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Composizione di misurazione del complesso di segnalazione che induce la morte CD95 ed elaborazione della procaspasi-8 in questo complesso
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
Measuring Composition of CD95 Death-Inducing Signaling Complex and Processing of Procaspase-8 in this Complex
DOI:

07:17 min

August 02, 2021

,

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:44Preparing Cells and CD95L Stimulation
  • 01:11Cell Harvest and Lysis
  • 02:29Immunoprecipitation
  • 03:28Western Blot
  • 04:21Western Blot Detection
  • 05:05Analysis of CD95 DISC Formation in HeLa-CD95 cells, c-FLIPL-overexpressing HeLa-CD95 cells, and Primary T Cells
  • 06:25Conclusion

Summary

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Qui viene presentato un flusso di lavoro sperimentale che consente il rilevamento dell'elaborazione della caspasi-8 direttamente nel complesso di segnalazione che induce la morte (DISC) e determina la composizione di questo complesso. Questa metodologia ha ampie applicazioni, dallo svelamento dei meccanismi molecolari delle vie di morte cellulare alla modellazione dinamica delle reti di apoptosi.

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