Biomechanical 및 Mechanobiological 연구 랫 타일 힘줄의 준비
Summary
이 문서 biomechanical 및 mechanobiological 연구 쥐의 꼬리 힘줄을 준비하는 데 사용되는 실험 절차를 설명합니다. 준비의 주요 단계 몇 가지 기능은 rinsing 및 생물 반응기 챔버로 로딩, 추출, 단면적 측정으로 시작, 시연하고 있습니다.
Abstract
쥐 꼬리 힘줄 (RTTs)은 힘줄 생리학과 tendinopathy의 분야에서 체외 연구에서 실험에 사용되는 일반적인 생물 학적 모델입니다. 그 조직과 함께 일하는 것은 그들이 매우 연약하기 때문에 도전하고, 지금까지 자신의 격리에 대한 엄격한 세부 프로토콜이 없었다합니다.
이러한 도전에 직면하여, 우리는 RTTs 및 제어 조직 생존, 불임과 정직의 조작을 용이하게하는 방법과 악기를 개발했습니다. 이 문서 biomechanical 및 mechanobiological 연구 RTTs를 준비하는 데 사용되는 실험 절차를 설명합니다. 추출, 단면적 측정이 rinsing 및 생물 반응기 챔버로 로딩 : 우리 작품은 네 가지 주요 단계로 나뉘어져 있습니다.
그들이 쉽게 복제 수 있도록 각 단계에서 모든 절차, 자료 및 조작이 상세하게 제공됩니다. 또한 개발, 특정 악기 소개하는 부분이있다 : RTTs를 분리하는 데 사용되는 조작 판은 단면적 측정 및 고정 시스템 동안 조직을 위치 광학 마이크로 미터는 생물 반응기에 RTTs를 첨부합니다.
마지막으로, 우리는 방법의 유효성을 검사하기 위해 여러 검사 후 얻은 결과를 설명합니다. 생존, 불임 및 무결성 평가는 우리와 같은 절차가 쥐의 꼬리 힘줄과 같은 연약한 조직의 조작에 대해 충분히 엄격한 것을 보여줍니다.
Protocol
Discussion
이러한 실험 절차를 적용하여, 우리는 조직의 종류에 체외 연구에서 다양한 수행할 수 있습니다. 예를 들어 마찬가지로, 조직 변성에 대한 연구는 십일 동안 RTTs에 밑을 자극의 응용 프로그램에 의해 실시되었다. 매일, 우리는 비파괴 응력 완화 시험에서 조직 기계적 특성을 평가했다. 끝에, 우리는 RTT 스트레스 변화를 관찰하기 때문에 기계적 성질의 진행을 분석할 수 있었다.
<p class="jov…Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 문서는 M. 씨흐에 학부 학생 연구 보너스로 G.의 부모와 FRSQ하는 장학금으로 NSERC 부여 # 299280, IRSST에 의해 지원되었다. 우리는 비디오 기록 조작을 수행하기위한 Yoan 르뮤 – Laneville 감사합니다.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| D-PBS | Reagent | Wisent inc. | 311-410-CL | Saline solution |
| Glucose | Reagent | Wisent inc. | 609-037-EL | Saline solution
1g/L |
| Antibiotics-antimycotics | Reagent | Invitrogen Corp. | 15240-062 | Saline solution
1% |
| DMEM | Reagent | Invitrogen Corp. | 12800-017 | Culture solution |
| Sodium Bicarbonate | Reagent | Wisent inc. | 600-105-CG | Culture solution 3.7g/L |
| FBS | Reagent | Wisent inc. | 090150 | Culture solution 10% |
| Antibiotics-antimycotics | Reagent | Invitrogen Corp. | 15240-062 | Culture solution 1% |
| Optic Micrometer | Tool | Custom-made | ||
| Manipulation plate | Tool | Custom-made | ||
| Bioreactor chamber | Tool | Custom-made |
Referências
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