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用核磁共振 (nmr) 和微尺度热能 (mst) 测量球状和丝状蛋白的相互作用

JoVE 신문
생화학

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JoVE 신문 생화학

Measuring Interactions of Globular and Filamentous Proteins by Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy (NMR) and Microscale Thermophoresis (MST)

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用核磁共振 (nmr) 和微尺度热能 (mst) 测量球状和丝状蛋白的相互作用

DOI:

10.3791/58537-v

•

10:28 min

•

November 02, 2018

•

Graeden Winkelaar, Catharine Trieber, Jitendra Kumar, Michael Overduin

¹Department of Biochemistry,University of Alberta

Chapters

00:04Title
00:24NMR Experimental Setup
04:25NMR Data Processing
05:47NMR Data Analysis
08:13Results: Vimentin 99-249 (VimRod) Binds Wildtype Envoplakin Plakin Repeat Domain (E-PRD) but not Mutant R1914E E-PRD
09:54Conclusion

Summary

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在这里, 我们提出了一个协议, 生产和纯化的蛋白质标记与稳定同位素, 以及随后的表征蛋白质相互作用使用核磁共振 (nmr) 光谱和微尺度热像仪 (mst) 实验。

Tags

Keywords: Protein Interaction NMR Spectroscopy Microscale Thermophoresis MST Atomic-level Interaction Protein Binding Small Molecule Large Molecule Proton NMR SOFAST HMBC Magnetic Field Shimming Receiver Gain Adjustment Automatic Tuning Phase Correction Baseline Correction

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