Preparing Lamellae from Vitreous Biological Samples Using a Dual-Beam Scanning Electron Microscope for Cryo-Electron Tomography

Claudine Bisson; Corey W. Hecksel; James B. Gilchrist; M. Alejandra Carbajal; Roland A. Fleck

doi:10.3791/62350

/

Preparación de laminillas a partir de muestras biológicas vítreas utilizando un microscopio electrónico de barrido de doble haz para la criotomografía electrónica

JoVE 신문
생화학

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JoVE 신문 생화학

Preparing Lamellae from Vitreous Biological Samples Using a Dual-Beam Scanning Electron Microscope for Cryo-Electron Tomography

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Preparación de laminillas a partir de muestras biológicas vítreas utilizando un microscopio electrónico de barrido de doble haz para la criotomografía electrónica

DOI:

10.3791/62350-v

•

07:00 min

•

August 05, 2021

•

Claudine Bisson², Corey W. Hecksel⁴, James B. Gilchrist, M. Alejandra Carbajal, Roland A. Fleck

¹Centre for Ultrastructural Imaging,New Hunt’s House, Guy’s Campus, King’s College London, ²Department of Biological Science,Birkbeck College, University of London, ³Electron Bio-Imaging Centre,Diamond Light Source, Harwell Science and Innovation Campus, ⁴SLAC National Accelerator Laboratory,Stanford University

Chapters

00:04Introduction
00:48Screening Plunge Frozen Grids and Preparing for FIB-Milling
01:28On-Grid FIB Milling of Plunge Frozen Cells
04:18Results: Analysis of Cryo-ET Data from FIB-Milled Lamella
06:28Conclusion

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Uso de molienda de haz de iones enfocado para producir láminas vítreas en la rejilla a partir de muestras biológicas congeladas por inmersión para tomografía crioelectrónica.

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