Summary

प्राथमिक Sjögren सिंड्रोम रोगियों में मौखिक कैंडिडा संक्रमण की परीक्षा

Published: March 01, 2024
doi:

Summary

यहां, हम प्राथमिक Sjögren सिंड्रोम वाले रोगियों में मौखिक कैंडिडा संक्रमण की जांच के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं, जिसका उपयोग समय पर उपचार के लिए किया जा सकता है और उसके बाद, संबंधित जटिलताओं से बचा जा सकता है।

Abstract

प्राथमिक Sjögren सिंड्रोम (pSS) एक ऑटोइम्यून बीमारी है जो शुष्क मुंह, सूखी आंखें और अन्य व्यवस्थित लक्षणों जैसे लक्षणों की विशेषता है। पीएसएस रोगियों द्वारा अनुभव किए गए हाइपोसैलिवेशन के कारण, मौखिक डिस्बैक्टीरियोसिस अक्सर होता है। पीएसएस की एक आम जटिलता मौखिक कैंडिडा संक्रमण है। इस लेख में, लेखक व्यवस्थित तरीकों का वर्णन करते हैं जो मौखिक कैंडिडा संक्रमण का प्रभावी ढंग से निदान कर सकते हैं और लार, मौखिक श्लेष्म स्वैब, या पीएसएस रोगियों से माउथवॉश का उपयोग करके कैंडिडा उपभेदों की पहचान कर सकते हैं। सबौरौद के डेक्सट्रोज अगर (एसडीए), हाइफल गठन परख, पोटेशियम हाइड्रॉक्साइड (केओएच) स्मीयर परीक्षण, और कैल्कोफ्लोर व्हाइट (सीएफडब्ल्यू) धुंधला परख का उपयोग मौखिक कैंडिडा संक्रमण के निदान के लिए किया जाता है। एक Candida निदान अगर Candida उपभेदों की पहचान के लिए प्रयोग किया जाता है. अंत में, उचित एंटिफंगल दवा उपचार निर्धारित करने के लिए एंटिफंगल संवेदनशीलता परीक्षण का उपयोग किया जाता है। यह मानकीकृत विधि पीएसएस से संबंधित मौखिक कैंडिडा संक्रमणों के निदान, उपचार और भविष्य के अनुसंधान को बढ़ा सकती है। प्रारंभिक निदान, इस पद्धति का उपयोग करके, उचित उपचार प्राप्त करने में देरी के कारण उत्पन्न होने वाली किसी भी जटिलता को भी रोक सकता है।

Introduction

कैंडिडिआसिस कैंडिडा एसपीपी के कारण होता है, जो अवसरवादी रोगजनक हैं। आम उपभेदों में कैंडिडा अल्बिकन्स, कैंडिडा क्रूसी, कैंडिडा ग्लबराटा, कैंडिडा पैराप्सिलोसिस और कैंडिडा डबलिनेसिस1 शामिल हैं। कैंडिडा एसपीपी के कारण होने वाले अवसरवादी संक्रमणों में सतही कैंडिडा संक्रमण और आक्रामक कैंडिडिआसिस शामिल हैं। आक्रामक कैंडिडिआसिस मुख्य रूप से इम्यूनोकॉम्प्रोमाइज्ड व्यक्तियों में होता है; उदाहरण के लिए, अधिग्रहित इम्यूनोडेफिशिएंसी सिंड्रोम (एड्स) वाले रोगियों में, आक्रामक कैंडिडिआसिस जीवन की गुणवत्ता या यहां तक कि जीवन काल2 को काफी खतरा हो सकता है। सतही कैंडिडा संक्रमण, जैसे कि श्लेष्म कैंडिडिआसिस, रोगियों में अधिक आम है3.

