JoVE 비디오를 활용하시려면 도서관을 통한 기관 구독이 필요합니다. 전체 비디오를 보시려면 로그인하거나 무료 트라이얼을 시작하세요.
Chapters
- 00:05Title
- 01:07Cell Harvest and Lysis
- 01:55Ni-affinity Purification of Hsp104
- 03:16FPLC Purification of Hsp104
- 05:14Representative Results for Hsp104 Purification and Assessment of Disaggregation Activity
- 07:04Conclusion
Здесь мы опишем протокол для очистки высокоактивной Hsp104, hexameric AAA + белка из дрожжей, которые пары гидролиза АТФ с белком дезагрегации. Эта схема использует His6 с метками построить для аффинной очистки от<em> Е. палочки</em> Затем анионообменной хроматографии, His6-теги удаления с протеазы ТРВ, и гель-хроматографии.
Tags
PurificationHsp104Protein DisaggregaseHexameric AAA+ ProteinATP HydrolysisProtein DisaggregationRenaturationDisordered AggregatesHeat ShockCross-beta Amyloid FibrilsPrionsPhenotypic VariationPreamyloid OligomersE. Coli Orthologue ClpBHsp104 OrthologuesAnimal CellsTherapeutic AgentNeurodegenerative DiseasesMisfolding Of ProteinsToxic Preamyloid OligomersAmyloid Fibrils
