Retina Ganglion Hücre Survival Eğitim Bir Optik Sinir Crush Yaralanma murin Modeli
Summary
Bu protokol, retrograd retina ganglion hücreleri ve sonradan retina ganglion hücre hayatta kalma ve apoptosis analiz etmek için bir optik sinir ezilme yaralanması yapmak nasıl etiket gösterir. Bu glokom da dahil olmak üzere optik nöropati farklı türleri için deneysel bir hastalık modeli.
Abstract
Optik sinir yaralanması ardından, geri dönüşü olmayan görme kaybı sonuçları retina ganglion hücrelerinin (RGCs), bir yavaş yavaş ölüm, aksonal dejenerasyona yol açabilir. Insan, bu tür hastalıkları örnekler travmatik optik nöropati ve glokom, optik sinir dejenerasyonu içerir. Bu, görme kaybı ve körlük önde gelen optik sinir başı tipik değişimler, progresif optik sinir dejenerasyonu, retina ganglion hücrelerinin kaybı, kontrolsüz, ile karakterizedir.
Optik sinir ezmek (ONC) yaralanma fare modeli Travmatik optik nöropati için önemli bir deneysel hastalık modeli, bu model glokom, vb optik sinir kademeli retina ganglion hücrelerinin apoptozise neden ezilme yaralanması. Bu hastalık modeli nöronal ölüm ve hayatta kalma, terapötik önlemler geliştirilmesi için gerekli olan genel süreçler ve mekanizmalar çalışma kullanılabilir. Buna ek olarak, farmakolojik ve moleküler yaklaşımlar bu modelde farklı tip optik nöropati tedavisinde potansiyel terapötik reaktifler belirlemek ve test etmek için kullanılır.
Burada, 1 gün retina ganglion hücrelerinin Temel retrograd etiketleme (RGCs), (II) 4 gün Optik sinir ezilme yaralanması, (III) retinae Hasat ve gün hayatta kalma RGC analiz (I) tarafından adım adım gösteri 11 ve (IV) Temsilcisi sonucu.
Protocol
Discussion
Optik sinir ezilme yaralanması fare modeli RGC ölüm ve hayatta kalma sürecini incelemek için yararlıdır. Bu model aynı zamanda sık sık farklı reaktifler ve genlerin RGC apoptoz ve sağkalım üzerine etkilerini araştırmak amacıyla kullanılır. Bu modelin bir diğer avantajı da minimal varyasyonları ile yüksek derecede tekrarlanabilirlik olmasıdır.
Ancak bu model birkaç adım, özel bakım gereklidir. İlk olarak, optik sinir ezilme yaralanması yaparken, oftalmik arter v…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bizim araştırma NIH, Ulusal Göz Enstitüsü İntramural Araştırma Programı tarafından desteklenmektedir.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Stereotaxic apparatus | ASI Instruments | SAS-4100 | ||
| Dissecting microscope | World Precision Instruments | PZMIV-BS | ||
| Scalpel handle | Fine Science Tools | 10003-12 | ||
| Scalpel Blades #15 | Fine Science Tools | 10015-00 | ||
| Microdrill | Fine Science Tools | 18000-17 | ||
| Suture needle | Fine Science Tools | 12050-03 | ||
| Spring scissors | Fine Science Tools | 16144-13 | ||
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11252-50 | ||
| Hamilton syringe | Hamilton Company | 88400 | ||
| Gauze sponges | Office Depot | 674889 | ||
| Fluorochrome | Sigma | 39286 | ||
| Alcohol | Sigma | 459844 | 70% | |
| H2O2 | Sigma | H3410 | 3% |
Referências
- Yoles, E. GM1 reduces injury-induced metabolic deficits and degeneration in the rat optic nerve. Investigative ophthalmology & visual science. 33, 3586-3591 (1992).
- Fisher, J. Vaccination for neuroprotection in the mouse optic nerve: implications for optic neuropathies. J Neurosci. 21, 136-142 (2001).
- Levkovitch-Verbin, H. RGC death in mice after optic nerve crush injury: oxidative stress and neuroprotection. Investigative ophthalmology & visual science. 41, 4169-4174 (2000).
- Li, Y. VEGF-B inhibits apoptosis via VEGFR-1-mediated suppression of the expression of BH3-only protein genes in mice and rats. The Journal of clinical investigation. 118, 913-923 (2008).
- Tang, Z. Survival effect of PDGF-CC rescues neurons from apoptosis in both brain and retina by regulating GSK3beta phosphorylation. The Journal of experimental medicine. 207, 867-880 (2010).
- Gustmann, S., Dunker, N. In vivo-like organotypic murine retinal wholemount culture. J Vis Exp. , (2010).
- Franklin, K., Paxinos, G. . The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates. , (1997).