मौखिक कैंडिडिआसिस, एक सतही कैंडिडा संक्रमण, सबसे आम मानव फंगल संक्रमण है। कैंडिडा अल्बिकन्स मुंह का एक सामान्य कॉमेंसल है; कैंडिडा एसपीपी की कैरिज दर सामान्य आबादी में बिना किसी लक्षण के 20% से 75% तक बताई गईहै 4. कैंडिडा के अतिवृद्धि से रोगियों में स्थानीय असुविधा हो सकती है, जैसे सनसनी का बदला हुआ स्वाद, मुंह में जलन, खराब पोषण के कारण डिस्पैगिया, वसूली में देरी, और लंबे समय तक अस्पताल में रहना। लंबे समय तक मौखिक कैंडिडिआसिस गंभीर आक्रामक कैंडिडिआसिस का कारण बन सकता है, जिसके परिणामस्वरूप महत्वपूर्ण रुग्णता और मृत्यु दर5. ओरल कैंडिडिआसिस भी मौखिक कैंसर के खतरे को बढ़ा सकता है5. बिगड़ा हुआ लार ग्रंथि समारोह मौखिक कैंडिडिआसिस6 के लिए जोखिम कारकों में से एक है। संक्रमण की शुरुआत उपकला कोशिका की दीवारों के लिए कैंडिडा का आसंजन है। इसके बाद कैंडिडा का प्रसार और फिलामेंटेशन और बायोफिल्म7 का गठन और परिपक्वता होती है। बायोफिल्म को मिटाना बेहद मुश्किल है और पारंपरिक एंटिफंगल उपचार के लिए प्रतिरोधी हैं, जिससे नैदानिक उपचार बायोफिल्म से जुड़े मौखिक कैंडिडा संक्रमण के लिए एक चुनौती बन जाता है।

प्राथमिक Sjögren सिंड्रोम (pSS) एक ऑटोइम्यून बीमारी है जो शुष्क मुंह, शुष्क आंखों और अन्य व्यवस्थित लक्षणों की विशेषता है8. शुष्क मुंह पीएसएस का सबसे लगातार लक्षण है। लार में महत्वपूर्ण शारीरिक एंटिफंगल कार्य होते हैं। एक ओर, यह मुंह को पतला और परिमार्जन कर सकता है और उसके बाद म्यूकोसा से जीवों को हटा सकता है। दूसरी ओर, लार में रोगाणुरोधी प्रोटीन होते हैं, जैसे लैक्टोफेरिन, सियालोपरॉक्सीडेज, लाइसोजाइम, हिस्टिडीन युक्त पॉलीपेप्टाइड्स, और विशिष्ट एंटी-कैंडिडल एंटीबॉडी, जो मौखिक श्लेष्म के साथ बातचीत कर सकते हैं और कैंडिडा6 के अतिवृद्धि को रोक सकते हैं। कम लार प्रवाह पीएसएस रोगियों को मौखिक कैंडिडिआसिस के लिए प्रेरित कर सकता है। 61 पीएसएस रोगियों में किए गए एक अवलोकन पार-अनुभागीय अध्ययन में पाया गया कि पीएसएस रोगियों के 13.1% ने कैंडिडिआसिस और कॉलोनी बनाने वाली इकाई (सीएफयू)/ कैंडिडा अल्बिकन्स के एमएल के मौखिक संकेत प्रस्तुत किए, जो कि अस्थिर पूरे लार (यूडब्ल्यूएस) के स्तर के साथ महत्वपूर्ण और नकारात्मक रूप से सहसंबद्ध पाए गए और पूरे लार (एसडब्ल्यूएस)9को उत्तेजित किया।

इस पांडुलिपि में शुरू की विधियों प्रत्यक्ष धब्बा में या10 संवर्धन के बाद विशेषता रूपात्मक विशेषताओं (जैसे, hyphae और खमीर कोशिकाओं) के आधार पर मौखिक Candida संक्रमण की पहचान कर सकते हैं. एक कैंडिडा निदान अगर का उपयोग कर कैंडिडा के तनाव की पहचान विभिन्न आकारिकी के साथ विभिन्न रंगीन कालोनियों के गठन पर आधारित है, जो प्रजाति-विशिष्ट एंजाइमों11 द्वारा क्रोमोजेनिक सब्सट्रेट के दरार से उत्पन्न होता है। इस पांडुलिपि में, मौखिक कैंडिडा संक्रमण का पता लगाने के लिए व्यवस्थित तरीके पेश किए जाते हैं, जिसमें पारंपरिक मौखिक कैंडिडा संस्कृति और पोटेशियम हाइड्रॉक्साइड (KOH) स्मीयर परीक्षण और कैल्कोफ्लोर व्हाइट (CFW) धुंधला परख10 द्वारा तेजी से परीक्षा शामिल है। इसके अतिरिक्त, एंटिफंगल संवेदनशीलता परीक्षण, जो नैदानिक मौखिक कैंडिडा संक्रमण उपचार का मार्गदर्शन कर सकता है, पेश किया गया है। वास्तविक स्थितियों में, इस पांडुलिपि में सभी पेश किए गए तरीकों को करना आवश्यक नहीं है; मौखिक कैंडिडा डिटेक्शन विधि (ओं) को उद्देश्य के अनुसार चुना जा सकता है। मौखिक कैंडिडा संक्रमण की परीक्षा और पीएसएस रोगियों में कैंडिडा उपभेदों के निर्धारण से न केवल रोग के उपचार को लाभ होता है, बल्कि मौखिक कैंडिडिआसिस और प्रजातियों के प्रोफाइल के लक्षण वर्णन का आकलन करने में भी मदद मिलती है।

