Summary

ביות של תאים hematopoietic אל מח העצם

Published: March 18, 2009
doi:

Summary

מאמר זה מתאר פרוטוקול המשמש ללימוד ביות של תאים hematopoietic אל נישות שלהם במח העצם.

Abstract

ביות היא תופעה לפיה התאים המושתלים hematopoietic מסוגלים לנסוע ו נקלטים או להקים מגורים במח העצם. Chemomkines שונים הקולטנים מעורבים ביות של בתאי גזע hematopoietic. [1, 2]

מאמר זה מתאר את פרוטוקול ביות הקלאסי שימוש במחקרים hematopoietic תא גזע. בדרך כלל זה כרוך לבודד את האוכלוסייה תא אשר הצרכים ביות להיחקר, מכתים אוכלוסייה זו עם צבע עניין הזרקת תאים אלה לתוך זרם הדם של חיה הנמען. החיה הנמען הקריב אז בזמן שנקבע מראש לאחר ההזרקה ואת מח העצם הערכה באחוז או מספר מוחלט של תאים אשר חיובי צבע של עניין. באחת תוכניות ניסיוניות הנפוצות ביותר, את היעילות ביות של תאים hematopoietic משתי חיות שונות גנטית (סוג חיה פרועה החוצה עקום המקביל) מושווה. מאמר זה מתאר את פרוטוקול תא hematopoietic ביות במסגרת כגון הניסוי.

Protocol

אנחנו מתחילים את הניסוי ביות על ידי מיצוי תאים שישמשו בניסוי. לצורך ניסוי זה הנוכחי אנו מעוניינים לגלות אם הביות של מוח העצם שלמה הגומחות בתוך העצמות הארוכות של חיות הנמען הוא שונה עבור תאים במח העצם המופק חיות WT כגון C57BL/6J (WT) לבין אלה מהונדס knockouts עבור קו?…

Discussion

ביות הוא תהליך שבו תאים במח העצם, כולל בתאי גזע, תאים ובתאים הבדיל, דרכם לתוך מח העצם, לאחר שהוחדר לתוך זרם הדם או מח עצם של עכברים חלל. כאשר ברור מן ההגדרה, מדען יכול לבחור ללמוד את הביות של בתאי גזע hematopoietic, ובתאים או תאים מובחנים שזוהו על ידי immunophenotyping ומבודדים על ידי מ?…

Acknowledgements

פרוטוקול זה נבדק אופטימיזציה במעבדה של ד"ר דוד Scadden. המימון ניתן על ידי מכון הסרטן דנה פרבר / החולים הכללי במסצ'וסטס קלינית להמטולוגיה ואונקולוגיה תוכנית עמיתי.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
DPBS (Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline   Mediatech, Inc 21-031-CV  
Sterile Fetal Bovine Serum   Valley Biomedical, Inc BS3033  
0.5M EDTA (pH 8.0)   Boston BioProducts BM-150  
Tryphan Blue solution   Mediatech, Inc 25-900-CI  
ACK Lysing Buffer   Lonza 10-548E  
Isopropranolol U.S.P.   Denison Pharmaceuticals, Inc    
Vybrant DiD cell-labelling solution   Invitrogen V22887  
Vybrant DiI cell-labelling solution   Invitrogen V22885  

Referências

  1. Adams, G. B., et al. Stem cell engraftment at the endosteal niche is specified by the calcium-sensing receptor. Nature. 439 (7076), 599-603 (2006).
  2. Broxmeyer, H. E. Chemokines in hematopoiesis. Curr Opin Hematol. 15 (1), 49-58 (2008).
check_url/pt/1104?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
Yusuf, R. Z., Scadden, D. T. Homing of Hematopoietic Cells to the Bone Marrow. J. Vis. Exp. (25), e1104, doi:10.3791/1104 (2009).

View Video