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Purificação da fibrose cística condutância transmembrana Regulador proteína expressa em<em> Saccharomyces cerevisiae</em
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
Purification of the Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Protein Expressed in Saccharomyces cerevisiae
DOI:

15:12 min

May 10, 2014

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:46Solubilization of Microsomes
  • 03:49Nickel-affinity Purification of CFTR
  • 05:33Gel Permeation Chromatography (GPC) Purification of CFTR
  • 06:57Reconstitution of CFTR
  • 07:51Measurement of ATPase Activity
  • 09:35Results: Isolation of Milligram Quantities of CFTR by Two Methods
  • 14:28Conclusion

Summary

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A expressão heteróloga e purificação da fibrose cística reguladora da condutância transmembrana (CFTR) são desafios significativos e fatores limitantes para o desenvolvimento de drogas terapêuticas para a fibrose cística. Este protocolo descreve dois métodos para o isolamento de quantidades de miligrama de CFTR adequados para estudos funcionais e estruturais.

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