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Detektion von Liganden-aktivierte G-Protein gekoppelten Rezeptor-Internalisierung durch konfokale Mikroskopie
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JoVE 신문 생물학
Detection of Ligand-activated G Protein-coupled Receptor Internalization by Confocal Microscopy
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Detektion von Liganden-aktivierte G-Protein gekoppelten Rezeptor-Internalisierung durch konfokale Mikroskopie

DOI:
10.3791/55514-v

•

10:24 min

•

April 09, 2017

•

, , , , ,
1National Engineering Research Center of Marine Facilities Aquaculture, Marine Science College,Zhejiang Ocean University, 2Institute of Biochemistry, College of Life Sciences,Zhejiang University

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:49Cell Seeding
  • 02:05Cell Transfection Method 1 with Liposome Formulations
  • 03:44Cell Culture on Coverslips
  • 04:37Cellular Localization Using Confocal Microscopy
  • 05:47Cellular Internalization
  • 06:42Confocal Microscopy
  • 07:43Results: Gonadotropin Releasing Hormone Receptor Internalization Detection
  • 09:21Conclusion

Summary

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Dieses Protokoll beschreibt Konfokalmikroskopie Nachweis von G-Protein-gekoppelten Rezeptor (GPCR) Internalisierung in Säugerzellen. Es umfasst die Grundzellkultur, Transfektion und Konfokalmikroskopie Verfahren und stellt ein effizientes und leicht interpretierbares Verfahren, die subzelluläre Lokalisierung und Internalisierung von Fusion exprimierten GPCR zu detektieren.

Tags

Keywords: GPCRLigand-activatedInternalizationConfocal MicroscopySubcellular LocalizationReceptor RecyclingHEK293 CellsTransfectionPlasmid DNAReduced Serum MediumReagentDMEMFBS

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