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Purificazione della fibrosi cistica regolatore della conduttanza transmembrana proteina espressa in<em> Saccharomyces cerevisiae</em
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
Purification of the Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Protein Expressed in Saccharomyces cerevisiae
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Purificazione della fibrosi cistica regolatore della conduttanza transmembrana proteina espressa in<em> Saccharomyces cerevisiae</em

DOI:
10.3791/51447-v

•

15:12 min

•

May 10, 2014

•

, , ,
1Faculty of Life Sciences,University of Manchester

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:46Solubilization of Microsomes
  • 03:49Nickel-affinity Purification of CFTR
  • 05:33Gel Permeation Chromatography (GPC) Purification of CFTR
  • 06:57Reconstitution of CFTR
  • 07:51Measurement of ATPase Activity
  • 09:35Results: Isolation of Milligram Quantities of CFTR by Two Methods
  • 14:28Conclusion

Summary

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Espressione eterologa e purificazione del regolatore della conduttanza transmembrana della fibrosi cistica (CFTR) sono sfide importanti e fattori limitanti per lo sviluppo di terapie farmacologiche per la fibrosi cistica. Questo protocollo descrive due metodi per l'isolamento di quantitativi milligrammo di CFTR adatti per studi funzionali e strutturali.

Tags

Keywords: Cystic FibrosisCFTR ProteinMembrane Protein PurificationSaccharomyces CerevisiaeDetergent SolubilizationDDMLPG-14ATPase ActivityPost-translational ModificationsStructural Analysis

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