker, hårnät) bars vid utförandet av stegen i detta protokoll. En grupp på sex och en grupp på sju djur hölls tillsammans i en golvbox på 2,8 m × 2,8 m (golvhus). Golvet var täckt med fina och flagnande träsängkläder (autoklaverade). Dessutom låg bomaterial och pappersull utspridda ovanpå ströbädden. Tre plasthus med två öppningar vardera (37 cm × 60 cm; höjd 30 cm) och en plasttunnel (längd: 58 cm, diameter: 16 cm) fungerade som skydd. Dessutom tillhandahölls berikningsartiklar som gnagkblock av trä, hö- och videbollar och snackbollar fyllda med matpellets, som faller ut när bollen flyttas. Kaninerna hade fri tillgång till kranvatten, pelleterad mat och autoklaverat hö samt halm. Mer information om livsmedel och berikningsartiklar finns i materialförteckningen. Djurrummet städades på torsdagar.

Kaninerna hölls under standardförhållanden (rumstemperatur och relativ luftfuktighet angiven som medelvärde ± standardavvikelse: 20,3 ± 0,4 °C och 50 ± 5 %) under en ljus-mörker-cykel på 12:12 timmar (artificiellt ljus med extra dagsljusinfall). En radio slogs på 30 minuter innan ljusfasen började i cirka 8 timmar för att vänja kaninerna vid omgivningsljud.

Protocol

Djurhållningen har godkänts av den statliga myndigheten i Berlin ("Landesamt für Gesundheit und Soziales", tillståndsnummer: ZH3 – tyska federala institutet för riskbedömning, Berlin). Träningsprotokollen utvecklades inom ramen för den rutinmässiga djurhållningen för att förfina procedurer som hantering, hälsoinspektion och vägning. Eftersom träningsprotokollen inte orsakade någon smärta, lidande eller skada och alla observationer gjordes i samband med rutinmässig djurhållning, betraktades denna studie inte som ett djurförsök enligt den europeiska lagstiftningen.

1. Allmänna utbildningskrav

OBS: Följande punkter krävs i allmänhet för djurträning, oberoende av detta protokoll.

  1. Märk djuren tydligt för identifiering.
  2. Se till att få en belöning av hög kvalitet, t.ex. mycket välsmakande mat.
  3. Definiera träningsplanen inklusive alla steg mot målbeteendet, dvs. det önskade beteendet som djuret ska visa.
    OBS: Målbeteendet formas steg för steg medan varje steg definieras av objektiva kriterier och ska vara lätt att uppnå.
  4. Definiera om djuren ska lyckas utföra 80 % eller 100 % av träningsstegen innan du fortsätter med nästa steg.
  5. Förbered dokumentationen (t.ex. tilläggstabell 1).
  6. Träna inte djuren när de har bråttom och var noga med manér, tonfall och rörelsehastighet, dvs. prata mjukt och lugnt, rör dig långsamt och förutsägbart.
  7. Testa de steg som tränades i den tidigare träningen.
  8. Träna inte ett djur när djurets allmänna hälsotillstånd är nedsatt och/eller djuret inte är intresserat av att interagera med tränaren.

2. Träningsrutiner för detta protokoll

OBS: Följande träningsrutiner har definierats för det nuvarande protokollet.

  1. Ställ upp träningsarenan i djurrummet/hagen (Figur 2) och, beroende på vilket målbeteende som ska tränas, placera vågen eller transportlådan (golv 30 cm × 50 cm; dörr 27 cm × 25.5; med en öppning i locket 16 cm × 39 cm) i arenan.
  2. Placera vågen och transportlådan utanför arenan för att bekanta kaninerna med dessa nya föremål innan målbeteendena "vägning" och "transportlåda" tränas.
  3. För målbeteenden (se steg 6-9), led kaninen in i träningsarenan, som beskrivs i steg 5.7.
  4. Sitt på golvet eller använd en låg pall/trappsteg att sitta på i träningsarenan.
  5. Träna målbeteendena efter varandra, i den ordning som beskrivs i protokollet och inte samtidigt. Gör ett undantag om ett djur misslyckas med att lära sig ett steg i ett målbeteende under två på varandra följande dagar - träna i så fall nästa målbeteende samtidigt. Ändra ordningen på målbeteenden om detta underlättar träningsprocessen för en individ.
  6. Efter tillvänjning och klickerintroduktion, börja träna alla djur på det 1:a steget i målbeteendet "följa målet" (dvs. bollen i slutet av målpinnen definieras som mål). Observera att de, beroende på deras individuella prestationer, kan nå olika träningssteg den här dagen. Fortsätt träningen i enlighet med djurens individuella framsteg under de följande dagarna.
  7. Schemalägg ett träningspass (t.ex. cirka 30 minuter för en grupp med sex till sju djur) för varje arbetsdag under veckan.
    OBS: Träningspasset startar när tränaren är i djurrummet/boxen och är redo att starta träningen. En session avslutas när antingen ingen av kaninerna deltar i träningen (längre) eller när alla kaniner har nått det sista träningssteget i målbeteendet som ska tränas i denna session. Börja varje träningspass med det sista lyckade steget i protokollet. En session består av minst ett eller flera försök per djur.
  8. Starta ett försök genom att be djuret att utföra ett visst träningssteg (dvs. steg 3.1 efter att kaninen lärt sig att röra vid målet med nosen/munnen) och avsluta försöket när djuret inte deltar i träningen (längre) eller djuret nådde det sista träningssteget i målbeteendet som ska tränas. I slutet av träningen, öppna träningsarenan och guida kaninen ut ur arenan; Håll sedan målpinnen (med målet vänt mot taket) samt belöningsskålen framför kistan.
  9. Schemalägg träningen innan utfodring, rengöring, behandlingar eller experimentella procedurer.
  10. Använd en belöningsskål med en integrerad klicker (Figur 3, Kompletterande kodningsfil 1) och, för vissa målbeteenden, en extra målpinne.
  11. Fyll belöningsskålen med välsmakande mat, t.ex. solrosfrön och spannmålsbaserade fodergodsaker.
    OBS: Kaniner är bladätare och dessa belöningsexempel är inte optimala; På grund av hygienrestriktionerna i försöksdjursanläggningen var de dock de bästa tillgängliga alternativen för dessa djur. Om möjligt bör färska örter föredras som matbelöning. Observera att en belöning bara är en belöning om kaninen verkligen föredrar den.
  12. Se till att alltid hålla belöningsskålen i samma position, t.ex. framför kistan, och börja flytta belöningsskålen mot kaninerna först efter klicket. Förutom målbeteendet "stegra" och "hoppa upp i knät", håll målpinnen i ena handen och belöningsskålen i den andra.
  13. Presentera belöningen på den plats där kaninens nos/mun var när det önskade beteendet visades korrekt.
  14. Se till att kaninen bara äter en liten mängd mat när den ger belöningen.
  15. Om en kanin visar det önskade beteendet minst fyra gånger i ett block med fem försök (80 % framgång), fortsätt med nästa steg. Om ett djur inte kan utföra nästa steg (dvs. misslyckas med att utföra steget mer än en gång), återgå till föregående steg i protokollet. Om det var nödvändigt att återgå till ett tidigare steg eller om en kanin inte deltar i träningen, revidera träningsprotokollen (t.ex. definiera mindre träningssteg), välj en annan (mer tilltalande) matbelöning eller kontrollera tränarens träningsfärdigheter.
  16. Om en kanin utför det sista träningssteget i ett målbeteende på ett korrekt sätt, avsluta träningspassen för den här kaninen samma dag.
  17. Skriv ut dokumentationsbladet (tilläggsfil 1), de detaljerade träningsprotokollen samt de förenklade träningsprotokollen (tilläggsfil 2) och fäst dem på ett urklipp eller öppna dem på en surfplatta. Använd dokumentationsbladet för att notera de träningssteg som de enskilda djuren har uppnått vid varje session.

3. Kontextuell betingning/tillvänjning

OBS: De kontextuella konditionerings-/tillvänjningssessionerna utförs dagligen av tränaren och djurskötarna i cirka 15 minuter per kaningrupp under en period av fem på varandra följande dagar (måndag till fredag).

  1. Prata mjukt med kaninerna.
  2. Erbjud välsmakande matbelöningar.
    OBS: Var medveten om att plötsliga förändringar i kosten kan orsaka matsmältningsproblem hos kaniner. Introducera därför långsamt den nya livsmedelsbelöningen.
  3. Flytta belöningsskålen fylld med välsmakande mat mot kaninerna och låt dem äta av den.
  4. Rör försiktigt kaninerna runt halsen, axlarna, ryggen och gumpen utan att hålla fast dem.

4. Introduktion av klickern

OBS: Målbeteende: Gå fram till tränaren och ät belöningen från skålen efter klicket. Målet är att kaninen associerar matbelöningen med klicket, dvs. kaninen äter matbelöningen efter klicket.

  1. Låt kaninen närma sig.
  2. Klicka en gång och flytta belöningsskålen mot kaninen (kallas click and treat eller C och T).
  3. Upprepa steg 4.2 tio gånger. När du klickar för tionde gången, vänta en sekund innan belöningen presenteras och observera kaninens beteende.
    OBS: Om djuret söker belöningen omedelbart efter klicket kan det antas att konditioneringen av den sekundära förstärkaren var framgångsrik.
  4. Upprepa steg 4.1.-4.3. följande dag om en kanin inte åt matbelöningen efter klicket minst åtta gånger.

5. Att följa målet

OBS: Målbeteende: Följ och rör vid målet med näsa/mun. Målbeteendena i avsnitten 6-9 är modifieringar av målbeteendet som presenteras i avsnitt 5.

  1. Placera måltavlan nära kaninens nos/mun.
    OBS: Bollen i slutet av målpinnen definieras som mål.
    1. C och T när kaninen rör vid målet med nosen/munnen.
      OBS: Se till att kaninens nos/mun inte vidrör pinnen på någon odefinierad plats förutom bollen.
    2. Ta bort målet från kaninens synfält samtidigt som du belönar.
    3. Upprepa alla ovanstående steg fem gånger tills kaninen har utfört detta steg minst fyra av fem gånger (framgångsfrekvens på 80 %).
  2. Placera målet på en annan plats där det kan vidröras med näsan/munnen genom huvudrörelser utan att röra hela kroppen.
    1. C och T när kaninen vidrör målet med nosen/munnen och följ steg 5.1.2 och 5.1.3.
  3. Placera målet på ett större avstånd från kaninen och låt kaninen sträcka sig mot det.
    1. C och T när kaninen vidrör målet med nosen/munnen och följ steg 5.1.2 och 5.1.3.
  4. Öka avståndet mellan målet och kaninen ytterligare, vilket kräver att djuret gör ett hopp för att nå målet.
    1. C och T när kaninen vidrör målet med nosen/munnen och följ steg 5.1.2 och 5.1.3.
  5. Placera måltavlan precis framför kaninens nos/mun så att kaninen kan röra vid målet och sedan långsamt flytta målet bort från kaninen. Se till att kaninen måste göra variabelt antal hopp för att följa målet.
    OBS: I ett block med fem försök, den 1:a, 2:a, 3:e, 4:e och 5:e gången belönas kaninen efter 2, 1, 2, 3 respektive 2 hopp (i genomsnitt: efter 2 hopp).
    1. C och T när kaninerna har gjort det antal hopp som krävs och följer steg 5.1.2 och 5.1.3.
  6. Upprepa steg 5.5 och flytta målet genom korridoren mellan de två objekten.
    OBS: För detta steg placeras två objekt, t.ex. tunnlar, parallellt med varandra och bildar en korridor.
    1. C och T när kaninerna har gjort det antal hopp som krävs och följ steg 5.1.2 och 5.1.3.
  7. Upprepa steg 5.5 och flytta målet mot träningsarenan så att kaninen kommer in i den.
    1. C och T när kaninerna har gjort det antal hopp som krävs och följ steg 5.1.2 och 5.1.3.