Protocol

नीचे वर्णित सभी प्रक्रियाओं को बीजिंग तियानटन अस्पताल, कैपिटल मेडिकल यूनिवर्सिटी (संख्या KY2023-177-01) की नैतिक समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था, और इस अध्ययन में शामिल सभी रोगियों ने सूचित सहमति प्रदान की।…

Representative Results

इस अध्ययन में, पीएसएस के साथ 12 रोगियों को प्रतिनिधि रोगियों के रूप में चुना गया और मौखिक कैंडिडा संक्रमण(तालिका 1)के लिए जांच की गई। इन रोगियों के बीच, कुछ रोगियों कोणीय cheilitis (मुंह, desquamation, और hyperemia, <strong …

Discussion

वर्तमान पांडुलिपि में, हम मौखिक कैंडिडा संक्रमण का पता लगाने, कैंडिडा उपभेदों की पहचान करने और पीएसएस के रोगियों में आमतौर पर इस्तेमाल की जाने वाली दवाओं की एंटिफंगल संवेदनशीलता का परीक्षण करन…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

इस शोध को नेशनल नेचुरल साइंस फाउंडेशन ऑफ चाइना (82201084), चाइना पोस्टडॉक्टोरल साइंस फाउंडेशन (2022M722232), बीजिंग पोस्टडॉक्टोरल रिसर्च फाउंडेशन (2023-ZZ-020), बीजिंग तियानटन अस्पताल का मियाओपू प्रोजेक्ट, कैपिटल मेडिकल यूनिवर्सिटी (2023MP10) और जनरल रिसर्च फंड, हांगकांग रिसर्च ग्रांट काउंसिल (27111820 और 17116521) द्वारा समर्थित किया गया था।

Materials

0.22 µm Syringe Filter MERCK SLGV004SL
1.5 mL Centrifuge Tube axygen MCT-150-C-S
10 cm Microbiological Culture Dishes Jet Bio-Filtration Co. Ltd TCD000100
15 mL Centrifuge Tube Jet Bio-Filtration Co., Ltd CFT011150
50 mL Centrifuge Tube Corning 430290
96-well Microplates Corning 3599
API 0.85% NaCl ampule BIOMERIEUX 20070
Calcofluor White Stain Sigma-Aldrich 18909-100ML-F
CHROMagar Candida CHROMagar P002860 Candida diagnostic agar
D(+)-Glucose Monohydrate Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd 10010518
Fetal Bovine Serum  Gibco 26170035
McFarland Standards Kit BIOMERIEUX 70900
Nunc precision molded loops  ThermoFisher Scientific 254399
Phosphate Buffered Saline Gibco C10010500BT
Potassium Hydroxide Aladdin P112284-500g
PowerSoil DNA Isolation Kit  MO BIO 12888-50
RPMI 1640 Medium Gibco 11875119
Sabourand's Agar Medium Solarbio S9710
Yeast Nitrogen Base Without Amino acids Solarbio Y8040
Yeast-like Fungal Susceptibility Kit (Microdilution) BIOMERIEUX 14204

