קלות הנגישות של העובר אפשרה לניסויים למפות גורלות התא באמצעות גישות שונות, כולל חומוס שליו מפלצות וסימון צבע מוקד. במאמר זה אנו מדגים אחד הכנת ביצה שיטה כי כבר מותאם במיוחד פעמים הישרדות ארוכה.
Abstract
המחקר של פיתוח כבר סייעו במידה רבה על ידי שימוש בעובר האפרוח כמודל ניסיוני. קלות הנגישות של העובר אפשרה לניסויים למפות גורלות התא באמצעות גישות שונות, כולל חומוס שליו מפלצות וסימון צבע מוקד. בנוסף, היא מאפשרת הפרעות המולקולרי של מספר סוגים, כולל המיקום של חלבון מצופה חרוזים המבוא של ה-DNA פלסמיד משתמש electroporation אובו. ניסויים אלה הניבו מידע חשוב על התפתחות מערכת העצבים המרכזית ואת הפריפריה. עבור רבים של מחקרים אלה, יש צורך לפתוח את קליפת הביצה ואת reclose זה מביך ללא צמיחה של העובר. העובר ניתן לבדוק בכל שלבי ההתפתחות רצופים על ידי פתיחה מחדש את קליפת הביצה. אמנם יש כמה שיטות מצוין לפתיחת ביצי תרנגולת, במאמר זה אנו להדגים שיטה אחת, כי כבר מותאם במיוחד פעמים הישרדות ארוכה. בשיטה זו, הביצה מוטלת על צדו חלון קטן הוא חתך במעטפת. לאחר הליך הניסוי, הקליפה משמשת כדי לכסות את הביצה למשך הפיתוח שלה. סרט הפלסטיק השקוף שכיסה את קליפת הביצה מגנה על העובר ומסייעת לשמור על הלחות במהלך יתרת תקופת הדגירה. שיטה זו הייתה בשימוש החל שני ימי דגירה ו אפשרה הישרדות לדורותיה עובריים בוגרת.
Protocol
1. הסר ביצים אינקובטור שמור על 37 ° C עם לחות יחסית להגדיר מעל 60%. הסר את הביצים; להפוך ביצים 90 ° כך בסיס גדול טמון אופקי. 2. ביצים ספוגית לעקר <ol style=";text-align:…
Discussion
שיטה זו מאפשרת פעמים הישרדות ארוכה בעקבות מניפולציות ניסיוני. לדוגמה, צבען תיוג מחקרים מותר הישרדות E10 או במאוחר במחקר גורל מיפוי (1). בנוסף, הוא שימש במשך במחקרים electroporation אובו המספקים שינוי של רמות ביטוי הגנים והפיתוח הנדרשים כדי להמשיך בשלבי ההתפתחות מאוחר יותר (2-6). טכניקה זו ח?…
Materials
Material Name
Tipo
Company
Catalogue Number
Comment
Rotating incubator
Profi
Maintain at 37° Degrees with relative humidity set above 60%