6. Vägning

OBS: Målbeteende: Stanna på vågen i minst en sekund. Om vågens yta är för hal kan en halkfri dyna läggas på toppen. Vissa kaniner tenderar dock att gnaga på dynan.

  1. Led kaninen med målpinnen mot vågen enligt beskrivningen i steg 5.5.
    1. C och T när kaninen rör vid målet med nosen/munnen.
    2. Ta bort målet från kaninens synfält samtidigt som du belönar.
    3. Upprepa alla ovan beskrivna steg fem gånger tills kaninen har utfört detta steg minst fyra av fem gånger (framgångsfrekvens på 80 %).
  2. Flytta målet något ovanför skalan så att kaninen trampar på det med framtassarna för att röra vid målet med nosen/munnen.
    1. C och T och följ steg 6.1.2 och 6.1.3.
  3. Flytta målet något bortom mitten av skalan så att kaninen trampar på det med framtassarna och sträcker sig över vågen för att röra vid målet med nosen/munnen.
    1. C och T och följ steg 6.1.2 och 6.1.3.
  4. Flytta målet längre bortom mitten av skalan så att kaninen kliver på vågen med fram- och baktassarna för att röra vid målet med nosen/munnen.
    1. C och T och följ steg 6.1.2 och 6.1.3.
  5. Led kaninen upp på vågen enligt beskrivningen i 4.4. och vänta några sekunder innan C och T.
    OBS: I det här steget ska du belöna kaninen efter att ha suttit en varierande tid på vågen. I ett block med fem försök, den 1:a, 2:a, 3:e, 4:e och 5:e gången, belönas kaninen efter 0,5, 1,0, 2,0, 0,5 respektive 1,0 sekunder (i genomsnitt: 1,2 sekunder). Medan kaninen håller sig stilla under denna tid kan vikten avläsas från vågen. Om vågen tar längre tid på sig att stabilisera och mäta vikten, öka djurets sitttid på vågen.
    1. C och T och följ steg 6.1.2 och 6.1.3.

7. Inmatning av transportlåda

OBS: Målbeteende: Gå in i och lämna transportrutan. Använd en transportlåda (golv 30 cm × 50 cm; dörr 27 cm × 25,5 cm) med en öppning i locket (16 cm × 39 cm) vars botten är täckt med smutsigt strömaterial.

  1. Led kaninen med målpinnen mot lådan enligt beskrivningen i steg 5.5.
    1. C och T när kaninen står framför lådans ingång.
    2. Ta bort målet från kaninens synfält samtidigt som du belönar.
    3. Upprepa alla ovan beskrivna steg fem gånger tills kaninen framgångsrikt utför uppgiften minst fyra av fem gånger (framgångsfrekvens på 80%).
  2. Håll målpinnen genom lockets öppning och flytta den in i lådan och motivera därmed kaninen att gå in i lådan med framtassarna.
    1. C och T och följ steg 7.1.2 och 7.1.3.
  3. Följ steg 7.2 och led in kaninen i lådan (dvs. alla fram- och baktassar kom in i lådan).
    1. C och T och följ steg 7.1.2 och 7.1.3.
  4. Följ steg 7.3 och stäng dörren till lådan i några sekunder. Öppna sedan dörren igen.
    1. C och T och följ steg 7.1.2 och 7.1.3.
  5. Följ steg 7.3 och stäng dörren till boxen. Lyft försiktigt lådan lite (dvs. några centimeter över golvet). Ställ tillbaka lådan på golvet och öppna dörren.
    1. C och T och följ steg 7.1.2 och 7.1.3.
  6. Följ steg 7.5. Led sedan kaninen med målpinnen ut ur lådan.
    1. C och T och följ steg 7.1.2 och 7.1.3.

8. Uppfödning

OBS: Målbeteende: Placera framtassarna på handflatan under uppfödningen. Under träningspasset håller du både målpinnen och belöningsskålen i samma hand.

  1. Placera måltavlan ovanför kaninens huvud så att kaninen sträcker nosen uppåt för att röra vid målet med nosen/munnen medan alla tassar stannar på marken.
    1. C och T.
    2. Ta bort målet från kaninens synfält samtidigt som du belönar.
    3. Upprepa alla ovan beskrivna steg fem gånger tills kaninen har utfört detta steg minst fyra av fem gånger (framgångsfrekvens på 80 %).
  2. Placera målet ovanför kaninens huvud, som beskrivs i steg 8.1. Efter att kaninen sträckt nosen uppåt, flytta målet längre uppåt så att kaninen lyfter framtassarna från marken och rör vid målet med nosen/munnen.
    1. C och T och följ steg 8.1.2 och 8.1.3.
      OBS: Om kaninen inte presterar 8.2 kan ett mellansteg läggas till efter 8.2. För detta, följ 8.2 och gå sedan fram och rör vid kaninens framtassar (handflatans yta) med den fria handflatan. C och T och följ steg 8.1.2 och 8.1.3.
  3. Placera den fria handflatan framför kaninen och flytta målet ovanför kaninens huvud så att kaninen lägger framtassarna på handen för att röra vid målet med nosen/munnen.
    1. C och T efter en sekund och följ steg 8.1.2 och 8.1.3.
      OBS: Medan framtassarna vilar på tränarens hand kan kaninens buk inspekteras visuellt.

9. Hoppa upp på knät

OBS: Målbeteende: Hoppa upp i tränarens knä och sitt kvar medan du blir berörd. För steg 9.5-9.9, håll både målpinnen och belöningsskålen i samma hand eftersom en hand måste röra vid kaninen.

  1. Led kaninen med målpinnen nära tränaren enligt beskrivningen i protokollsteg 5.5.
    1. C och T när kaninen rör vid målet med nosen/munnen.
    2. Ta bort målet från kaninens synfält samtidigt som du belönar.
    3. Upprepa alla ovan beskrivna steg fem gånger tills kaninen har utfört detta steg minst fyra av fem gånger (framgångsfrekvens på 80 %).
  2. Flytta målet ovanför benen på tränaren så att kaninen sätter framtassarna på benen för att röra vid målet med nosen/munnen.
    1. C och T och följ steg 9.1.2 och 9.1.3.
  3. Flytta målet ovanför benen och något längre bort från kaninen så att kaninen sätter framtassarna på benen och sträcker sig framåt för att röra vid målet med nosen/munnen.
    1. C och T och följ steg 9.1.2 och 9.1.3.
      OBS: Om kaninen inte presterar 9.4 kan ett mellansteg läggas till efter 9.3. För detta, följ steg 9.3 och locka sedan kaninen med belöningsskålen upp i knät. När kaninen har placerat alla fyra tassarna i knät, C och T och följ steg 9.1.2 och 9.1.3.
  4. Flytta målet ovanför benen och ännu längre bort från kaninen så att kaninen hoppar upp i knät för att röra vid målet med nosen/munnen.
    1. C och T och följ steg 9.1.2 och 9.1.3.
  5. Följ steg 9.4. och stryk försiktigt kaninen med den fria handen från kraniet till stjärtfenan (börjar vid axeln) medan kaninen sitter i knät.
    1. C och T och följ steg 9.1.2 och 9.1.3.
  6. Följ steg 9.4 och stryk försiktigt kaninens öron med den fria handen från kraniet till stjärtfenan medan kaninen sitter i knät.
    1. C och T och följ steg 9.1.2 och 9.1.3.
  7. Följ steg 9.4. och ta försiktigt tag i en av kaninens öron för att visuellt inspektera öronen.
    1. C och T och följ steg 9.1.2 och 9.1.3.
  8. Följ steg 9.4. och stryk en fram- eller baktass med den fria handen medan kaninen sitter i knät.
    OBS: Om den högra sidan av kaninen är vänd mot och den vänstra sidan bort från tränaren, kan man försiktigt röra vid de vänstra tassarna (och vice versa). Se till att träna båda sidorna växelvis.
    1. C och T och följ steg 9.1.2 och 9.1.3.
  9. Följ steg 9.4. och lyft försiktigt en framtass eller baktass med den fria handen medan kaninen sitter i knät.
    OBS: Klorna kan inspekteras när tassarna lyfts. Se till att träna båda sidorna växelvis.
    1. C och T och följ steg 9.1.2 och 9.1.3.

Representative Results

I följande avsnitt ges information om material och metoder som går utöver protokollet tillsammans med representativa resultat.

Statistik

Data som erhållits från protokollet som nämns ovan lagrades i kalkylblad och analyserades med hjälp av programvara för avancerad statistisk analys (Table of Materials). Tester för normalitet (visuell inspektion av histogram och qq-diagram, jämförelse av medelvärde, standardavvikelse och median) utfördes för de kontinuerliga parametrarna. Skillnader mellan parametrar som undersöktes i det frivilliga inflygningstestet (tidslängd interaktion med tränare och okänd person, beröring av framtassar-ben) analyserades med hjälp av Wilcoxon signed-rank testet. Skillnader mellan hanteringsteknikerna analyserades antingen med hjälp av Wilcoxon signed-rank test eller McNemar test (om det är binärt). Skillnaderna ansågs signifikanta vid p < 0,05. Vid användning av Wilcoxon signed-rank-testet måste fördelningen av skillnader vara symmetrisk enligt visuell inspektion av histogrammet.

Studien var explorativ. Effektanalys baserad på den tidsperiod som kaninerna interagerade med "hanteringsenheterna" utfördes efter studien (Wilcoxon signed-rank test; effekt ≥ 0,999) med hjälp av G*Power (version 3.1.9.7)52.

Tillvänjning

Alla kaniner utom #4 och #10 fick i sig mat från belöningsskålen och lät tränaren röra vid dem vid alla tillvänjningssessioner. Kanin #4 accepterade inte matbelöningen i den 1:a sessionen men åt fyra gånger från belöningsskålen i den 2:a sessionen. Mängden belöningsintag ökade dock i senare sessioner och kaninen kunde också röras. Kanin #10 krävde också mer tid för att vänja sig vid tränaren och matbelöningen. I den första sessionen accepterade kaninen matbelöningen från tränaren efter 5 minuter men kunde inte röras. Under den 2:a sessionen observerades inget intresse för maten. I de efterföljande sessionerna accepterade dock kanin #10 både matbelöningar och beröringar.

Vi presenterar klickern

Tolv av tretton kaniner slutförde framgångsrikt protokoll avsnitt 4 på en dag och kopplade matbelöningen (primär förstärkare) med klicket (sekundär förstärkare) inom detta träningspass. Sambandet testades genom att observera kaninernas beteende efter att klicket presenterats för tionde gången. När ett djur sökte efter belöningen omedelbart efter klicket, antog man att kaninen associerade den primära med den sekundära förstärkaren. Kanin #4 åt inte upp matbelöningen efter klicket på dag 1. Det tog kanin #4 en dag längre (dvs. två dagar) att lyckas associera klicket och matbelöningen.

