生体力学とMechanobiological研究ラット尾腱の準備
Summary
この記事では、生体力学とmechanobiological研究のためにラット尾腱を調製するのに使用される実験手順を説明します。準備の主要なステップのいくつかの機能は、すすぎとバイオリアクターチャンバーにロードし、抽出、断面積の測定をはじめ、実証されています。
Abstract
ラット尾腱（ラウンドトリップ時間）は、腱生理学と腱の分野でのin vitro研究で実験に使用される一般的な生物学的なモデルです。これらの組織での作業は、彼らは非常に壊れやすいので、挑戦、そして今まではその分離には厳密に詳細なプロトコルはなかったさ。
これらの課題に直面し、我々は、ラウンドトリップ時間と制御の組織の生存性、無菌性と整合性の操作を容易にするための方法と手段を開発している。この記事では、生体力学とmechanobiological研究のためのRTTを準備するために使用される実験手順を説明します。バイオリアクターチャンバーに洗浄し、ロード、抽出、断面積の測定：私たちの仕事は主に4つのステップに分かれています。
それらは簡単に再現できるように、各ステップで、すべての手順、材料や操作を詳細に表示されます。また、開発された特定の楽器が紹介されています：RTTのを分離するために使用される操作板は、断面積の測定や、アンカーのシステムの間に組織を配置する光学マイクロメータは、バイオリアクターへのRTTを添付すること。
最後に、我々は我々の方法を検証するために複数のテスト後に得られた結果を説明します。実行可能性、滅菌性および完全性の評価は、私たちの手続きは、このようなラット尾腱のような脆弱な組織の操作のための十分に厳格であることを示している。
Protocol
Discussion
これらの実験手順を適用することにより、我々は組織のこの種のin vitro試験での多種多様を行うことができます。例として、組織の変性に関する研究は10日間の期間のためのラウンドトリップ時間に下の刺激のアプリケーションによって行われました。毎日、我々は非破壊応力緩和試験では組織の機械的特性を評価した。終わりに、我々は、RTT応力変化を観察するため、機械的性…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この記事は、NSERCグラント＃299280、M.シールに学部学生研究賞としてG.の親とFRSQへの奨学金としてIRSSTによってサポートされていました。我々はビデオに記録された操作を実行するためのYoanレミュー- Lanevilleに感謝。
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| D-PBS | Reagent | Wisent inc. | 311-410-CL | Saline solution |
| Glucose | Reagent | Wisent inc. | 609-037-EL | Saline solution
1g/L |
| Antibiotics-antimycotics | Reagent | Invitrogen Corp. | 15240-062 | Saline solution
1% |
| DMEM | Reagent | Invitrogen Corp. | 12800-017 | Culture solution |
| Sodium Bicarbonate | Reagent | Wisent inc. | 600-105-CG | Culture solution 3.7g/L |
| FBS | Reagent | Wisent inc. | 090150 | Culture solution 10% |
| Antibiotics-antimycotics | Reagent | Invitrogen Corp. | 15240-062 | Culture solution 1% |
| Optic Micrometer | Tool | Custom-made | ||
| Manipulation plate | Tool | Custom-made | ||
| Bioreactor chamber | Tool | Custom-made |
Referências
- Bennett, M. B., Ker, R., Dimery, N., Alexander, R. Mechanical properties of various mammalian tendons. J. Zool. Lond. A209, 537-548 (1986).
- Dupuis, D. . Déshydratation de matrices collagéniques reconstruites in vitro: effets sur les propriétés mécaniques et histologiques [dissertation]. , 114-114 (1981).
- Haut, R. C. Age-dependent influence of strain rate on the tensile failure of rat tail tendon. Journal of Biomechanical Engineering. 105, 296-299 (1983).
- Huppé, N., Lessard, J. -. L., Langelier, E. A Bioreactor Design for the Mechanobiological Study of Soft Tissue Damage and Repair in Conditions that Provide the Best Approximation of Actual Use. , (1985).
- Langelier, E., Dupuis, D., Guillot, M., Goulet, F. &. a. m. p. ;. a. m. p., Rancourt, D. Cross-sectional profiles and volume reconstructions of soft tissues using laser beam measurements. J Biomech Eng. 126, 796-802 (2004).
- Lee, T. Q., Woo, S. L. -. Y. A new method for determining cross-sectional shape and area of soft tissues. J Biomech Eng. 110, 110-114 (1988).
- Parent, G., Cyr, M., Cousineau-Pelletier, P., Desbiens-Blais, F. &. a. m. p. ;. a. m. p., Langelier, E. Current Techniques for the Evaluation of Cross-Sectional Area in Rat Tail Tendons Generate Significant Errors. , (1985).
