シェーグレン症候群原発性患者における口腔 カンジダ 感染の検討
Summary
ここでは、原発性シェーグレン症候群の患者における口腔 カンジダ 感染症の検査のためのプロトコルを提示し、タイムリーな治療に使用でき、その後、関連する合併症を回避することができます。
Abstract
原発性シェーグレン症候群(pSS)は、口渇、ドライアイ、その他の全身症状などの症状を特徴とする自己免疫疾患です。pSS患者が経験する唾液分泌低下のために、口腔内細菌異化症がしばしば発生します。pSSの一般的な合併症は、口腔カンジダ感染症です。この記事では、著者らは、唾液、口腔粘膜スワブ、またはpSS患者のうがい薬を使用して、口腔カンジダ感染を効果的に診断し、カンジダ菌株を特定できる体系的な方法について説明します。サブローのデキストロース寒天培地(SDA)、菌糸形成アッセイ、水酸化カリウム(KOH)塗抹検査、およびカルコフルーオロホワイト(CFW)染色アッセイは、口腔カンジダ感染症の診断に使用されます。カンジダ菌株の同定には、カンジダ診断寒天が使用されます。最後に、抗真菌剤感受性試験を使用して、適切な抗真菌薬治療を決定します。この標準化された方法は、pSS関連の口腔カンジダ感染症の診断、治療、および将来の研究を強化することができます。この方法を使用した早期診断は、適切な治療を受けることの遅れによって生じる合併症を防ぐこともできます。
Introduction
カンジダ症は、日和見病原体であるカンジダ属によって引き起こされます。一般的な株には、カンジダ・アルビカンス、カンジダ・クルセイ、カンジダ・グラブラタ、カンジダ・パラプシロシス、およびカンジダ・ダブリニエンシス1が含まれます。カンジダ属によって引き起こされる日和見感染症には、表在性カンジダ感染症と侵襲性カンジダ症が含まれます。侵襲性カンジダ症は、主に免疫不全の人に発生します。たとえば、後天性免疫不全症候群(AIDS)の患者では、侵襲性カンジダ症は生活の質や寿命を著しく脅かす可能性があります2。粘膜皮膚カンジダ症などの表在性カンジダ感染症は、患者に多く見られます3。
表在性カンジダ感染症である口腔カンジダ症は、最も一般的なヒト真菌感染症です。カンジダ・アルビカンスは、口の正常な共生です。カンジダ属の保菌率は、症状のない一般集団で20%から75%の範囲であると報告されています4。カンジダの異常増殖は、感覚の味の変化、口の中の灼熱感、栄養不良による嚥下障害、回復の遅れ、入院期間の長期化など、患者に局所的な不快感を引き起こす可能性があります。長期の口腔カンジダ症は、重度の侵襲性カンジダ症を引き起こし、重大な罹患率と死亡率をもたらす可能性があります5。口腔カンジダ症も口腔がんのリスクを高める可能性があります5。唾液腺機能障害は、口腔カンジダ症の危険因子の1つです6。感染の開始は、カンジダの上皮細胞壁への付着です。これに続いて、カンジダの増殖とフィラメント化、バイオフィルムの形成と成熟が続きます7。バイオフィルムは根絶が非常に困難であり、従来の抗真菌治療に耐性があるため、バイオフィルム関連の口腔カンジダ感染症の臨床治療は困難です7。
原発性シェーグレン症候群(pSS)は、口渇、ドライアイ、およびその他の全身症状を特徴とする自己免疫疾患です8。口渇はpSSの最も頻繁な症状です。唾液には重要な生理学的抗真菌機能があります。一方では、口を希釈して精査し、その後粘膜から生物を除去することができます。一方、唾液には、ラクトフェリン、シアロペルオキシダーゼ、リゾチーム、ヒスチジンに富むポリペプチド、特異的抗カンジダ抗体などの抗菌タンパク質が含まれており、口腔粘膜と相互作用して カンジダ6の異常増殖を防ぐことができます。唾液の流れが減少すると、pSS患者が口腔カンジダ症にかかりやすくなる可能性があります。61人のpSS患者を対象に実施された観察横断研究では、pSS患者の13.1%がカンジダ症の口腔徴候を示し、 カンジダアルビカンスの コロニー形成単位(CFU)/ mLは、刺激されていない全唾液(UWS)および刺激された全唾液(SWS)のレベルと有意かつ負の相関があることがわかりました9。