Att följa målet

Tabell 1 visar antalet träningspass (anges som median, 25:e percentilen och 75:e percentilen) som krävs för att lära kaninerna målbeteendena i protokollen. Det tog kaninerna 2 träningspass (median) att följa målpinnen in i träningsarenan (Tabell 1). Alla kaniner nådde det sista steget (5,7) i detta målbeteende.

Kanin #4 och kanin #7 behövde 7 respektive 8 träningspass innan de följde med målpinnen in i träningsarenan. Eftersom kanin #7 misslyckades med att slutföra steg 5.4 och inte gjorde ett hopp för att följa målpinnen, implementerades ytterligare ett träningssteg (5.3+) i protokollet efter steg 5.3. I steg 5.3+ placerades målpinnen på ett större avstånd från kaninen än i 5.3 och kaninen var tvungen att sträcka sig mot den i olika riktningar, men målpinnen var fortfarande nåbar utan att göra ett hopp. Kanin #4 hade problem med steg 5.5 och kunde inte följa målpinnen, som var placerad precis framför näsan/munnen, för ett variabelt antal hopp. Därför lades ytterligare ett steg 5.4+ till i protokollet. I det här fallet placerades målpinnen precis framför kaninens nos/mun och flyttades sedan i olika riktningar vilket krävde att kaninen gjorde ett hopp. Samma ytterligare steg användes också framgångsrikt för kanin #7. Efter att ha slutfört de ytterligare utbildningsstegen med en framgångsfrekvens på minst 80 % kunde de fortsätta med följande steg.

Vägning

Kaninerna behövde 1 träningspass (median) innan de utförde steg 6.5 (dvs. att stanna på vågen under en varierande tid) (tabell 1). Alla kaniner nådde det sista steget (6,5) i detta målbeteende.

Inmatning av transportlåda

Kaninerna utförde framgångsrikt alla steg från 7.1 till 7.6 (dvs. gick in och ut ur transportlådan efter lyft) inom 2 träningspass (median) (tabell 1). Alla kaniner nådde det sista steget (7,6) i detta målbeteende.

När kaninerna #2 och #3 framgångsrikt utförde steg 7.6 för första gången/erna, ville de inte gå in i transportlådan igen för att upprepa detta steg. Därför skapades steg 7.5+: efter att djuret följt målpinnen mot lådan, hölls belöningsskålen genom lockets öppning och djuret lockades in i lådan. När kaninen kom in i lådan stängdes dörren och lådan lyftes försiktigt upp. Efter att ha ställt tillbaka lådan på golvet öppnades dörren och kaninen leddes ut ur lådan med målpinnen. Båda djuren lyckades utföra steg 7.5+ minst 4 gånger, följt av steg 7.6 nästa dag.

Uppfödning

Ett träningspass (median) krävdes innan kaninerna slutförde steg 8.3 (dvs. placerade framtassarna på tränarens hand) (tabell 1). Eftersom 11 av 13 kaniner (d.v.s. alla utom #3 och #7) misslyckades med att utföra steg 8.3, definierades ytterligare ett träningssteg 8.2+ efter 8.2 för dessa djur. I steg 8.2+ flyttades målpinnen ovanför kaninens huvud så att kaninen lyfte framtassarna från marken och rörde vid målet med nosen/munnen. Medan kaninen rörde vid måltavlan närmade sig tränaren och rörde vid framtassarna (handflatans yta) med sin fria handflata. Efter att steg 8.2+ framgångsrikt genomförts i minst fyra av fem försök, tränades steg 8.3 igen och slutfördes.

Hoppa på knät

2.5 Träningspass (median) var nödvändiga för att träna kaninerna i steg 9.1. till 9.9. (Tabell 1). Tio kaniner kunde nå det sista steget 9.9 (dvs. acceptera att deras tassar vidrördes medan de satt i tränarens knä). Kanin #4 nådde bara steg 9.2 (dvs. att placera sina framtassar på tränarens ben) och kanin #10 nådde steg 9.3 (dvs. att hoppa upp i tränarens knä). Kanin #7 nådde steg 9.3+, vilket var ytterligare ett mellansteg efter steg 9.3. I det här fallet placerade kaninen framtassarna på tränarens ben, som beskrivs i steg 9.2, och lockades sedan med belöningsskålen i tränarens knä. När alla fyra tassarna hade placerats i tränarens knä presenterades klicket och belöningen. Detta steg lades till i protokollet för åtta kaniner för att underlätta utförandet av följande steg.

Generalisering

För att utvärdera om kaninerna generaliserade de tränade ledtrådarna för att utföra målbeteendena med andra personer än tränaren, bad en kvinnlig djurskötare, som var bekant för kaninerna men som bara hade lite tidigare erfarenhet av klickerträning, kaninerna att utföra de tränade målbeteendena "vägning", "gå in i transportlåda", "uppfostra" och "hoppa i knät". Om en kanin inte tidigare har lärt sig det sista steget att "hoppa i knät" bör det sista lyckade träningssteget demonstreras.

Sessionerna ägde rum fem på varandra följande dagar efter att den 3 veckor långa utbildningen hade avslutats (Figur 1). Djurskötaren läste träningsprotokollen innan det 1:a passet. I början av den 1:a sessionen gav tränaren en kort demonstration av alla målbeteenden. Sedan stannade hon kvar i hagen, gav instruktioner under sessionerna och dokumenterade vilket steg i målbeteendena kaninerna uppvisade. Om en kanin inte visade ett visst steg instruerades djurskötaren att återgå till föregående steg i protokollet.

Alla kaniner utom kanin #4 utförde målbeteendena "vägning", "gå in i transportlåda" och "uppfödning" (data anges som median) efter 1 session, 2 sessioner respektive 2 sessioner (Tabell 2). Kanin #4 var inte villig att visa några steg i dessa målbeteenden.

Åtta av tio djur som kunde visa det sista steget att "hoppa på knäet" (9,9) uppvisade detta beteende efter 3 sessioner (median). Även om kanin #3 och #11 tidigare hade lärt sig det sista steget att "hoppa på knät" (9.9), visade de bara steg 9.3 med djurskötaren. Kanin #4, #7 och #10 visade samma steg som med tränaren (9.2, 9.3+ och 9.3).

Utförande av målbeteenden efter 1 veckas träningsuppehåll

För att testa om djuren kunde behålla de sista stegen "vägning", "gå in i transportlåda", "stegring" och "hoppa i knät" hämtade tränaren målbeteendena en vecka och två veckor efter generaliseringssessionerna (Figur 1). Under dessa pauser tränades inte djuren och fick inga belöningar.

Vid båda tidpunkterna kunde alla kaniner utföra de sista stegen "vägning" (6.5), "gå in i transportlådan" (7.6) och "uppfödning" (8.3) som de lärt sig under den föregående 3-veckors utbildningen. Djur (n = 10) som lärde sig det sista steget att "hoppa på varvet" (9,9) visade detta beteende vid båda tidpunkterna; De som inte lärde sig det sista steget i detta målbeteende (n = 3) kunde visa det sista steget de tidigare nått (Kanin #4: Steg 9.2; Kanin #7: Steg 9.3+, Kanin #10: Steg 9.3) efter den första 1-veckors pausen. Efter den andra 1-veckors pausen visade dessa tre kaniner samma steg som veckan innan men ombads också att utföra nästa steg och nådde steg 9.9.

Utförande av målbeteenden efter ett träningsuppehåll på cirka 8,5 veckor

Efter att djuren haft ett träningsuppehåll på cirka 7,5 veckor (#1-5, #13) eller 9,5 veckor (#6-12) återkallades målbeteendena igen. Alla djur kunde visa det sista steget "vägning" (6.5), "gå in i transportlådan" (7.6) och "uppfödning" (8.3). Tolv kaniner visade det sista steget att "hoppa i knät" (9.9) medan kanin #7 bara placerade sina framtassar på tränarens ben och sträckte sig framåt för att röra vid målet med sin nos/mun (9.3).

Frivilligt förhållningssätt till den bekanta tränaren och en obekant person

Tre veckor efter träningen testades kaninernas frivilliga närmandebeteende för att undersöka deras interaktion med den bekanta tränaren och en obekant person (båda honor). Före testet duschade båda personerna med samma duschtvål och schampo, tog på sig samma typ av kläder och skyddsutrustning (handskar, masker, hårnät). Två 5-minutersförsök genomfördes med 2 minuters paus mellan försöken i djurboxen. Som visas i figur 4A satt den bekanta tränaren och en obekant person (i samma position) mitt emot varandra på golvet i boxen, med ryggen vänd mot boxens vägg. Två hus togs bort från inhägnaden; Det återstående huset och tunneln placerades nära de andra två väggarna på samma avstånd från båda personerna. I detandra försöket bytte de plats på sina sittplatser för att ta hänsyn till kaninernas eventuella platspreferenser. De varken rörde sig eller pratade under de fem minuter långa försöken. Om en kanin tuggade på deras byxor och nöp dem i benet, flyttades en hand försiktigt mot kaninen för att få henne att sluta. Det bör noteras att observationerna av de enskilda djuren gjordes inom gruppen, dvs. kaninerna kunde interagera med varandra under båda försöken.

Videorna analyserades retrospektivt med hjälp av BORIS53. Enligt det etogram som definierats för denna undersökning interagerade en kanin med en person när alla fyra tassarna var i kvadraten på 70 cm × 70 cm runt en person eller på gränsen till denna ruta. Dessutom övervakades det om en kanin placerade båda framtassarna på benen eller hoppade upp i knät (med alla fyra tassarna placerade i knät).

Figur 4B visar hur länge kaninerna interagerade med de två personerna. Wilcoxon signed-rank test avslöjade att interaktionstiden med tränaren och den obekanta personen skilde sig signifikant i denförsta studien ( z = -2,040, p = 0,041, Pearson korrelationskoefficient r = 0,57) men inte i denandra studien ( z = 0,245, p = 0,807, r = 0,07). I detförsta försöket tillbringade kaninerna mer tid med att interagera med tränaren.

Tre (#1, #5, #6) och fem (#1, #6, #7, #8, #12) kaniner placerade sina framtassar på tränarens ben i försök 1 respektive 2. Fem djur hoppade med alla fyra tassarna upp i tränarens knä (försök 1: #1, #3, #5, #6; försök 2: #9). Medan fyra djur (#1, #2, #8, #9) i 1:a försöket och tre (#1, #4, #8) djur i 2:a försöket klättrade med framtassarna upp på den okända personens ben, hoppade ingen av dem med alla fyra tassarna upp i hennes knä. Medelvärdet av skillnaderna mellan antalet "främre tassar-ben-beröringar" skilde sig varken signifikant mellan tränaren och den obekanta personen i försök 1 (z = -0,264, p = 0,792, r = 0,07) eller i försök 2 (z = -0,707, p = 480, r = 0,20).

Hanteringsteknikernas inverkan på kaninernas beteende gentemot "hanteringsanordningen"

För att undersöka om teknikerna som användes för att lyfta kaninerna från golvet påverkade deras beteende, utfördes en 2-minuters beteendeobservation efter denna procedur inom ramen för den allmänna undersökningen två på varandra följande dagar (Figur 1). Denna observation utfördes på sju djur.

