Omurilik Elektrofizyoloji II: Ekstrasellüler Emiş Elektrot İmalatı
Summary
Yenidoğan kemirgen omurilik elektrofizyolojik kayıtlar ölçmek için kullanılan ekstraselüler emme elektrot üretimi ve kullanımı bir gösteri<em> In vitro</em
Abstract
Nöral devrelerin ve hareket gelişimi, yenidoğan kemirgen omurilik merkezi desen üreteci (CPG) davranışını kullanarak incelenebilir. Biz disseke kemirgen omurilik, emme, CPG aktivitesinin incelemek için kullanılan elektrotlar, ya da kurgusal lokomosyon imal etmek için bir yöntem ortaya koymaktadır. Kemirgen omurilik yapay beyin omurilik sıvısı konur ve ventral kökleri emme elektrot içine çekilir. Elektrot, piyasada yaygın olarak bulunan emme elektrot değiştirerek inşa edilmiştir. Ağır bir gümüş tel, piyasada bulunan elektrot tarafından verilen standart tel yerine kullanılır. Ticari elektrot cam ucu artan dayanıklılık için plastik bir ucu ile değiştirilir. Biz tutarlılık ve tekrarlanabilirlik sağlayan boru belirli boyutlarda yapılan elle çizilmiş elektrotlar ve elektrot hazırlar. Veri, bir amplifikatör ve neurogram kazanım yazılım kullanarak toplanır. Sırasıyla, mekanik ve elektrik girişimi önlemek için Kayıtlar Faraday kafesi içinde bir hava tablo yapılır.
Protocol
Discussion
Sinir sistemi geliştirme izole kemirgen omurilik kullanarak incelenebilir. Nörotransmitter varlığı, kurgusal lokomosyon desenli elektriksel aktivite 1,3 şeklinde spinal kord oluşturulabilir. Bu ritmik patlamaları 0,2 – 0,5 Hz üretilir ve sol-sağ ve fleksör ekstansör ardalanmasından desenli. Farklı gelişim aşamalarında, bu faaliyetin sağlamlık ve desenler 1 değişir. Genetik mutasyonlar da bu etkinliği 3,5,7 desenlendirme rahatsız. Bu faaliyetin Transgenik ve gelişi…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Samuel L. Pfaff Salk Biyolojik Araştırmalar Enstitüsü Gen İfadesi Laboratuvarlarında Profesör ve Howard Hughes Tıp Enstitüsü bir Araştırmacı. Bu çalışma, Christopher ve Dana Reeve Vakfı tarafından desteklenmiştir. Joe Belcovson, Kent Schnoeker Multimedya Kaynakları ve Salk Enstitüsü'nden Mike Sullivan, fotoğraf ve düzenleme ile ilgili yardım sağladı.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| PTFE Sub Lite Wall Tubing (Small tubing) | Zeus | 36AWG | 0.005”ID x 0.003” Wall (Small Parts) Also available in 0.003” to 0.006” | |
| Large tubing (0.86mm (0.34”)) | Clay Adams Brand Intramedic Becton Dickinson and Company | 427420 | 0.86mm (0.34”) O.D. 1.27mm (.050”) | |
| Electrode Barrel | A-M Systems | 573000 | ||
| Adhesive | JB Weld | |||
| Adhesive: Silicone caulk | ||||
| Solder and soldering iron | ||||
| Bleach | ||||
| Xylene | ||||
| Silver wire: 0.010” | A-M Systems | |||
| Insect pins: Austerlitz 0.1mm | Fine Science Tools | 26002-10 | ||
| Magnetic Stand | Narishige | GJ-8 | ||
| Micromanipulator | Narishige | MN 151 | ||
| Miniboard (Headstage) | Grass Industries | F-15EB/B1 | ||
| Polyview Adaptor Unit | Grass Industries | PVA 8 | ||
| Bipolar Portable Physiodata Amplifier System | Grass Industries | 15LT | ||
| ANALOG TO DIGITAL CARD | National Instruments | 6035E | ||
| Air Table; Vibraplane | Kinetic Systems |
Referências
- Gallarda, B. W., Sharpee, T. O., Pfaff, S. L., Alaynick, W. A. Defining rhythmic locomotor burst patterns using a continuous wavelet transform. Ann N Y Acad Sci. 1198, 133-139 (2010).
- Meyer, A., Gallarda, B. W., Pfaff, S., Alaynick, W. Spinal cord electrophysiology. J Vis Exp. , (2010).
- Gallarda, B. W. Segregation of axial motor and sensory pathways via heterotypic trans-axonal signaling. Science. 320, 233-236 (2008).
- Landmesser, L. The development of motor projection patterns in the chick hind limb. J Physiol. 284, 391-414 (1978).
- Myers, C. P. Cholinergic input is required during embryonic development to mediate proper assembly of spinal locomotor circuits. Neuron. 46, 37-49 (2005).
- Chanin, M. The determination of chloride by use of the silver-silver chloride electrode. Science. 119, 323-324 (1954).
- Goulding, M. Circuits controlling vertebrate locomotion: moving in a new direction. Nat Rev Neurosci. 10, 507-518 (2009).
