Fly Aspirator Tube: Ett enkelt verktyg för att överföra live Drosophila

Overview

Denna video beskriver en metod för att bygga en flugaspirator, som kan användas för att överföra insekter mellan kapslingar utan anestesi. Aspiratorn i exempelprotokollet förbereddes för ett experiment för att kvantifiera enskilda groomingbeteenden

Protocol

Detta protokoll är ett utdrag från Barradale et al., Quantification of Drosophila Grooming Behavior, J. Vis. Exp. (2017).

1. Förbered en aspirator för att flytta levande Drosophila från en kulturflaska till groomingkammaren. Aspiratorer tillåter överföring av medvetna djur till beteendekamrarna för att säkerställa att anestesi inte påverkar efterföljande beteendeobservation.
   1. Använd saxskuren 1,5 fot tygonslang ID 1/8", OD 1/4". Skär minst 1 tum av spetsen på en 1 ml engångsmikropipettspets. Håll en 1 cm fyrkantig nätbit (öppning 0,196 tum) över skärspetsen.
      OBS: De flesta 1mL-tips har en graderingslinje där spetsen sitter i paketlådan, vanligtvis klipp till den linjen.
   2. Placera snyggt en fräsch 1 ml mikropipettspets över nätet/skärspetsen. Observera att nätet bildar en tät barriär mellan de två spetsarna. Insidan av den nya spetsen skapar en hållkammare för flugor.
   3. Kapa den nya mikropipettespetsens extrema spets för att bredda öppningen tillräckligt för att möjliggöra passage av en enda fluga. Hålet matchar grovt groomingkammarens öppning (ca 1,5-2 mm i diameter).
   4. Passa tätt de kapslade spetsarna på änden av tygonslangen. Tryck in spetsarna i röret för att säkerställa en snäv passform för att möjliggöra vakuumtryck.
   5. I andra änden av slangen skär du spetsen på en 200 μL mikropipettespets och monterar den smala skurna änden i slangen. Detta är "mun" sidan av aspiratorn.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
High-Flex Tygon PVC Clear Tubing	McMaster-Carr	5229K54	ID 1/8", OD 1/4", used with micropipettor tips and mesh to construct mouth aspirators
Micropipette tips (1 mL and 200 μL)	Genesee Scientific	24-165, 24-150R
Nylon Mesh Screen, 2 x 2.6"	McMaster-Carr	9318T44	Used to construct grooming chamber and mouth aspirators