Ein Optic Nerve Crush Injury Mausmodell zur retinalen Ganglienzellen Survival Study
Summary
Dieses Protokoll zeigt, wie man retrograd Label retinalen Ganglienzellen, und wie man später machen ein Sehnerv Quetschverletzung um retinalen Ganglienzellen Überleben und Apoptose zu analysieren. Es ist eine experimentelle Krankheit Modell für verschiedene Arten von Optikusneuropathie, einschließlich Glaukom.
Abstract
Eine Verletzung des Sehnervs kann die axonale Degeneration führen, gefolgt von einer allmählichen Tod von retinalen Ganglienzellen (RGC), die zu einer irreversiblen Verlust der Sehkraft führt. Beispiele für solche Krankheiten in menschlichen gehören traumatische Optikusneuropathie und Sehnerv-Degeneration bei Glaukom. Es ist durch die typischen Veränderungen im Sehnervenkopf, progressive Degeneration des Sehnervs und der Verlust von retinalen Ganglienzellen, wenn unkontrolliert, was zu Sehverlust und Erblindung aus.
Der Sehnerv crush (ONC) Verletzungen Mausmodell ist eine wichtige experimentelle Krankheit Modell für traumatische Optikusneuropathie, Glaukom, etc. In diesem Modell das Gedränge Verletzung des Sehnervs führt zur allmählichen retinalen Ganglienzellen Apoptose. Diese Krankheit Modell kann verwendet werden, um die allgemeinen Prozesse und Mechanismen der neuronalen Tod und Überleben, die wesentlich für die Entwicklung von therapeutischen Maßnahmen ist zu studieren. Darüber hinaus können pharmakologische und molekularbiologische Ansätze in diesem Modell verwendet werden, um zu identifizieren und zu testen potenzielle therapeutische Reagenzien für verschiedene Arten von Optikusneuropathie zu behandeln.
Hier bieten wir Ihnen eine Schritt für Schritt Demonstration von (I) Baseline retrograde Markierung von retinalen Ganglienzellen (RGC) am Tag 1, (II) Sehnerv Quetschverletzung am Tag 4, (III) Ernte der Netzhaut und zu analysieren RGC Überleben am Tag 11, und (IV) repräsentatives Ergebnis.
Protocol
Discussion
Der Sehnerv Quetschverletzung Mausmodell ist nützlich, um den Prozess der RGC Tod und Überleben zu untersuchen. Dieses Modell ist auch oft verwendet, um die Auswirkungen der verschiedenen Reagenzien und Gene auf RGC Apoptose und Überleben zu untersuchen. Ein Vorteil dieses Modells ist, dass es ein hohes Maß an Reproduzierbarkeit bei minimalen Variationen hat.
Allerdings ist besondere Sorgfalt in mehreren Schritten in diesem Modell erforderlich. Erstens, wenn was den Sehnerv Quetschverlet…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Unsere Forschung wird durch die Interne Research Program des NIH, National Eye Institute unterstützt.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Stereotaxic apparatus | ASI Instruments | SAS-4100 | ||
| Dissecting microscope | World Precision Instruments | PZMIV-BS | ||
| Scalpel handle | Fine Science Tools | 10003-12 | ||
| Scalpel Blades #15 | Fine Science Tools | 10015-00 | ||
| Microdrill | Fine Science Tools | 18000-17 | ||
| Suture needle | Fine Science Tools | 12050-03 | ||
| Spring scissors | Fine Science Tools | 16144-13 | ||
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11252-50 | ||
| Hamilton syringe | Hamilton Company | 88400 | ||
| Gauze sponges | Office Depot | 674889 | ||
| Fluorochrome | Sigma | 39286 | ||
| Alcohol | Sigma | 459844 | 70% | |
| H2O2 | Sigma | H3410 | 3% |
Referências
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