מאמר זה מתאר את תרבות פרוסות הרקמה החולה למסירה מחקרים גנים ניתוח בדיעבד של התבטאות גנים באמצעות דימות IVIS פליטת אור.
Abstract
וידאו זה מתאר את השימוש של רקמה חולה כמודל vivo לשעבר לחקר משלוח גן. הרקמה החולה טריים שהושגו בזמן הניתוח הוא פרוס ומתוחזק בתרבות. מערכת מודל לשעבר vivo מאפשר משלוח פיזי של גנים לתוך הרקמה החולה שלם ביטוי גנים מנותח על ידי פליטת אור הדמיה באמצעות מערכת זיהוי IVIS. מערכת זיהוי bioluminescent מדגים כימות מהיר ומדויק של ביטוי גנים בתוך פרוסות בודדות ללא צורך להקריב רקמות. רקמה זו פרוסה מערכת התרבות ניתן להשתמש במגוון של סוגי רקמות כולל הרקמות וממאירים ומאפשרת לנו לחקור את ההשפעות של אופי הטרוגני של רקמות שלמות ועל רמה גבוהה של השונות בין חולים בודדים. מערכת זו יכולה לשמש מודל במצבים מסוימים כחלופה במודלים של בעלי חיים וכן במצב קליני משלימים לפני הכניסה לניסוי קליני.
Protocol
הכנת מדיה ריאגנטים אנטיביוטי פתרון שנאגרו מלוחים פוספט (PBS) עם 200 U / ml פניצילין, 200 מיקרוגרם / מ"ל סטרפטומיצין, 5 מיקרוגרם / מ"ל fungizone איסוף וטיפול בינוני Dulbe…
Discussion
אנו מתארים vivo לשעבר החולה רקמות תרבות שיטה ומערכת זיהוי bioluminescent להערכת משלוח הגן בתוך הרקמה הלא קבוע האנושי. השיטה מציעה דרך פשוטה לשחזור של פרוסות הרקמה culturing. יש לו פוטנציאל משמעותי שכן היא מאפשרת את לימוד משלוח הגן לתוך רקמה אנושית שלם, ניתוח ואספקה הגן לתו…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
עבודה זו מומנה דרך קורק בדרום מרפאת קופת ויקטוריה אוניברסיטת השד בבית החולים, האגודה למלחמה בסרטן אירי (CRI07TAN) לבין סרטן קורק מרכז המחקר. פסול שכפול רקומביננטי adenovirus 5 חלקיקים בשליטת תעתיק של האמרגן CMV הייתה מתנה סוג של פרופ 'אנדרו בייקר, מאוניברסיטת גלזגו.
Rajendran, S., Salwa, S., Gao, X., Tabirca, S., O’Hanlon, D., O’Sullivan, G. C., Tangney, M. Ex Vivo Culture of Patient Tissue & Examination of Gene Delivery. J. Vis. Exp. (46), e2378, doi:10.3791/2378 (2010).