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Eine neuartige Nicotinamid-Adenin-Dinukleotid-Korrekturmethode zur intrazellulären Ca2+-Messung mit Fura-2-Analog in lebenden Zellen
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JoVE 신문 생물학
A Novel Nicotinamide Adenine Dinucleotide Correction Method for Intracellular Ca2+ Measurement with Fura-2-Analog in Live Cells
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Eine neuartige Nicotinamid-Adenin-Dinukleotid-Korrekturmethode zur intrazellulären Ca2+-Messung mit Fura-2-Analog in lebenden Zellen

DOI:
10.3791/59881-v

•

05:58 min

•

September 20, 2019

•

, , ,
1Department of Physiology,University of Ulsan College of Medicine/Asan Medical Center, 2Asan Medical Center, 3Asan Medical Institute of Convergence Science and Technology

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:41Mitochondrial Fluoroprobe Loading
  • 01:22In Situ Isosbestic Fura-2-FF Point Identification
  • 02:40Background Signal Detection and Cell Area Correction
  • 03:30R Factor Measurement
  • 04:12Results: Representative Intracellular Ca2+ Measurement
  • 05:15Conclusion

Summary

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Aufgrund der spektralen Überlappung der Anregungs- und Emissionswellenlängen von NADH- und Fura-2-Analogen ist die Signalinterferenz beider Chemikalien in lebenden Zellen bei der quantitativen Messung von [Ca2+ ]unvermeidbar. So wurde eine neuartige Online-Korrekturmethode der NADH-Signalinterferenz zur Messung [Ca2+] entwickelt.

Tags

Intracellular Ca2+ MeasurementFura-2-analogNADHIsobestic PointUV Excitable ProbesSignal ContaminationNADH Correction MethodLive Cell ImagingMyocytesSaponinCalcium-free SolutionMulti-parametric Measurement

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