Dag 1 hämtades kaninerna med transportlådan. För detta följde de målpinnen in i lådan, lådan stängdes och fördes till undersökningsbordet, som beskrivs i träningssteg 7.5. Här lyftes de försiktigt från lådan till bordet, med båda händerna/armarna placerade under/runt djurets kropp. En hälsoinspektion (inklusive palpation av kroppen, visuell inspektion av öron, ögon, näsborrar, framtänder, anogenital region) genomfördes och en matbelöning erbjöds dem därefter. Efter hälsoinspektionen leddes de försiktigt med händerna in i transportlådan. Målpinnen användes inte på undersökningsbordet för att säkerställa att tränarens händer var fria för att säkra djuren. När kaninerna kom in i transportlådan igen och dörren stängdes, flyttades lådan över till boxen och dörren öppnades. Kaninen fick följa målpinnen och lämna lådan, följt av presentationen av matbelöningen, som beskrivs i träningssteg 7.6.

På dag 2 plockades kaninerna upp med den konventionella tekniken, som rutinmässigt används av djurskötarna (dvs. de hölls fast av nackskinnet med ena handen och lyftes kort upp på den andra armen med huvudet vänt mot armvecket). Sedan flyttades de till undersökningsbordet och en hälsoinspektion utfördes, enligt beskrivningen ovan. Efter hälsoinspektionen erbjöds de en matbelöning från belöningsskålen. Till slut hölls de åter fast av nackskinnet och lyftes upp på armen för att föra dem tillbaka till fållan. Efter att de släppts ut erbjöds de återigen en matbelöning.

Efter att matbelöningen erbjudits kaninerna i hagen satt tränaren på golvet i hagen utan att interagera med kaninerna och en 2-minuters video spelades in, som analyserades retrospektivt med hjälp av BORIS53. Det bör noteras att observationerna av enskilda djur gjordes inom gruppen eftersom de borde följas upp i sin bekanta miljö. Det betyder att kaninerna kan interagera med varandra. Följande parametrar undersöktes och definierades: Tidslängd som ägnats åt interaktion med tränaren eller transportboxen (dvs. en kanin befann sig i interaktionszonen för tränaren eller transportlådan när nosen var mindre än en kroppslängd från tränaren eller boxen); Tidsperiod som tillbringas i transportlådan (dvs. denna händelse inträffade när djuret befann sig i lådans interaktionszon; den började när kaninerna kom in i lådan med alla fyra tassarna och stannade när en eller flera tassar placerades utanför lådan). tidsperiod som ägnats åt att äta (dvs. kaninen fick i sig halm, hö, pellets eller avföring; att tugga på tränarens kläder eller skor ansågs inte vara att äta); hur lång tid som tillbringats med att gömma sig (denna händelse började när kaninen gick in i ett hus eller en tunnel med alla fyra tassarna; den slutade när kaninen lämnade djurhemmet med en eller flera tassar); hoppa i knät (dvs. kaninen hoppade upp i tränarens knä och placerade alla fyra tassarna på den; denna händelse inträffade när djuret befann sig i tränarens interaktionszon); placera framtassar på benen (d.v.s. kaninen placerade båda framtassarna på tränarens ben; denna händelse inträffade när djuret befann sig i tränarens interaktionszon).

Beteendeanalysen utfördes av tränaren och en person som var helt blind för den procedur som genomfördes. Enligt Landis och Koch54 var interbedömarreliabiliteten mellan tränaren och den blindade personen beräknad med hjälp av BORIS53 (Cohens Kappa) betydande till nästan perfekt. För vidare analys användes data som extraherats av den blindade observatören.

Wilcoxons signed-rank-test avslöjade att den konventionella hanteringstekniken signifikant minskade den tid som ägnades åt interaktion med "hanteringsanordningen", dvs. summan av den tid som ägnades åt interaktion med tränaren och lådan efter att ha plockats upp (z = 2,366, p = 0,018, r = 0,89; Figur 5A). Hanteringstekniken hade ingen signifikant inverkan på tidslängden för interaktion med tränaren (z = 1,014, p = 0,310, r = 0,28; Figur 5B). Däremot ökade den tid de interagerade med lådan genom att plocka upp kaninerna i lådan (z = 2,366, p = 0,018, r = 0,66; Figur 5C) och spenderas i rutan (z = 2,201, p = 0,028, r = 0,61; Figur 5D) jämfört med den konventionella hanteringstekniken. Dessutom tillbringade djuren mer tid med att gömma sig i skyddsrummen efter att de plockats upp med den konventionella hanteringstekniken (z = -1,992, p = 0,046, r = 0,046; Figur 5F).

Hanteringstekniken hade ingen signifikant effekt på den tid som djuren åt (z = 0,944, p = 0,345, r = 0,26; Figur 5E), antalet kaniner som placerade sina framtassar på tränarens ben (McNemar: p = 1 000) eller hoppade upp i tränarens knä (McNemar: p = 0,500). Oberoende av hanteringsteknik hoppade kanin #9 upp i tränarens knä och kanin #12 placerade sina framtassar på tränarens ben. Dessutom sätter kaninerna #8 och #11 framtassarna på benen efter att ha blivit upplockade av transportlådan.

Medan matbelöningen som erbjöds på undersökningsbordet intogs av alla kaniner efter den korta transporten i lådan, var det bara en kanin (#8) som accepterade den efter den konventionella hanteringstekniken. Denna skillnad var signifikant (McNemar: p = 0,031). I boxen accepterades matbelöningen av sex kaniner (dvs. alla utom #7) efter att ha lämnat transportlådan och fyra kaniner (#7, #9, #10 och #12) efter att ha släppts från armen (konventionell hanteringsteknik; McNemar: p = 0,625).

Figure 1
Figur 1: Tidsplan. Alla tillvänjnings-, tränings- och generaliseringssessioner samt beteendeobservationer utfördes på morgonen före utfodring och rengöring. Under vecka 1 (d.v.s. fyra dagar efter ankomsten) genomfördes fem kontextuella konditionerings-/tillvänjningssessioner (måndag till fredag; protokollavsnitt 3) av djurskötarna och korresponderande författare (alla kvinnor), följt av en 3-veckors träningsperiod under veckorna 2-4 (måndag till fredag; protokollavsnitt 4-9). Utbildningssessionerna genomfördes av den korresponderande författaren som är veterinär specialiserad på försöksdjursvetenskap och har erfarenhet av att träna kaniner, möss, kycklingar och hästar. Därefter gjordes beteendeobservationer under två på varandra följande dagar för att undersöka om tekniken som användes för att lyfta kaninerna från golvet påverkade deras beteende. Under vecka 5 genomfördes fem generaliseringssessioner (måndag till fredag) för att utvärdera om kaninerna skulle utföra de målbeteenden som de lärt sig med en annan person än tränaren. Under vecka 6 och vecka 7 (på torsdagar) samt i vecka 14 (måndag/tisdag) testade tränaren inom ramen för den veckovisa allmänna hälsoinspektionen om kaninerna kunde behålla och visa målbeteenden. Ett frivilligt närmandetest med tränaren och en obekant person genomfördes i vecka 7 för att undersöka kaninernas beteendemässiga reaktioner mot bekanta kontra obekanta människor. Klicka här för att se en större version av denna figur.

Figure 2
Figur 2: Träningsarena. Träningsarenan (se Materialförteckning) sattes upp några minuter innan träningen började. (A) För att underlätta transport och installation bestod arenan av två delar som var förbundna med varandra i fållan. (B) Två rader av genomskinliga plastpaneler skapade en arena på cirka 136 cm × 90 cm × 70 cm. Dörren fästes i de andra panelerna med hjälp av buntband som gjorde det möjligt att öppna och stänga den. Dörren kan låsas med en klämma. Eftersom väggarna i träningsarenan var genomskinliga hade en kanin visuell, lukt- och akustisk kontakt med gruppmedlemmarna när den kom in i träningsarenan. En låg pall/steg som sittplats för tränaren och, beroende på målbeteendet som ska tränas, kan en våg eller en transportlåda placeras i arenan. Klicka här för att se en större version av denna figur.

Figure 3
Figur 3: Belöningsskål med integrerad klicker. Belöningsskålen 3D-printades med vit polymjölksyra (PLA). Storlek på fyrkantig skål: 8 cm × 8 cm × 3 cm; Storlek på cylindriskt handtag: 9,5 cm × 2,3 cm. En fingerklickare (se Materialtabell) fästes på handtaget. En 3D-utskriftsfil för belöningsskålen finns i Kompletterande kodningsfil 1. Klicka här för att se en större version av denna figur.

Figure 4
Figur 4: Test för frivillig inflygning. (A) I de två 5-minutersförsöken satt den bekanta tränaren och en obekant kvinnlig person mitt emot varandra i fållan, med ryggen vänd mot boxens vägg. Ett hus och en tunnel placerades nära de andra två väggarna på samma avstånd från båda personerna. (B) Den tid som tillbringades med att interagera med en person analyserades för varje kanin. En kanin interagerade med en person när alla fyra tassarna var i en kvadrat på 70 cm × 70 cm runt en person eller på gränsen till denna ruta. Symbolerna anger data för varje enskilt djur. Klicka här för att se en större version av denna figur.

Figure 5
Figur 5: Effekter av hanteringstekniker på kaninernas beteende. (A-F) Illustrationer av beteendedata som samlats in från sju kaniner efter att de hanterats antingen av transportlådan eller med konventionell teknik (dvs. de hölls fast av nackskinnet och lyftes på armen). Eftersom utbildaren och transportlådan betraktades som "hanteringsanordningar" (A) Denna panel visar summan av panel B och C. Symbolerna anger data för varje enskilt djur. Klicka här för att se en större version av denna figur.

Kanin Antal träningspass som behövs för att träna upp målbeteendet
Att följa målet Vägning Inmatning av transportlåda Uppfödning Hoppa på knät
#1 1 1 2 2 2
#2 1 1 4 1 5
#3 2 1 3 1 4
#4 7 2 1 3 2 (steg 9.2)
#5 2 1 3 1 3
#6 2 1 2 1 1
#7 8 1 2 2 3 (steg 9.3+)
#8 2 1 2 1 1
#9 2 1 2 1 2
#10 2 2 3 3 5 (steg 9.3)
#11 2 1 2 2 4
#12 2 1 1 1 1
#13 2 3 1 2 4
Medianvärde (25:e–75:e percentilen) 2 1 2 1 2.5
(2–2) (1–1.5) (1.5–3) (1–2) (1–4)*

Tabell 1: Antal sessioner som behövs för att träna målbeteendena. Om en kanin inte lärde sig det sista steget i ett målbeteende, anges det senaste träningssteget som nåddes inom parentes.

Definition av ett träningspass: cirka 30 minuter per grupp (6-7 djur); Måndag till fredag under tre veckor; börjar när tränaren sitter i boxen och är redo att påbörja träningen; slutar när antingen ingen av kaninerna deltar i träningen längre eller alla kaniner nådde ett sista steg i ett målbeteende; Ett djur kan utföra mer än ett försök per session.

* Kaniner #4, #7, #10 uteslöts från denna beräkning eftersom de inte nådde det sista steget att "hoppa i knät".

