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Monitoramento da ubiquitina-proteassoma Atividade em células vivas Usando um Degron (dgn) desestabilizado Green Fluorescent Protein Protein Repórter (GFP) com base em
 
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Monitoramento da ubiquitina-proteassoma Atividade em células vivas Usando um Degron (dgn) desestabilizado Green Fluorescent Protein Protein Repórter (GFP) com base em

Article DOI: 10.3791/3327-v 10:25 min November 10th, 2012
November 10th, 2012

챕터

요약

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Um método para monitorizar a actividade de ubiquitina-proteassoma nas células vivas é descrito. A degron-GFP-desestabilizado (GFP-dgn) e uma proteína de fusão GFP estável dgnFS-são gerados e transduzidos para a célula utilizando um vector de expressão lentiviral. Esta técnica permite a geração de um estábulo GFP-dgn/GFP-dgnFS linha celular que expressa em que a actividade de ubiquitina-proteassoma podem ser facilmente avaliados utilizando epifluorescência ou citometria de fluxo.

Tags

Biologia Celular Edição 69 Biologia Molecular Medicina Engenharia Biomédica Virologia atividade do proteassoma partículas lentivirais GFP-dgn GFP-dgnFS GFP os fibroblastos humanos diplóides citometria de fluxo vetor plasmídeo
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