ذبابة الفاكهة اليرقات NMJ المناعية
Summary
هذا البروتوكول يوضح كيفية تنفيذ المناعية على يرقة ذبابة الفاكهة تشريح.
Abstract
و<em> ذبابة الفاكهة</em> الوصل العصبي العضلي (NMJ) هو نظام يستخدم نموذج المتبع لدراسة تطوير واللدونة متشابك. استخدام على نطاق واسع<em> ذبابة الفاكهة</em> محرك النظام هو نتيجة لسهولة الوصول إليها عالية. ويمكن تحليل ذلك مع قرار وحيد الخلية. هناك 30 في عضلات hemisegment الذين الترتيب داخل جدار الجسم هامشية معروفة. مجموعه من الخلايا العصبية الحركية 31 نعلق على هذه العضلات في النمط الذي الدقة العالية. استخدام البيولوجيا الجزيئية وعلم الوراثة ، ويمكن للمرء أن خلق حيوانات معدلة وراثيا أو المسوخ. ثم ، يمكن للمرء أن دراسة الآثار التنموية على التشكل وظيفة NMJ. ويمكن استخدام المناعية لصورة واضحة لعناصر NMJ. في هذه المقالة ، ونحن لشرح كيفية استخدام تلوين الأجسام المضادة لتصور<em> ذبابة الفاكهة</em> NMJ اليرقات.
Protocol
Discussion
المناعية (IHC) أمر حيوي لدراسة البيولوجيا NMJ لأنه يمكن تصور من NMJ. ويتم إنجاز هذا باستخدام الأجسام المضادة التي تعترف غشاء الخلايا العصبية (على سبيل المثال ، HRP) ، وpresynapse (على سبيل المثال ، CSP ، SYT) ، و / أو postsynapse (على سبيل المثال ، DLG). ويمكن أيضا الإشارة الجزيئات والبروتينات …
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Stereomicroscope “Stemi” 2000 | Carl Zeiss MicroImaging Inc. | 495101-9804-000 | ||
| Light Source KL 1500 LCD | Carl Zeiss MicroImaging Inc. | 000000-1063-181 | ||
| Dumont SS Forceps | Fine Science Tools Inc. | 11200-33 | ||
| Dumont #5 Forceps | Fine Science Tools Inc. | 11252-20 | ||
| Adams™ Nutator Mixer | Becton, Dickinson and Company | 421105 | ||
| No.1 Precision knife | X-Acto | 3201 | ||
| No. 16 Blades | X-Acto | 216 | ||
| ProLong Gold Antifade reagent | Invitrogen Corporation | 36930 |
Referências
- Jan, L. Y., Jan, Y. N. Properties of the larval neuromuscular junction in Drosophila Melanogaster. J. Physiol. 262, 189-214 (1976).
- Johansen, J., Halpern, M. E., Johansen, K. M., Keshishian, H. Stereotypic morphology of glutamatergic synapses on identified muscle cells of Drosophila larvae. J Neurosci. 9, 710-725 (1989).
- Kesheshian, H., Broadie, K., Chiba, A., Bate, M. The Drosophila neuromuscular junction: a model system for studying synaptic development and function. Annu Rev Neurosci. 19, 545-575 (1996).
- Collins, C. A., DiAntonio, A. Synaptic development: insights from Drosophila. Curr Opin Neurobiol. 17 (1), 35-42 (2007).