Kanin Antal träningspass tills det sista steget i målbeteendet var uppnått
Vägning (5 träningssteg) Öppna transportboxen (6 träningssteg) Uppfödning (3 träningssteg) Hoppa på knät (9 träningssteg)
#1 1 3 1 1
#2 1 3 1 1
#3 1 3 1 F (9.3)
#4 F F F 3 (9.2)
#5 2 3 2 2
#6 1 1 3 3
#7 1 1 3 3 (9.3+)
#8 1 1 1 3
#9 1 1 1 3
#10 1 3 3 3 (9.3)
#11 1 1 3 F (9.3)
#12 1 1 3 3
#13 1 3 2 5
Medianvärde (25:e–75:e percentilen) 1 2 2 3
(1–1) (1–3) (1–3) (1.25–3)
(exklusive #4) (exklusive #4) (exklusive #4) (exklusive #3, #4, #7, #10, #11)

Tabell 2: Generalisering. I fem sessioner (måndag till fredag) bad en djurskötare som är bekant för kaninerna kaninerna att utföra de sista stegen (eller det sista steget som nåddes) i de tränade målbeteendena. Om det sista steget i ett målbeteende inte uppnåddes, anges det senast uppnådda träningssteget inom parentes. F (misslyckande) indikerades när ett djur inte visade det sista steget i ett målbeteende som tidigare uppnåtts i träningen. Definition av en session: måndag till fredag under en vecka; börjar när djurskötaren och tränaren sitter i hagen; slutar när antingen ingen av kaninerna deltar (längre) eller alla kaniner visade det sista steget (eller det sista steget uppnått) av ett önskat målbeteende; Ett djur kan utföra mer än ett försök per session.

Kompletterande kodningsfil 1: 3D-utskriftsfil "belöningsskål". Polymjölksyra (PLA) kan användas för trycket. Klicka här för att ladda ner den här filen.

Tilläggsfil 1: Dokumentationsblad för sex kaniner. Arket ska skrivas ut eller öppnas på en surfplatta för att dokumentera varje kanins träningsframsteg. Vid varje träningspass måste det noteras vilka träningssteg de enskilda djuren uppnådde eller om anpassningar av protokollet krävdes. Eventuella speciella händelser (t.ex. yttre faktorer, försämrat hälsotillstånd) bör också dokumenteras. Klicka här för att ladda ner den här filen.

Tilläggsfil 2: Förenklade träningsprotokoll. Tabellerna beskriver stegen i protokollets avsnitt 3-9 på ett förenklat sätt. För ytterligare detaljer bör protokollstegen i huvudmanuskriptet läsas. Klicka här för att ladda ner den här filen.

Discussion

Träningsprotokollen utvecklades för att förfina rutinprocedurer som hantering, hälsoinspektioner och vägning av laboratoriekaniner. Deras genomförbarhet utvärderades i denna explorativa studie med tretton vita kaninhonor från Nya Zeeland. Träningsprotokollen kan tillämpas på ett tillförlitligt sätt för att framgångsrikt träna kaninerna. De flesta kaniner kunde lära sig de målbeteenden som definierades i träningsprotokollen inom mindre än 3-veckors träningsperioden, kom ihåg dem efter 1 veckas träningsuppehåll och generaliserade dem till en annan person än tränaren. Få anpassningar av protokollet behövde göras för att möta de enskilda djurens behov. Det huvudsakliga resultatet av denna studie var att den förfinade hanteringstekniken för att plocka upp kaniner, som beskrivs i träningsprotokollen, var mindre motbjudande än den konventionella hanteringstekniken. Intressant nog visade de tränade kaninerna sitt utforskande beteende inte bara mot den bekanta tränaren utan också mot en obekant person i ett frivilligt närmandetest.

Betydelse av målet

Målet har legat till grund för det nuvarande utbildningsprotokollet. När djuren introducerade målet lärde de sig att deras beteende påverkade miljön och genererade konsekvenser. Att introducera måltavlan bygger förtroende mellan människan och djuret, som visades av kanin #4, det tog 7 träningspass innan den följde målpinnen in i träningsarenan men lärde sig snabbt följande målbeteenden (dvs. inom 1-3 träningspass). Denna kanin #4 verkade få förtroende för tränaren under målintroduktionen, vilket underlättade träningen av de andra målbeteendena. Den här kaninen saknade dock fortfarande tillit till andra personer och var inte villig att visa de flesta av målbeteendena i generaliseringssessionerna.

Det måste noteras att målet inte definierades som slutpunkt i vissa protokollavsnitt. Istället var djuren till exempel tvungna att följa målet för ett variabelt antal hopp eller stanna på vågen ett varierande antal sekunder. Variabelt belöningsmönster valdes för att öka och bibehålla kaninernas uppmärksamhet och motivation i träningen.

Signaler

Efter att kaninerna framgångsrikt hade utfört steg 5.1, i alla följande träningspass, placerade tränaren målet på nära avstånd från kaninens nos för att signalera till kaninen att träningsförsöket startade. Om kaninen rörde vid målet med nosen/munnen övervägde man viljan att delta i träningen och träningen började.

De nuvarande protokollen innehöll inga ytterligare signaler, t.ex. vågen, transportlådan eller handen betraktades inte som signaler. Istället användes målet för att leda djuret in i träningsarenan, upp på vågen, in i transportlådan, upp i luften (uppfödning) eller upp i tränarens knä. Detta innebär att målbeteendena "vägning", "gå in i transportlåda", "stegra" och "hoppa i knä" var modifieringar av "följa målet". Anledningen till detta var kraven i utbildningsprotokollet: det skulle vara genomförbart att utföras av personal på djuranläggningar, som kanske inte är experter på djurträning, och lätt att integrera i den dagliga arbetsrutinen. Därför måste protokollen vara effektiva och uppnå målbeteendena snabbt.

Men handen som placeras framför kaninen (steg 8.3), vågen eller transportlådan har också potential att bli både en signal och ett mål för tassarna. Därför kan det vara möjligt att definiera ytterligare steg som går utöver de nuvarande protokollen och som inte kräver användning av målspaken. Till exempel, så fort kaninen ser vågen, signalerar vågen till kaninerna att hoppa upp på den med alla fyra tassarna.

Anpassningar av protokollen

Även om man kan förvänta sig att fenotypen hos nästan genetiskt identiska försöksdjur är mycket likartad, finns det beteendemässiga "skillnader mellan individer som är konsekventa över tid och över situationer [och] kallas personlighet"55, t.ex. är vissa djur ganska skygga och andra djärva56. Det kan ta längre tid för skygga, mindre utforskande djur att lära sig de definierade målbeteendena i protokollet (t.ex. kanin #4). Även om standardträningsprotokoll kan vara lämpliga för de flesta, måste träningen ta hänsyn till behoven hos ett enskilt djur och anpassas till dem, när det är nödvändigt26. Därför bör ytterligare mindre mellanliggande steg definieras för de kaniner som inte lär sig ett träningssteg i protokollet. De ytterligare mellanliggande utbildningsstegen bör hjälpa dem att framgångsrikt gå vidare mot nästa steg. Särskilt eftersom träningsplaner utvecklas i teorin och sedan testas i praktiken, kan det bli uppenbart att ytterligare träningssteg krävs för att träna ett visst målbeteende.

Med hänsyn till de nuvarande träningsprotokollen var man tvungen att lägga till några provisoriska träningssteg för målbeteendena "följa målet", "gå in i transportlådan", "föda upp" och "hoppa i knäet", som beskrivs i detalj i avsnittet om de representativa resultaten eftersom enskilda djur inte fortsatte med det följande träningssteget. Intressant nog krävdes de mellanliggande stegen 8.2+ och 9.3+ av de flesta kaniner, vilket understryker deras betydelse. Därför lades dessa steg till som en anteckning i träningsprotokollen.

Alternativt, till det definierade steget 8.2+, kan tränaren placera en hand på golvet med handflatan vänd uppåt och låta kaninen trampa på handen med en och slutligen båda framtassarna. Dessutom är det tänkbart att en kanin kräver ytterligare mellansteg före steg 9.3+, t.ex. att kaninen först placerar en baktass och därefter båda baktassarna i tränarens knä. Om en kanin inte accepterar att bli vidrörd i steg 9.5-9.9 kan varaktigheten av beröring av de olika kroppsdelarna gradvis ökas. Till en början var det dessutom bara pekfingret och långfingret som kunde användas för att stryka djuren med ett fjäderlätt tryck. Då kan antalet fingrar som används för beröring och trycket ökas i flera steg.

Förfining av hanteringstekniker

Man kan anta att hanteringen är mycket motbjudande, särskilt hos kaniner med ett blygt personlighetsdrag. Kaniner är landlevande bytesdjur och att lyftas (dvs. plockas upp från golvet) eller hållas fast (dvs. hållas i armarna på en människa) för en hälsoinspektion och experimentell procedur kommer sannolikt att orsaka ångest och lidande. Ett alternativ för att förfina hanteringsmetoderna introducerades i träningsprotokollen: istället för att hålla fast kaninen i nackskinnet och lyfta upp kaninen på den andra armen, kan kaninen ledas med målpinnen in i lådan och bäras i lådan till undersökningsbordet, som tidigare föreslagits50, 57, där kaninen försiktigt flyttas från lådan till bordet. Alternativt kan toppen av lådan tas bort, eller så kan kaninen styras med målpinnen ut ur lådan.

Beteendeobservationerna som utfördes efter att kaninerna plockats upp med hjälp av antingen den konventionella hanteringstekniken eller transportlådan visade att den konventionella hanteringstekniken var förknippad med mer stress- och ångestrelaterat beteende än den alternativa tekniken. Denna slutsats drogs från det stora antalet djur som vägrade ta emot matbelöningen på undersökningsbordet och den ökade tid som tillbringades gömd i djurrummen när den konventionella hanteringstekniken tillämpades. Intressant nog påverkade hanteringstekniken inte tidpunkten för interaktion med tränaren, vilket indikerar att hanteringsprocessen kanske inte har försämrat relationen mellan människa och djur. Men förutom utbildaren fungerade transportlådan också som "hanteringsanordning" (dvs. hanteringsanordningen för den konventionella tekniken var utbildaren, hanteringsanordningarna för den alternativa tekniken var både utbildaren och transportlådan). Därför analyserades även tiden för interaktion med transportboxen. Även om kaninerna precis hade plockats upp med transportlådan, tillbringade de mer tid med att interagera med lådan eller i lådan än när de plockades upp med den konventionella tekniken. Detta tydde på att transportboxen kunde associeras med en positiv effekt. När man jämförde den tid som spenderades på interaktion med båda "hanteringsenheterna" (dvs. summan av den tid som spenderades på att interagera med lådan och tränaren), ökade lådhanteringstekniken den tid som interaktionen med "hanteringsanordningarna" var, dvs. denna teknik hade en tydlig positiv effekt på kaninernas beteendemässiga respons mot "hanteringsanordningarna" i väntan på att bli hanterade. Liknande fynd gjordes i laboratoriemöss, som visade att skonsamma hanteringstekniker och träning minskade stress och ångest: djur som plockades upp via en tunnel eller de kupade händerna tillbringade mer tid med att frivilligt interagera med "hanteringsanordningen" och visade mindre ångestrelaterat beteende än möss med svanshandtag12. Träning visade sig förstärka denna effekt. Leidinger et al. visade att skonsamma möss (tunnel/kopp) visade mindre urinering, avföring och vokalisering när de hölls tillbaka av nackskinnet och mindre flytande beteende i Morris Water Maze Test när de tränades med PRT jämfört med otränade möss13.

