Overview
Это видео описывает один метод, чтобы построить муху аспиратор, который может быть использован для передачи насекомых между корпусами без анестезии. Аспиратор в примере протокола был подготовлен для эксперимента по количественной оценке поведения индивидуального ухода
Protocol
Этот протокол является выдержкой из Barradale и др.,Количественная оценка Дрозофила Уход Поведение, J. Vis. Exp. (2017).
-
Подготовь аспиратор для перемещения живой Дрозофилы из культурного флакона в камеру ухода. Аспираторы позволяют передавать сознательных животных в поведенческие камеры, чтобы анестезия не влиять на последующее поведенческое наблюдение.
- С помощью ножниц вырезать 1,5 футов tygon трубки ID 1/8", OD 1/4 ". Отрежьте по крайней мере 1 дюйм от кончика 1 мл одноразовый наконечник микропипетта. Держите 1 см квадратный кусок сетки (открытие 0,196 дюйма) над разрезом кончика.
ПРИМЕЧАНИЕ: Большинство 1mL советы имеют градацию линии, где кончик сидит в пакете поле, как правило, сократить до этой линии. - Плотно поместите свежий 1 мл micropipette отзыв над сеткой / вырезать отзыв. Наблюдайте, как сетка формирует плотный барьер между двумя наконечниками. Внутри нового наконечника создается камера для хок.
- Вырежьте крайнюю кончик нового наконечника микропайпета, чтобы расширить отверстие достаточно, чтобы позволить прохождение одной мухи. Отверстие будет примерно соответствовать открытию камеры для ухода (примерно 1,5-2 мм в диаметре).
- Плотно подходят вложенные советы на конце трубки tygon. Нажмите кончики в трубку, чтобы обеспечить плотную форму, чтобы обеспечить вакуумное давление.
- На другом конце трубки, вырезать кончик 200 йл микропайпетт кончик и подходят узкий конец разреза в трубы. Это "рот" стороны аспиратора.
- С помощью ножниц вырезать 1,5 футов tygon трубки ID 1/8", OD 1/4 ". Отрежьте по крайней мере 1 дюйм от кончика 1 мл одноразовый наконечник микропипетта. Держите 1 см квадратный кусок сетки (открытие 0,196 дюйма) над разрезом кончика.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
High-Flex Tygon PVC Clear Tubing | McMaster-Carr | 5229K54 | ID 1/8", OD 1/4", used with micropipettor tips and mesh to construct mouth aspirators |
Micropipette tips (1 mL and 200 μL) | Genesee Scientific | 24-165, 24-150R | |
Nylon Mesh Screen, 2 x 2.6" | McMaster-Carr | 9318T44 | Used to construct grooming chamber and mouth aspirators |