脊髄電気生理学II：細胞外吸引電極の作製
Summary
新生児げっ歯類の脊髄の電気生理学的記録を測定するために使用される細胞外吸引電極の製造と使用のデモンストレーション<em> in vitroで</em
Abstract
神経回路をと運動の発展は、新生児げっ歯類の脊髄中枢パターン発生器（CPG）の動作を用いて研究することができます。我々は解剖さ齧歯類の脊髄では、CPGの活動を調べるために使用される吸引電極を作製する方法、または虚構の運動を示しています。齧歯類の脊髄は、人工脳脊髄液に配置され、腹根を吸引電極に描かれています。電極は、市販の吸引電極を変更することによって構成される。重い銀線は、市販の電極によって与えられた標準的なワイヤーの代わりに使用されます。商業用電極上にガラスチップは耐久性を高めるためのプラスチックの先端に置き換えられます。私たちは、一貫性と再現性を可能にする、チューブの特定のサイズで作られた手描きの電極と電極を準備する。データは、アンプと神経像集録ソフトウェアを使用して収集されます。録音は、それぞれ、機械的および電気的干渉を防ぐために、ファラデーケージ内の空気のテーブル上で実行されます。
Protocol
Discussion
神経系の発達は、単離されたげっ歯類の脊髄を用いて研究することができます。神経伝達物質の存在下では、架空の運動は、パターニングされた電気的活動1,3の形で脊髄から生成することができます。これらのリズミカルなバーストは0.2から0.5 Hzで生産され、左、右と屈筋、伸筋交替にパターニングされています。異なる発達段階で、この活動の頑健性やパターンが1変化す?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
サミュエルL. Pfaffさんは、ソーク生物学研究所での遺伝子発現の研究室の教授、ハワードヒューズ医学研究所の研究者でもある。この作品は、クリフトファーリーブ麻痺財団によってサポートされていました。ジョーBelcovson、ソーク研究所のマルチメディアリソースのケントSchnoekerとマイクサリバンは写真撮影と編集との支援を行いました。
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| PTFE Sub Lite Wall Tubing (Small tubing) | Zeus | 36AWG | 0.005”ID x 0.003” Wall (Small Parts) Also available in 0.003” to 0.006” | |
| Large tubing (0.86mm (0.34”)) | Clay Adams Brand Intramedic Becton Dickinson and Company | 427420 | 0.86mm (0.34”) O.D. 1.27mm (.050”) | |
| Electrode Barrel | A-M Systems | 573000 | ||
| Adhesive | JB Weld | |||
| Adhesive: Silicone caulk | ||||
| Solder and soldering iron | ||||
| Bleach | ||||
| Xylene | ||||
| Silver wire: 0.010” | A-M Systems | |||
| Insect pins: Austerlitz 0.1mm | Fine Science Tools | 26002-10 | ||
| Magnetic Stand | Narishige | GJ-8 | ||
| Micromanipulator | Narishige | MN 151 | ||
| Miniboard (Headstage) | Grass Industries | F-15EB/B1 | ||
| Polyview Adaptor Unit | Grass Industries | PVA 8 | ||
| Bipolar Portable Physiodata Amplifier System | Grass Industries | 15LT | ||
| ANALOG TO DIGITAL CARD | National Instruments | 6035E | ||
| Air Table; Vibraplane | Kinetic Systems |
Referências
- Gallarda, B. W., Sharpee, T. O., Pfaff, S. L., Alaynick, W. A. Defining rhythmic locomotor burst patterns using a continuous wavelet transform. Ann N Y Acad Sci. 1198, 133-139 (2010).
- Meyer, A., Gallarda, B. W., Pfaff, S., Alaynick, W. Spinal cord electrophysiology. J Vis Exp. , (2010).
- Gallarda, B. W. Segregation of axial motor and sensory pathways via heterotypic trans-axonal signaling. Science. 320, 233-236 (2008).
- Landmesser, L. The development of motor projection patterns in the chick hind limb. J Physiol. 284, 391-414 (1978).
- Myers, C. P. Cholinergic input is required during embryonic development to mediate proper assembly of spinal locomotor circuits. Neuron. 46, 37-49 (2005).
- Chanin, M. The determination of chloride by use of the silver-silver chloride electrode. Science. 119, 323-324 (1954).
- Goulding, M. Circuits controlling vertebrate locomotion: moving in a new direction. Nat Rev Neurosci. 10, 507-518 (2009).
