脊髓灰质炎病毒识别粒子凝集法
Summary
最近开发的新颖的颗粒凝集法（PA）的测定利用病毒的受体分子，允许快速和容易识别的脊髓灰质炎病毒（PV）。在这篇文章中，我们将显示为光伏识别PA检测的过程。
Abstract
在全球根除脊髓灰质炎行动，从急性弛缓性麻痹（AFP）病例粪便标本中分离鉴定光伏实验室诊断起着至关重要的作用。在世界卫生组织（WHO）的全球脊髓灰质炎实验室网络，光电隔离和鉴定，目前正在通过细胞培养系统和实时RT – PCR检测，分别进行。在光伏根除后时期，简单和快速识别程序，将有利于快速确认在国家实验室的脊髓灰质炎病例。在本研究中，我们将展示的新型PA检测程序开发光伏鉴定。该PA检测采用光伏受体（PVR）的分子和病毒，是具体的和统一的光伏所有血清型的亲和力的互动。程序很简单（一个反应板的步骤程序）和反应2小时内可以得到快速的（结果），结果是直观地观察（观察明胶颗粒凝集）。
Protocol
1。维持液（MM）的制备和生长介质（GM） 对于MM和通用汽车公司的准备，请看到世界卫生组织 1脊髓灰质炎实验室手册。贝科改良Eagle培养基（DMEM），辅以2％胎牛血清（FCS）和10％FCS可以用作替代品的MM和通用分别。 2。反PV抗体的制备重组反光伏的抗体（RIVM光伏输入抗血清），加入水（0.5％毫升小瓶），每小瓶抗PV抗体（1型，2或3）。将此?…
Discussion
这个PA检测的独特之处是利用反光伏抗体，而不是2光伏检测PVR的分子。这允许特定的相互作用的一个统一的亲和力，所有三个血清型光伏3-6致敏的明胶颗粒与光伏。我们用于致敏的明胶颗粒immunoadhesin形式的PVR（PVR – IgG2a），因为单体形式的PVR只有适度的亲和力，以单一的结合位点上的病毒粒子（解离常数10 -7〜-8中号） 7， 8，成功地观察到具体的光伏株致?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我们感谢为她出色的技术援助，以顺子和田。我们非常感谢昭雄野本教授请提供PVR – IgG2a杆状病毒表达载体。这项研究是通过资助部分支持，援助促进根除脊髓灰质炎和新出现和重新出现的传染病，卫生，劳工和福利部的研究。
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
|---|---|---|---|
| Sensitized-gelatin particles | Fujirebio Inc. | Test kit | |
| Reconstitution buffer | Fujirebio Inc. | Test kit | |
| Microtitration plate | Fujirebio Inc. | Test kit | |
| Anti-PV antibody | RIVM |
Referências
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Arita, M., Masujima, S., Wakita, T., Shimizu, H. Particle Agglutination Method for Poliovirus Identification. J. Vis. Exp. (50), e2824, doi:10.3791/2824 (2011).