Genomförbarheten av protokollen för det dagliga arbetet - utbildningens varaktighet, kvarhållning och generalisering

Antalet träningspass som krävdes för att lära sig ett målbeteende berodde på det enskilda djuret och målbeteendena, som omfattade ett annat antal steg som sträckte sig från avsnitt 3 till avsnitt 9 i protokollet som presenterades ovan.

Beroende på antalet djur som lyckades lära sig ett målbeteende och antalet anpassningar som behövde göras i protokollen för de enskilda djuren, hade träningsmomenten olika svårighetsgrader. Beteendet att "följa målet" var den första träningsupplevelsen för kaninerna och därför tog det längre tid för vissa djur att träna på detta beteende än det andra målbeteendet, som diskuterats ovan. Även om alla djur kunde tränas i att "väga" enligt det nuvarande protokollet, krävdes ytterligare mellanliggande steg för att "gå in i transportlådan" av två djur och för "uppfödning" samt "hoppa i knät" av nästan alla kaniner. Detta kan förklaras av graden av fysisk kontakt mellan djur och tränare som var nödvändig för att utföra de olika målbeteendena. "Vägning" och "inträde i transportlådan" innebar ingen fysisk kontakt mellan djur och människa. Det sista steget i "stegringen" (8.3) och stegen 9.2-9.4 i "hoppa i knäet" krävde att kaninerna fick fysisk kontakt med tränaren. Dessutom rörde tränaren vid kaninens axel, rygg, rumpa, öron eller tassar i steg 9.5-9.9 av att "hoppa i knät", vilket ökade graden av fysisk kontakt mellan djur och tränare. Att acceptera beröring var mer utmanande för vissa kaniner än för andra. Som diskuterats ovan var det fördelaktigt att anpassa träningsprotokollen för dessa målbeteenden och lägga till mellansteg.

Tre kaniner krävde dock ytterligare träningspass för att slutföra målbeteendet "hoppa i knät" (#4, #7, #10). Fysiska funktionsnedsättningar som hindrade dessa djur från att hoppa upp i tränarens knä kunde uteslutas. Dessutom kunde kaninerna hoppa upp på sina hus, höjden på dessa var högre än tränarens knä.

Det märktes att två av dessa tre kaniner (#4 och #10) behövde längre tid på sig för att vänja sig vid tränaren samt matbelöningen i tillvänjningspassen och delvis behövde fler träningspass för att nå det sista steget av andra målbeteenden. Detta var också sant för kanin #7, som hade en skada i svansen på grund av slagsmål inom gruppen sedan den fjärde tillvänjningssessionen. Därför plockades kanin #7 upp, överfördes till undersökningsbordet, behandlades och inspekterades dagligen i 15 dagar, vilket kan ha resulterat i ökad försiktighet mot människor. Å ena sidan är det viktigt att notera att träningsprestationen kan påverkas av till exempel ett försämrat hälsotillstånd, ökade stressnivåer eller en störd relation mellan människa och djur på grund av andra ingrepp. Å andra sidan visade dessa observationer vikten av tillvänjning för tränaren och matbelöningen. Vissa djur kan behöva längre tid för att bekanta sig med tränarens närvaro och acceptera matbelöningen från tränaren. Om ytterligare tillvänjningssessioner hade genomförts hade kanin #4 och #10 kanske presterat bättre i träningspassen. Betydelsen av att vänja kaniner för människor har redan rapporterats i litteraturen. Den kommersiella uppfödaren, från vilken kaninerna som användes i denna studie köptes, introducerade nyligen regelbundna klappningssessioner, vilket minskade det stressrelaterade beteendet och eliminerade aggressioner58. I en tidigare studie visade sig klappning och hantering av unga kaniner minska ångestrelaterat beteende, öka deras viktökning och minska dödligheten59.

När kaninerna väl hade lärt sig de olika målbeteendena kunde de fortfarande visa dem efter två korta (en vecka) och en lång (cirka 7,5-9,5 veckor) träningspauser, med undantag för enskilda undantag. Dessa observationer kan tyda på att det räcker med att be kaninerna att utföra de tränade målbeteendena en gång i veckan när den allmänna undersökningen utförs och rummet/boxen städas.

För att protokollet ska vara genomförbart för det dagliga arbetslivet är det också avgörande att kaninerna generaliserar de tränade målbeteendena till andra personer än tränaren. Vid semester eller sjukdom måste en annan person fortsätta träningen och ta hand om djuren. Majoriteten av kaninerna (tolv av tretton) generaliserade målbeteendena "vägning", "gå in i transportlådan" och "uppfostran" till djurskötaren, även om det i vissa fall tog kaninerna mer än ett träningspass för att visa det önskade beteendet. "Vägning" tycktes generalisera bäst; följt av "gå in i transportboxen" och "uppfödning". Att "hoppa i knät" visade sig dock vara svårare att generalisera till en annan person. Det tog längre tid för djuren att visa det önskade beteendet (9.9.) och två kaniner, som tidigare lärt sig det sista steget 9.9, misslyckades med att visa detta målbeteende, möjligen på grund av den högre fysiska kontakt som behövdes (se ovan). En kanin (#4) visade inga steg i målbeteendena "vägning", "gå in i transportlåda" och "uppfostra" och var inte intresserad av att interagera med djurskötaren. Kanin #4 var ett av djuren som behövde längre tid för att vänja sig vid tränaren och matbelöningen i tillvänjningssessionerna. Detta kan tyda på att det för vissa individerär fördelaktigt med ytterligare sessioner där djurskötarna tillbringar tid med kaninerna, vänjer dem vid att acceptera matbelöningen från dem och bygger upp ett positivt band. Kaniner kan skilja mellan olika personer, vilket har visats för råttor60. Ytterligare faktorer som har potential att påverka kaninernas prestation i sessionerna med tränaren och djurskötaren kan vara omedvetna signaler som tränaren gav djuren under träningspassen, t.ex. positionen för målpinnen eller belöningsskålen, kroppspositionen eller rörelsen. Om tränaren inte är medveten om dessa signaler kommer de inte att dokumenteras och de andra personerna kommer inte att härma dessa signaler.

Dessutom kan träningsfärdigheterna hos de personer som arbetar med djuren, inklusive rutinen att hantera målpinnen och belöningspresentationen, påverka djurens beteende. Förutom kunskap om inlärningsprinciper och djurkommunikation behövs praktiska erfarenheter för att framgångsrikt träna ett djur61 och återfå ett målbeteende. Eftersom generaliseringssessioner som involverade en skicklig och en okvalificerad person inte jämfördes, kan relevansen av faktorn "träningsfärdigheter" inte fastställas. Såvitt författarna känner till är dock en stor del av försöksdjurspersonalen inte utbildad i djurträning och därför representerade de förhållanden under vilka generaliseringssessionerna genomfördes (dvs. involverade en djurskötare med endast liten tidigare erfarenhet av klickerträning) en realistisk miljö i försöksdjursanläggningar.

De representativa uppgifterna i protokollen ger djuranläggningar en uppfattning om den arbetsbelastning som är förknippad med att träna de olika målbeteendena. Uppgifterna kan hjälpa djuranläggningar att skapa sina egna arbetsscheman när de implementerar (delar av) protokollet. Beroende på det enskilda djuret och målbeteenden bör lite extra tid reserveras för generaliseringsprocessen. Tidslängden kan dock variera när man arbetar med hankaniner eller en annan kaninras. I djurlokalerna bör man diskutera om det finns tillräckligt med tid och vad som behöver ändras för att ge tid för djurträning.

Förutom den tid som krävs för att träna djuren måste man tänka på att utbildningen kräver skickliga tränare och att lära personalen hur man tränar djur kan också vara tidskrävande. Om utbildning var en obligatorisk del av utbildningen av försöksdjurspersonal, det vill säga djurskötare, veterinärer och forskare, skulle genomförandet av djurutbildning i anläggningar underlättas och ta mindre tid. Enligt bilaga III till direktiv 2010/63/EU ska "anläggningarna inrätta tillvänjnings- och träningsprogram som är lämpliga för djuren, förfarandena och projektets längd", dvs. djurträning krävs enligt lag. I Tyskland måste sådana program lämnas in när man ansöker om licens för djurförsök. Detta ställer krav på att den som planerar djurförsök och arbetar med försöksdjur har kompetens inom djurträning. Men åtminstone i Tyskland är djurutbildning inte en del av utbildningsschemat för djurskötare inom forsknings- och klinikområdet 62,63,64. Dessutom nämns den inte uttryckligen i EU:s rekommendationer för utbildningsramen65. Så länge utbildning inte har implementerats i dessa regelverk behöver därför fortsatt professionell utveckling med fokus på positiv förstärkningsträning mer uppmärksamhet. Försöksdjurspersonalen måste lära sig principerna för inlärnings- och träningstekniker, de nödvändiga kriterierna, överföringen av procedurer mellan tränare, journalföring och hur man bemöter djur som inte deltar på ett önskat sätt för att säkerställa konsekvens och förutsägbarhet.

Människa-djur-interaktion

Den intensiva interaktionen mellan människa och djur under träningspassen ger en optimal miljö för att stärka relationen mellan de enskilda kaninerna och tränaren26,66. En positiv relation mellan människa och djur är gynnsam för djurens välbefinnande eftersom det kan minska deras stressnivåer i djurhållning och försöksmiljöer67. I de nuvarande träningsprotokollen tar tränaren hänsyn till kaninernas handlingsfrihet och de kan bestämma sig för att delta (eller inte delta) i träningen på frivillig basis. Att ge djuren handlingsfrihet är gynnsamt för deras välbefinnande 16 och bör därför eftersträvas i såväl försök som i inhysning och djurhållning. Det finns olika nivåer av beteendeorgan68; Att delta i PRT kan hänföras till nivån av handlingsdriven aktörskap, det vill säga "aktivt beteende för att uppnå nuvarande resultat [t.ex. upphandla livsmedel]"68.

När man analyserade kaninernas frivilliga inställning till tränaren och en obekant person, kunde en intensiv interaktion mellan människa och djur observeras. Resultaten visade att alla kaniner, förutom ett djur i 1:a försöket (#12), interagerade med både tränaren och den okända personen. De verkade känna igen tränaren eftersom de visade en tydlig preferens för att interagera med tränaren i 1:a försöket och några av dem hoppade med alla fyra tassarna upp i tränarens knä; Ett beteende som inte visades mot den obekanta personen. Även om kaninerna tillbringade mer tid med att interagera med tränaren än den obekanta personen i detförsta försöket , skilde sig inte interaktionstiden längre i detandra försöket . En anledning till denna observation kan vara att kaninerna förväntade sig att få en matbelöning från tränaren i det 1:a försöket och på grund av bristen på matbelöningar i det frivilliga närmandetestet tillbringade de inte mer tid med tränaren i detandra försöket längre . Dessa data betonade dock att de tränade kaninerna snabbt vande sig vid närvaron av en obekant person och att ingen av dem var för blyg för att interagera. Däremot var de väldigt utforskande och intresserade av den okända personen. Men eftersom en otränad kontrollgrupp inte undersöktes är det oklart vilken effekt träningen har på kaninernas frivilliga närmandebeteende.

