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Microaspiración de células únicas como estrategia alternativa a la clasificación celular activada por fluorescencia para la separación de mezclas de virus gigantes
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JoVE 신문 생물학
Single Cell Micro-aspiration as an Alternative Strategy to Fluorescence-activated Cell Sorting for Giant Virus Mixture Separation
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Microaspiración de células únicas como estrategia alternativa a la clasificación celular activada por fluorescencia para la separación de mezclas de virus gigantes

DOI:
10.3791/60148-v

•

09:50 min

•

October 27, 2019

•

, , , , ,
1Institut Hospitalo-Universitaire (IHU) – Méditerranée Infection, 2Microbes, Evolution, Phylogeny and Infection (MEΦI), Aix-Marseille Université UM63, Institut de Recherche pour le Développement IRD 198,Assistance Publique – Hôpitaux de Marseille (AP-HM)

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:37Amoeba Culture
  • 02:44Propagation of Stock Virus in Amoebae
  • 03:33End-point Dilution and Single Cell Micro-aspiration
  • 06:09PCR Screening
  • 07:06Results: Optimization of the Isolation of Novel Viruses
  • 08:17Conclusion

Summary

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Aquí, describimos un método de microaspiración de una sola célula para la separación de las amebas infectadas. Con el fin de separar subpoblaciones virales en Vermamoeba vermiformis infectados por Faustovirus y virus gigantes desconocidos, desarrollamos el protocolo detallado a continuación y demostramos su capacidad para separar dos nuevos virus gigantes de baja abundancia.

Tags

Keywords: Single Cell Micro-aspirationFluorescence-activated Cell SortingGiant VirusVirus SeparationVirus IsolationTurnover VirusClandisinal VirusUzibati VirusFaustovirusIndirect StrategyInfected HostMolecular BiologyElectronic MicroscopyVermamoeba VermiformisPYG MediumStarvation MediumMultiplicity Of Infection

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