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Un protocole pour la Production de vecteurs LENTIVIRAUX intégrase déficient pour CRISPR/Cas9-mediated Gene Knockout dans les cellules en Division
JoVE 신문
유전학
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JoVE 신문 유전학
A Protocol for the Production of Integrase-deficient Lentiviral Vectors for CRISPR/Cas9-mediated Gene Knockout in Dividing Cells
DOI:

10:42 min

December 12, 2017

,

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:52Transfecting of HEK-293T Cells Using Calcium Phosphate
  • 02:19Harvesting Virus
  • 02:50Concentration of Viral Particles by Ultracentrifugation
  • 05:11Esimating of Viral Titers Using p24-enzyme-linked Immunosorbent Assay
  • 07:31Counting GFP-positive Cells
  • 08:25Results: Production and Validation of the Knockout-efficiency of Integrase-deficient Lentiviral-CRSPER/Cas9 Vector
  • 09:57Conclusion

Summary

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Nous décrivons la stratégie de production de vecteurs LENTIVIRAUX intégrase déficient (IDLVs) comme des véhicules de livraison CRISPR/Cas9 aux cellules. Avec une capacité de médiation rapide et robuste de gène d’édition dans les cellules, IDLVs présentent une plus sûre et plateforme vector tout aussi efficaces pour la livraison de gène par rapport aux vecteurs capables d’intégrase.

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