この原稿で紹介された方法は、直接塗抹標本中または培養後に、特徴付けられた形態学的属性(例えば、菌糸および酵母細胞)に基づいて口腔カンジダ感染を同定することができる10。カンジダ診断寒天を用いたカンジダの菌株同定は、種特異的酵素11による発色基質の切断から生じる、さまざまな形態を持つ異なる色のコロニーの形成に基づいている。この原稿では、従来の口腔カンジダ培養、水酸化カリウム(KOH)塗抹検査およびカルコフルーオロホワイト(CFW)染色アッセイによる迅速検査など、経口カンジダ感染を検出するための体系的な方法を紹介します10。さらに、臨床的な経口カンジダ感染症治療を導くことができる抗真菌感受性試験が導入されました。実際の状況では、この原稿で紹介されている方法をすべて実行する必要はありません。経口カンジダ検出法は、目的に応じて選択することができます。口腔カンジダ感染症の検査と pSS 患者におけるカンジダ株の測定は、疾患の治療に役立つだけでなく、口腔カンジダ症の特徴と種プロファイルの評価にも役立ちます。
Protocol
Representative Results
Discussion
現在の原稿では、経口 カンジダ 感染症の検出、 カンジダ 株の同定、およびpSS患者における一般的に使用される薬剤の抗真菌感受性をテストするための一連の体系的で簡単で実行可能な方法を提供します。
実際の設定では、この原稿で紹介されているすべての方法が必要なわけではありません。経口 カンジダ 検出法は、特定の目的に基づいて選択?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
本研究は、中国国家自然科学基金会(82201084)、中国ポスドク科学基金会(2022M722232)、北京ポスドク研究基金会(2023-ZZ-020)、北京天潭病院苗浦プロジェクト(2023MP10)、香港研究助成評議会一般研究基金(27111820および17116521)の支援を受けて行われました。
Materials
| 0.22 µm Syringe Filter | MERCK | SLGV004SL | |
| 1.5 mL Centrifuge Tube | axygen | MCT-150-C-S | |
| 10 cm Microbiological Culture Dishes | Jet Bio-Filtration Co. Ltd | TCD000100 | |
| 15 mL Centrifuge Tube | Jet Bio-Filtration Co., Ltd | CFT011150 | |
| 50 mL Centrifuge Tube | Corning | 430290 | |
| 96-well Microplates | Corning | 3599 | |
| API 0.85% NaCl ampule | BIOMERIEUX | 20070 | |
| Calcofluor White Stain | Sigma-Aldrich | 18909-100ML-F | |
| CHROMagar Candida | CHROMagar | P002860 | Candida diagnostic agar |
| D(+)-Glucose Monohydrate | Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd | 10010518 | |
| Fetal Bovine Serum | Gibco | 26170035 | |
| McFarland Standards Kit | BIOMERIEUX | 70900 | |
| Nunc precision molded loops | ThermoFisher Scientific | 254399 | |
| Phosphate Buffered Saline | Gibco | C10010500BT | |
| Potassium Hydroxide | Aladdin | P112284-500g | |
| PowerSoil DNA Isolation Kit | MO BIO | 12888-50 | |
| RPMI 1640 Medium | Gibco | 11875119 | |
| Sabourand's Agar Medium | Solarbio | S9710 | |
| Yeast Nitrogen Base Without Amino acids | Solarbio | Y8040 | |
| Yeast-like Fungal Susceptibility Kit (Microdilution) | BIOMERIEUX | 14204 |
References
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