Поддержание Wolbachia в бесклеточных среднего

Summary

Это видео описывает способ очистки Wolbachia pipientis из клеточной линии Anopheles gambiae, а затем культивирования эндосимбионта в бесклеточной среде. Тест для жизнеспособности бактерии продемонстрировал.

Abstract

В этом видео-протокол, процедуры показаны на (1) очищают Wolbachia симбионтов из культивируемых клеток комаров, (2) использования флуоресцентного анализа выяснить жизнеспособность очищенной Wolbachia и (3) поддерживать сейчас внеклеточной Wolbachia в клеточной среде без . Очищенная Wolbachia остаться в живых во внеклеточной фазе, но не размножаются, пока снова инокулировали в эукариотических клетках. Внеклеточный Wolbachia очищенная таким образом, будут оставаться жизнеспособными в течение по крайней мере неделю при комнатной температуре, а возможно и больше. Очищенная Wolbachia подходят для микро-инъекции, выделения ДНК и других приложений.