References

  1. Wang, X., et al. Microbiota dysbiosis in primary Sjögren’s syndrome and the ameliorative effect of hydroxychloroquine. Cell Rep. 40 (11), 111352 (2022).
  2. Humphrey, S. P., Williamson, R. T. A review of saliva: normal composition, flow, and function. J Prosthet Dent. 85 (2), 162-169 (2001).
  3. Marsh, P. D., Do, T., Beighton, D., Devine, D. A. Influence of saliva on the oral microbiota. Periodontol 2000. 70 (1), 80-92 (2016).
  4. Vila, T., Rizk, A. M., Sultan, A. S., Jabra-Rizk, M. A. The power of saliva: Antimicrobial and beyond. PLoS Pathog. 15 (11), e1008058 (2019).
  5. Serrano, J., et al. Risk factors related to oral candidiasis in patients with primary Sjögren’s syndrome. Med Oral Patol Oral Cir Bucal. 25 (5), e700-e705 (2020).
  6. Napeñas, J. J., Rouleau, T. S. Oral complications of Sjögren’s syndrome. Oral Maxillofac Surg Clin North Am. 26 (1), 55-62 (2014).
  7. Mathews, S. A., Kurien, B. T., Scofield, R. H. Oral manifestations of Sjögren’s syndrome. J Dent Res. 87 (4), 308-318 (2008).
  8. Leung, K. C. M., McMillan, A. S., Cheung, B. P. K., Leung, W. K. Sjögren’s syndrome sufferers have increased oral yeast levels despite regular dental care. Oral Dis. 14 (2), 163-173 (2008).
  9. Lundstrom, I. M., Lindstrom, F. D. Subjective and clinical oral symptoms in patients with primary Sjögren’s syndrome. Clin Exp Rheumatol. 13 (6), 725-731 (1995).
  10. Alam, M. Z., et al. Candida identification: a journey from conventional to molecular methods in medical mycology. World J Microbiol Biotechnol. 30 (5), 1437-1451 (2014).
  11. Bauters, T. G., Nelis, H. J. Comparison of chromogenic and fluorogenic membrane filtration methods for detection of four Candida species. J Clin Microbiol. 40 (5), 1838-1839 (2002).
  12. Soto-Rojas, A. E., Villa, A. R., Sifuentes-Osornio, J., Alarcón-Segovia, D., Kraus, A. Oral candidiasis and Sjögren’s syndrome. J Rheumatol. 25 (5), 911-915 (1998).
  13. Gilchrist, J. E., Campbell, J. E., Donnelly, C. B., Peeler, J. T., Delaney, J. M. Spiral plate method for bacterial determination. Appl Microbiol. 25 (2), 244-252 (1973).
  14. Biomerieux. ATB FUNGUS 3 Sensitivity test for yeast-like fungi. REF 14204. Biomerieux. , (2014).
  15. Zhang, L., et al. The widely used ATB FUNGUS 3 automated readings in China and its misleading high MICs of Candida spp. to Azoles: Challenges for developing countries’ clinical microbiology labs. PLoS One. 9 (12), e114004 (2014).
  16. Hu, L., Zhou, P., Zhao, W., Hua, H., Yan, Z. Fluorescence staining vs. routine KOH smear for rapid diagnosis of oral candidiasis-A diagnostic test. Oral Dis. 26 (5), 941-947 (2020).
  17. Samaranayake, L. P. Candida krusei infections and fluconazole therapy. Hong Kong Med J. 3 (3), 312-314 (1997).
  18. Lee, Y., Puumala, E., Robbins, N., Cowen, L. E. Antifungal drug resistance: Molecular mechanisms in Candida albicans and beyond. Chem Rev. 121 (6), 3390-3411 (2021).
  19. Rihab, B., Lina, E. H., Noémie, S. T., Jean, S., Marjolaine, G. The experience of dry mouth and screening for Sjogren’s syndrome by the dentist: patient-reported experiences. BMC Oral Health. 23 (1), 1010 (2023).
  20. Panpetch, W., et al. Oral Candida administration in a Clostridium difficile mouse model worsens disease severity but is attenuated by Bifidobacterium. PLoS One. 14 (1), e210798 (2019).
  21. Alwaily, E. R., Abood, M. S., Al Uobody, R. M. Diagnosis of oral candidiasis in patients under 12 years: 18S rRNA as a marker of molecular characterization of Candida tropicalis. Arch Razi Inst. 78 (1), 475-483 (2023).
  22. Chen, C. L., et al. Candida infection as an early sign of subsequent Sjögren’s syndrome: A population-based matched cohort study. Front Med (Lausanne). 8, 796324 (2022).

Play Video

Cite This Article
Wang, X., Song, Y., Lou, X., Han, B., Wu, R., Xie, J., Lin, X., Wang, H. Examination of Oral Candida Infection in Primary Sjögren's Syndrome Patients. J. Vis. Exp. (205), e66430, doi:10.3791/66430 (2024).

View Video