脊髓电二：外吸电极的制作
Summary
外吸用来衡量新生儿啮齿类动物脊髓的电生理记录电极的制造和使用示范<em>在体外</em
Abstract
使用新生儿啮齿类动物脊髓中枢模式发生器（CPG）的行为，可以研究神经设计电路和运动的发展。我们证明的方法来制造吸电极，用于检查中央人民政府的活动，或虚构的运动，在解剖啮齿类动物脊髓。被放置在人工脑脊液中的啮齿类动物脊髓和腹侧根绘制成吸电极。通过修改一个市售的吸电极的电极构造。较重的银线，是用来代替市售电极的标准线。为提高耐久性的塑料提示取代商业电极的玻璃尖。我们准备了手工绘制的电极和电极特定大小的管，允许的一致性和可重复性。数据收集，使用的放大器和neurogram数据采集软件。录音内执行一个法拉第笼，以防止机械和电气干扰，分别对空气表。
Protocol
隔离脊髓电生理记录可以揭示遗传和发育的变化的神经电路1。以前，我们表现出一个方法来解剖新生小鼠脊髓2。在这里，我们现在准备吸电极记录在孤立的 3个脊髓虚构运动有用的方法。 塑料管电极的尖端，可以得出一个手工非常精细的提示使用低温酒精灯3-5。塑料管材（PE90，粘土亚当斯Intramedic TM）举行了火焰软化成可塑性形式的?…
Discussion
可以研究使用孤立的啮齿类动物脊髓神经系统的发育。在神经递质的存在，虚构的运动可以产生脊髓在图案的电气活动 1,3形式。这些节奏的阵阵生产0.2〜0.5 Hz时，在左，右和屈，伸交替图案。在不同的发展阶段，这项活动的稳定性和模式有所不同1。基因突变，也可以扰乱了这一活动的 3,5,7的图案。这项活动的转基因和发育的研究提供了组织的中枢模式产生电路的见解和?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
塞缪尔百福是在索尔克生物研究所的基因表达实验室教授和霍华德休斯医学研究所研究员。这项工作是由克里斯托弗和Dana里夫基金会的支持。乔Belcovson，肯特Schnoeker和迈克沙利文在索尔克研究所的多媒体资源提供援助，摄影和剪辑。
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| PTFE Sub Lite Wall Tubing (Small tubing) | Zeus | 36AWG | 0.005”ID x 0.003” Wall (Small Parts) Also available in 0.003” to 0.006” | |
| Large tubing (0.86mm (0.34”)) | Clay Adams Brand Intramedic Becton Dickinson and Company | 427420 | 0.86mm (0.34”) O.D. 1.27mm (.050”) | |
| Electrode Barrel | A-M Systems | 573000 | ||
| Adhesive | JB Weld | |||
| Adhesive: Silicone caulk | ||||
| Solder and soldering iron | ||||
| Bleach | ||||
| Xylene | ||||
| Silver wire: 0.010” | A-M Systems | |||
| Insect pins: Austerlitz 0.1mm | Fine Science Tools | 26002-10 | ||
| Magnetic Stand | Narishige | GJ-8 | ||
| Micromanipulator | Narishige | MN 151 | ||
| Miniboard (Headstage) | Grass Industries | F-15EB/B1 | ||
| Polyview Adaptor Unit | Grass Industries | PVA 8 | ||
| Bipolar Portable Physiodata Amplifier System | Grass Industries | 15LT | ||
| ANALOG TO DIGITAL CARD | National Instruments | 6035E | ||
| Air Table; Vibraplane | Kinetic Systems |
Referências
- Gallarda, B. W., Sharpee, T. O., Pfaff, S. L., Alaynick, W. A. Defining rhythmic locomotor burst patterns using a continuous wavelet transform. Ann N Y Acad Sci. 1198, 133-139 (2010).
- Meyer, A., Gallarda, B. W., Pfaff, S., Alaynick, W. Spinal cord electrophysiology. J Vis Exp. , (2010).
- Gallarda, B. W. Segregation of axial motor and sensory pathways via heterotypic trans-axonal signaling. Science. 320, 233-236 (2008).
- Landmesser, L. The development of motor projection patterns in the chick hind limb. J Physiol. 284, 391-414 (1978).
- Myers, C. P. Cholinergic input is required during embryonic development to mediate proper assembly of spinal locomotor circuits. Neuron. 46, 37-49 (2005).
- Chanin, M. The determination of chloride by use of the silver-silver chloride electrode. Science. 119, 323-324 (1954).
- Goulding, M. Circuits controlling vertebrate locomotion: moving in a new direction. Nat Rev Neurosci. 10, 507-518 (2009).
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Citar este artigo
Garudadri, S., Gallarda, B., Pfaff, S., Alaynick, W. Spinal Cord Electrophysiology II: Extracellular Suction Electrode Fabrication. J. Vis. Exp. (48), e2580, doi:10.3791/2580 (2011).