En hypotes som förklarar beteendet hos kanin #12 i 1:a försöket är att denna individ fortfarande var tvungen att vänja sig vid närvaron av den obekanta personen i 1:a försöket och var mer intresserad av att interagera med både tränaren (70 sekunder) och den obekanta personen (9 sekunder) i 2:a försöket. Kaniner har olika personlighetsdrag som kan påverka nivån av komfort runt okända personer och i sin tur latensen att närma sig eller interaktionstidens varaktighet med en person69,70.

Begränsningar

Vi är medvetna om att alla kaniner i hagen/rummet, inte bara den som deltar i träningen, kan höra klicket (dvs. den betingade förstärkaren) under ett träningspass och dess förstärkande effekt kan försvagas eftersom matbelöningen (dvs. naturlig/okonditionerad förstärkare) inte presenteras. Om en kanin utanför träningsarenan visar ett intränat beteende och hör klicket, men ingen mat presenteras (och detta scenario inträffar flera gånger), kan det intränade beteendet släckas. Detta fenomen kallas utrotning64,71. Men eftersom alla målbeteenden i de nuvarande protokollen beror på det mål som presenteras av tränaren, är det osannolikt att utrotning kommer att inträffa i vår träningsmiljö.

Eftersom väggarna i träningsarenan var genomskinliga och träningsarenan låg i hagen kunde kaninerna se, höra och lukta på varandra under träningen, vilket är en klar välfärdsmässig fördel. Dessutom kan kaninerna ha observerat sina gruppmedlemmar under träningspassen och lärt sig av varandra. Hos råttor har det tidigare visats att individer lärde sig att utföra ett målbeteende genom att observera att deras burkamrat tränades av PRT45. Detta faktum kan betraktas som både en fördel och en nackdel. Djurens inlärningsframsteg kan gå snabbare när de kan observera varandra. Uppgifterna om de enskilda djuren kan dock påverkas av gruppmedlemmarnas prestationer och får inte enbart hänföras till träningen av det enskilda djuret. Således kan det ta längre tid att träna djur utan någon kontakt med sina gruppmedlemmar eller kaniner som hålls ensamma.

Beteendeobservationer av individerna (i det frivilliga tillvägagångssättet och efter att ha tillämpat de olika hanteringsteknikerna) genomfördes i deras välbekanta sociala miljö och grupp för att undvika stress och distraktion orsakad av en ny miljö och separation från deras grupp, vilket i sin tur skulle ha påverkat de beteendemässiga observationerna. Nackdelen är dock att kaninerna kan ha påverkat varandras beteende under observationssessionerna.

Effekterna av hanteringsteknikerna undersöktes endast på sju djur där tränaren var en person som hanterade djuren. Författarna planerar en uppföljande studie som inkluderar en a priori beräkning av stickprovsstorlek för att reproducera resultaten med andra hanterare och för att ytterligare undersöka skillnaderna mellan hanteringsteknikerna.

Alla människor som deltog i träningen, hanteringen och testet för frivilligt tillvägagångssätt var kvinnor. Det undersöktes inte om kaninernas träningsprestation eller deras beteende skulle variera om hanar var inblandade.

De nuvarande träningsprotokollen bör ge läsaren en uppfattning om vad som kan tränas hos kaniner men omfattar inte alla potentiella målbeteenden som skulle vara fördelaktiga att träna i en laboratoriekanin. Till exempel skulle det också vara värt att träna att märka en kanin som föreslagits i protokollavsnittet om allmänna krav med hjälp av PRT.

Som påpekats vidare ovan är valet av rätt belöning inte trivialt. På grund av hygienrestriktioner är det inte tillåtet att använda färska örter som matbelöning i vissa försöksdjursanläggningar och därför måste mindre lämpliga matbelöningar som solrosfrön eller spannmålsbaserade fodergodis användas. När det gäller beslutet om livsmedelsbelöning är vissa regler och föreskrifter i nuvarande laboratoriepraxis skadliga för djurens välbefinnande och effektiv träning och kan därför behöva omprövas från fall till fall. Det kan också vara möjligt att använda alternativ till matbelöningar, t.ex. mjuka beröringar eller interaktioner med tränaren eller berikningsartiklar. Tränaren måste dock se till för varje enskilt djur att alternativet är att belöna djuret eftersom en belöning bara är en belöning om kaninen verkligen föredrar det. Speciellt beröringar kanske inte tas emot lika belönande av alla kaniner.

Slutsatser

Sammanfattningsvis var den aktuella studien ett första steg för att fylla kunskapsluckan om lämpliga träningsprotokoll för laboratoriekaniner. Honor av Nya Zeelands vita kaniner kan tränas för rutinmässiga uppfödningsprocedurer med hjälp av PRT och generalisera de målbeteenden som lärts in till andra personer, även om ytterligare tid bör reserveras för generaliseringsprocessen. Målbeteenden utan fysisk kontakt verkade vara lättare att lära sig än beteenden som krävde fysisk kontakt med människor. Efter att djuren framgångsrikt avslutat träningen av ett målbeteende räckte det med att hämta dem en gång i veckan i samband med den allmänna undersökningen och rengöringen av boxen. Träningsprotokoll som anses vara allmänt tillämpade på alla kaniner är praktiska, men tränaren måste vara medveten om att det i vissa fall måste anpassas till djurets behov. Resultaten av hanteringstekniken tydde på att det var mindre motbjudande att plocka upp kaninerna med transportlådan istället för att hålla fast dem i nackskinnet och lyfta dem på armen. Sammantaget ger de nuvarande protokollen genomförbara instruktioner för tillvänjning och träningsprocess av kaniner och kan fungera som förfining i försöksdjuranläggningar.

Djur får inte lida på grund av att de sparar arbete, tid eller pengar (åtminstone enligt den tyska djurskyddslagen72). Det är viktigt att ta hand om och hantera alla djur på ett så skonsamt sätt som möjligt. Eftersom otränade djur i högre grad lider av ångest och ångest orsakad av experimentella och rutinmässiga uppfödningsprocedurer än deras tränade motsvarigheter13, är träning en enkel förfining för att effektivt förhindra att de upplever negativa affektiva tillstånd.

Disclosures

Författarna förklarar att det inte föreligger några intressekonflikter i samband med denna publikation.

Acknowledgments

Författarna tackar djurskötarna för att de tar hand om kaninerna och deras medkännande och engagerade arbete. Tack till Kai Diederich för korrekturläsning av manuskriptet.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Bed-r’Nest The Andersons, Inc., Maumee, USA The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
Finger Clicker ASCO https://ascoshop.de/products/fingerclicker
G*Power version 3.1.9.7
Heu-Proppen Ssniff Spezialdiäten GmbH, Soest, Germany The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
IBM Corp. Released 2020. IBM SPSS Statistics for Windows,  Armonk, NY: IBM Corp IBM Corp Version 27.0. in the manuscript referred to as "software for advanced statistical analysis"
Kaninchen Haltung + 25 mg/kg Salinomycin-Natrium-Sondermischung Ssniff Spezialdiäten GmbH, Soest, Germany The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
Lignocel block Lignocel J. Rettenmaier &Söhne GmbH + Co KG, Rosenberg, Germany The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
Lillebro geschälte Sonnenblumenkerne”, Martina GmbH, München, Germany) and Rainbow Foraging Bits (Bio-Serv, Flemington, USA)  Martina GmbH, München, Germany The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
Microsoft Excel for Microsoft 365 MSO Microsoft Corporation Version 2305 in the manuscript referred to as "spread sheet"
New Zealand White rabbits  Charles River Laboratories France
Plattformwaage DE 35K5DL KERN & SOHN GmbH, Balingen-Frommern, Germany The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
Premium scientific bedding (fine & flake) SAFE, Augy, France The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
Rainbow Foraging Bits Bio-Serv, Flemington, USA The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
Snackball für Kaninchen – 7 cm TRIXIE Heimtierbedarf GmbH & Co. KG, Tarp, Germany The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
Target stick with integrated clicker TRIXIE Heimtierbedarf GmbH & Co. KG, Tarp, Germany The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
Trixi Transportbox Capri Open Top TRIXIE Heimtierbedarf GmbH & Co. KG, Tarp, Germany The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
Weiden-Heuball JR FARM GmbH, Holzheim-Pessenburgheim, Germany The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. European Commission: Alures-animal use reporting-EU system. EU statistics on the use of animals for scientific purposes under directive 2010/63/eu-section 1: Number of animals used for research, testing, routine production and education and training purposes in the EU. European Commission. , Available from: https://webgate.Ec.Europa.Eu/envdataportal/content/alures/section1_number-of-animals.html (2023).
  2. European Commission: Alures-animal use reporting-EU system. EU statistics database on the use of animals for scientific purposes under directive 2010/63/eu-section 2: Details of all uses of animals for research, testing, routine production and education and training purposes in the EU. European Commission. , Available from: https://webgate.Ec.Europa.Eu/envdataportal/content/alures/section2_number-of-uses.html (2023).
  3. Russell, W. M. S., Burch, R. L. The principles of humane experimental technique. , Methuen. (1959).
  4. Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes. Official journal of the European Union. , Available from: https://eur-lex.europa.eu/legal-content/EN/TXT/?uri=celex%3A32010L0063 (2023).
  5. Hau, J., Carver, J. Refinement in laboratory animal science; is it a cinderella subject, and is there conflict and imbalance within the 3Rs. Scandinavian Journal of Laboratory Animal Science. 21 (4), 161-167 (1994).
  6. Prescott, M. J., Lidster, K. Improving quality of science through better animal welfare: the NC3Rs strategy. Lab Anim (NY). 46 (4), 152-156 (2017).
  7. European convention for the protection of vertebrate animals. Appendix a of the european convention for the protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purposes (ETS No. 123). Guidelines for accommodation and care of animals (article 5 of the convention). European convention for the protection of vertebrate animals. , (2006).
  8. Morimoto, A., Watanabe, T., Myogin, T., Murakami, N. Restraint induced stress elicits acute-phase response in rabbits. Pflügers Archiv - European Journal of Physiology. 410 (4), 554-556 (1987).
  9. Rooney, N. J., et al. The current state of welfare, housing and husbandry of the English pet rabbit population. BMC Research Notes. 7, 942 (2014).
  10. Schepers, F., Koene, P., Beerda, B. Welfare assessment in pet rabbits. Animal welfare. 18 (4), 477-485 (2009).
  11. Normando, S., Gelli, D. Behavioral complaints and owners' satisfaction in rabbits, mustelids, and rodents kept as pets. Journal of Veterinary Behavior. 6 (6), 337-342 (2011).
  12. Hurst, J. L., West, R. S. Taming anxiety in laboratory mice. Nature methods. 7 (10), 825-826 (2010).
  13. Leidinger, C., Herrmann, F., Thoene-Reineke, C., Baumgart, N., Baumgart, J. Introducing clicker training as a cognitive enrichment for laboratory mice. Journal of Visualized Experiments. (121), e55415 (2017).
  14. Lambeth, S. P., Hau, J., Perlman, J. E., Martino, M., Schapiro, S. J. Positive reinforcement training affects hematologic and serum chemistry values in captive chimpanzees (pan troglodytes). American Journal of Primatology. 68 (3), 245-256 (2006).
  15. Reinhardt, V. Working with rather than against macaques during blood collection. Journal of Applied Animal Welfare Science. 6 (3), 189-197 (2003).
  16. Sueur, C., Zanaz, S., Pelé, M. Incorporating animal agency into research design could improve behavioral and neuroscience research. Journal of Comparative Psychology. 137 (2), 129-143 (2023).
  17. National Research Council (Us) Committee for the Update of the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. Guide for the care and use of laboratory animals. 8th edition. , National Academies Press (US); 2011. 3, Environment, Housing, and Management. Washington (dc). Available from: Https://www.Ncbi.Nlm.Nih.Gov/books/nbk54046/ (2023).
  18. Skinner, B. F. Two types of conditioned reflex: a reply to Konorski and M. The Journal of General Psychology. 16 (1), 272-279 (1937).
  19. Skinner, B. F. The behavior of organisms: An experimental analysis. , Appleton-Century. (1938).
  20. Pierce, W. D., Cheney, C. D. Behavior analysis and learning: a biobehavioral approach. , Routledge. (2017).
  21. Cooper, J. O., Heron, T. E., Heward, W. L. Applied behavior analysis. , Pearson UK. (2020).
  22. Pryor, K. Don't shoot the dog: The art of teaching and training. , Simon & Schuster. (2019).
  23. Brando, S., Norman, M. Handling and training of wild animals: Evidence and ethics-based approaches and best practices in the modern zoo. Animals (Basel). 13 (14), (2023).
  24. Heidenreich, B. An introduction to positive reinforcement training and its benefits). Journal of Exotic Pet Medicine. 16 (1), 19-23 (2007).
  25. Vieira De Castro, A. C., et al. Does training method matter? Evidence for the negative impact of aversive-based methods on companion dog welfare. PLoS One. 15 (12), 0225023 (2020).
  26. Laule, G. The UFAW Handbook on the care and management of laboratory and other research animals. Hubrecht, R. C., Kirkwook, J. , John Wiley & Sons. 206-218 (2010).
  27. Zimbardo, P. G., Gerrig, R. J. Psychologie. 18th edition. , Pearson Studium. German edition by Ralf Graf (2004).
  28. Powell, R. A., Honey, P. L., Symbaluk, D. G. Introduction to learning and behavior. 5th edition. , Cengage Learning. (2017).
  29. Peterson, G. B. A day of great illumination: B. F. Skinner's discovery of shaping. J Exp Anal Behav. 82 (3), 317-328 (2004).
  30. Skinner, B. F. How to teach animals. Scientific American. 185 (6), 26-29 (1951).
  31. Breland, K., Breland, M. A field of applied animal psychology. American Psychologist. 6 (6), 202-204 (1951).
  32. Fernandez, E. J., Martin, A. L. Animal training, environmental enrichment, and animal welfare: a history of behavior analysis in zoos. Journal of Zoological and Botanical Gardens. 2 (4), 531-543 (2021).
  33. Ferguson, D. L., Rosales-Ruiz, J. Loading the problem loader: The effects of target training and shaping on trailer-loading behavior of horses. J Appl Behav Anal. 34 (4), 409-423 (2001).
  34. Fernandez, E. J., Dorey, N. R. An examination of shaping with an african crested porcupine (hystrix cristata). J Appl Anim Welf Sci. 24 (4), 372-378 (2021).
  35. Fernandez, E. J., Rosales-Ruiz, J. A comparison of fixed-time food schedules and shaping involving a clicker for halter behavior in a petting zoo goat. The Psychological Record. 71 (3), 487-491 (2021).
  36. Slater, C., Dymond, S. Using differential reinforcement to improve equine welfare: shaping appropriate truck loading and feet handling. Behav Processes. 86 (3), 329-339 (2011).
  37. Pfaller-Sadovsky, N., Hurtado-Parrado, C., Cardillo, D., Medina, L. G., Friedman, S. G. What's in a click? The efficacy of conditioned reinforcement in applied animal training: A systematic review and meta-analysis. Animals (Basel). 10 (10), (2020).
  38. Prescott, M., Bowell, V., Buchanan-Smith, H. Training laboratory-housed non-human primates, part 2: Resources for developing and implementing training programmes. Animal Technology and Welfare. 4 (3), 133-148 (2005).
  39. Prescott, M., Buchanan-Smith, H. Training laboratory-housed non-human primates, part i: A UK survey. Animal welfare. 16 (1), 21-36 (2007).
  40. Schapiro, S. J., Bloomsmith, M. A., Laule, G. E. Positive reinforcement training as a technique to alter nonhuman primate behavior: Quantitative assessments of effectiveness. Journal of Applied Animal Welfare Science. 6 (3), 175-187 (2003).
  41. Joint Working Group on Refinement. Refining dog husbandry and care. Eighth report of the BVAAWF/FRAME/RSPCA/UFAW joint working group on refinement. Laboratory Animals. 38, 1-94 (2004).
  42. Meunier, L. D. Selection, acclimation, training, and preparation of dogs for the research setting. ILAR Journal. 47 (4), 326-347 (2006).
  43. Thomsen, A. F., Kousholt, B. S. Transition of farm pigs to research pigs using a designated checklist followed by initiation of clicker training - a refinement initiative. Journal of Visualized Experiments. (174), e62099 (2021).
  44. Langbein, J., Siebert, K., Nuernberg, G., Manteuffel, G. The impact of acoustical secondary reinforcement during shape discrimination learning of dwarf goats (capra hircus). Applied Animal Behaviour Science. 103 (1), 35-44 (2007).
  45. Leidinger, C. S., Kaiser, N., Baumgart, N., Baumgart, J. Using clicker training and social observation to teach rats to voluntarily change cages. Journal of Visualized Experiments. (140), e58511 (2018).
  46. Poling, A., et al. Tuberculosis detection by giant african pouched rats. The Behavior Analyst. 34 (1), 47-54 (2011).
  47. Poling, A., et al. Using trained pouched rats to detect land mines: Another victory for operant conditioning. Journal of Applied Behavior Analysis. 44 (2), 351-355 (2011).
  48. Rubin, H. B., Brown, H. J. The rabbit as a subject in behavioral research. J Exp Anal Behav. 12 (4), 663-667 (1969).
  49. Müller, I. Clickertraining: Für Kaninchen. , Meerschweinchen & Co. (2015).
  50. Bradbury, A. G., Dickens, G. J. Appropriate handling of pet rabbits: a literature review. J Small Anim Pract. 57 (10), 503-509 (2016).
  51. Mähler, M., et al. Felasa recommendations for the health monitoring of mouse, rat, hamster, guinea pig and rabbit colonies in breeding and experimental units. Laboratory Animals. 48 (3), 178-192 (2014).
  52. Faul, F., Erdfelder, E., Lang, A. G., Buchner, A. G*power 3: a flexible statistical power analysis program for the social, behavioral, and biomedical sciences. Behavior Research Methods. 39 (2), 175-191 (2007).
  53. Friard, O., Gamba, M. Boris: A free, versatile open-source event-logging software for video/audio coding and live observations. Methods in Ecology and Evolution. 7 (11), 1325-1330 (2016).
  54. Landis, J. R., Koch, G. G. The measurement of observer agreement for categorical data. Biometrics. 33 (1), 159-174 (1977).
  55. Réale, D., Dingemanse, N. J., Kazem, A. J., Wright, J. Evolutionary and ecological approaches to the study of personality. Philosophical transactions of the Royal Society of London. Series B, Biological sciences. 365 (1560), 3937-3946 (2010).
  56. Mullan, S. M., Main, D. C. Behaviour and personality of pet rabbits and their interactions with their owners. Veterinary Record. 160 (15), 516-520 (2007).
  57. Mackie, J., Patel, C. Bsava manual of practical veterinary welfare. Rendle, M., Hinde-Megarity, J. , British Small Animal Veterinary Association. 146-165 (2022).
  58. Dhondt, K. P., Rabany, B., Méon, B., Leal, A., Paillet, G. Rabbit human habituation program during breeding reduced significantly stress related signs during acclimatization period. In Abstracts of 15th FELASA congress 2022. Laboratory Animals. 56, 23 (2022).
  59. Jezierski, T. A., Konecka, A. M. Handling and rearing results in young rabbits. Applied Animal Behaviour Science. 46 (3), 243-250 (1996).
  60. Davis, H., Taylor, A. A., Norris, C. Preference for familiar humans by rats. Psychonomic Bulletin & Review. 4 (1), 118-120 (1997).
  61. Meier, J., Hillmann, E., Theby, V., Fischer-Tenhagen, C. Train the trainer: what is needed to train goats for experiments. In Abstracts of 15th FELASA congress 2022. Laboratory Animals. 56, 24 (2022).
  62. BGBL. I S. Verordnung über die Berufsausbildung zum Tierpfleger/zur Tierpflegerin vom 3. , BGBL. I S. 1093 (2003).
  63. Pavlov, P. I. Conditioned reflexes: An investigation of the physiological activity of the cerebral cortex. Annals of Neurosciences. 17 (3), 136-141 (2010).
  64. Skinner, B. On the rate of extinction of a conditioned reflex. The Journal of General Psychology. 8 (1), 114-129 (1933).
  65. Directorate-General for Environment (European Commission). Caring for animals aiming for better science - directive 2010/63/eu on protection of animals used for scientific purposes - education and training framework. Directorate-General for Environment (European Commission). , (2018).
  66. Rault, J. L., Waiblinger, S., Boivin, X., Hemsworth, P. The power of a positive human-animal relationship for animal welfare). Frontiers in Veterinary Science. 7, 590867 (2020).
  67. Bayne, K. Development of the human-research animal bond and its impact on animal well-being. ILAR J. 43 (1), 4-9 (2002).
  68. Špinka, M. Animal agency, animal awareness and animal welfare. Animal Welfare. 28 (1), 11-20 (2019).
  69. Ellis, C. F. Exploring domestic rabbit (oryctolagus cuniculus) personality utilising behaviour coding, behaviour testing and a novel behaviour rating tool. , University of Northampton. (2020).
  70. Gomezdelatorre Clavel, M. G., Youngblood, M., Lahti, D. Relationship between personality and cognitive traits in domestic rabbits (Oryctolagus cuniculus). bioRxiv. , (2020).
  71. Pavlov, P. I. Conditioned reflexes: An investigation of the physiological activity of the cerebral cortex. Annals of Neurosciences. 17 (3), 136 (2010).
  72. Tierschutzgesetz in der Fassung der Bekanntmachung vom 18. Mai 2006 (BGBL. I S. 1206, 1313), das zuletzt durch Artikel 105 des Gesetzes vom 10. August 2021 (BGBL. I S. 3436) geändert worden ist. , Available from: www.gesetze-im-internet.de/tierschg/BJNR012770972.html (2023).

Tags

Denna månad i JoVE nummer 204
Träning av laboratoriekaniner för att förfina rutinmässiga uppfödningsprocedurer
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Hohlbaum, K., Kahnau, P.,… More

Hohlbaum, K., Kahnau, P., Wilzopolski, J., Fischer-Tenhagen, C. Training Laboratory Rabbits to Refine Routine Husbandry Procedures. J. Vis. Exp. (204), e66008, doi:10.3791/66008 (2024).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter