Modelos animais de grande porte têm bons valores de translação no exame de fisiologia e farmacologia da asfixia neonatal. Usando leitões recém-nascidos, desenvolvemos um protocolo experimental para simular a asfixia neonatal, que tem as vantagens de estudar a hemodinâmica sistêmica e regional, o transporte de oxigênio com vias bioquímicas e patológicas e correlações.
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Artigo de método
Um Modelo de Suínos de asfixia neonatal
Neste artigo
Resumo
Resumo
Anualmente mais de 1 milhão de recém-nascidos morrem no mundo como relacionado à asfixia. Neonatos asfixiados comumente têm falência de múltiplos órgãos, incluindo hipotensão déficit de perfusão, encefalopatia hipóxico-isquêmica, hipertensão pulmonar, enterocolite vasculopathic, insuficiência renal e complicações tromboembólicas. Os modelos animais são desenvolvidos para nos ajudar a entender a fisiopatologia e farmacologia de asfixia neonatal. Em comparação com os roedores e os cordeiros recém-nascido, o leitão recém-nascido foi provado ser um modelo válido. O leitão recém-nascido tem várias vantagens, incluindo desenvolvimento semelhante à de 36-38 semanas feto humano com sistemas do corpo comparáveis, tamanho grande massa (~ 1,5-2 kg no nascimento), que permite a instrumentação e monitoramento do animal e controla as variáveis de confusão de desarranjos hipóxia e hemodinâmica.
Nós aqui descrever um protocolo experimental para simular a asfixia neonatal e nos permite examinar a systemic e regionais alterações hemodinâmicas durante o processo asfixiantes e reoxigenação assim como os respectivos efeitos de intervenções. Além disso, o modelo tem a vantagem de se estudar falha de múltiplos órgãos ou disfunção em simultâneo e a interacção com vários sistemas do corpo. O modelo experimental é um procedimento não-sobrevivência que envolve a instrumentação cirúrgica de leitões recém-nascidos (raça dias de idade e 1,5-2,5 kg de peso, 1-3 misto) para permitir o estabelecimento de ventilação mecânica, de acesso (arterial e venoso central) vascular ea colocação de cateteres e sondas de fluxo (Transonic Inc.) para a monitorização contínua da pressão intra-vascular e fluxo de sangue através das artérias diferentes, incluindo principal carótida, pulmonar comum, mesentérica superior e esquerda artérias renais. Usando estes leitões cirurgicamente instrumentados, após estabilização durante 30-60 minutos, tal como definidos pela variação Z <10% nos parâmetros hemodinâmicos e gases sanguíneos normais, iniciar um protocolo experimentalde hipoxemia grave que é induzida através de hipóxia alveolar normocápnica. O porquinho é ventilada com oxigénio de 10-15% por aumento da concentração de gás inalado azoto durante 2 h, com o objectivo de saturações de oxigénio arterial de 30-40%. Este grau de hipoxemia vai produzir asfixia clínica com acidose metabólica grave, hipotensão e choque cardiogênico com hipoperfusão de órgãos vitais. A hipoxia é seguida por reoxigenação com oxigénio a 100% durante 0,5 horas e, em seguida, 21% de oxigénio durante 3,5 h. Intervenções farmacológicas podem ser introduzidas em devido tempo e os seus efeitos investigada em ocultação, moda em blocos ao acaso.
Protocolo
1. Anestesia
- Definir a velocidade de fluxo da máquina de anestesia em 2L/min. Ligue o escape de sucção a vácuo.
- Máscara de carga cara com gás anestésico (isoflurano) a 5% (~ 3 min).
- Leitões recém-nascidos serão induzidos com isoflurano inalado 5% em 100% de oxigénio (~ 3 min).
- Manter a anestesia em 2-3% de isoflurano. Ajuste fino de isoflurano 0,5% consoante o caso, no entanto, pode variar de 0,5 a 5%, dependendo da condição de leitões.
- Uma vez que o acesso vascular foi estabelecida, a anestesia por inalação pode ser comutada para a anestesia intravenosa utilizando fentanil (5-50 mcg / kg / h) e midazolam (200-500 mc....
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Discussão
O actual protocolo experimental tem uma vantagem para examinar as alterações sistêmicas e regionais hemodinâmicos em indivíduos recém-nascidos durante o processo de hipóxia e reoxigenação. Nós podemos também examinar o respectivo efeito das intervenções utilizadas para melhorar a função cardiovascular durante a recuperação. Nós e outros relatam a experiência e os resultados do estudo de asfixia neonatal em relação aos efeitos cardiovasculares em 1, 2 pulmonar, neurológica 3, 4 gastrointestinal, hep.......
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Divulgações
Não há conflitos de interesse declarados.
Agradecimentos
Os autores gostariam de agradecer ao Canadian Institutes of Health Research (MOP53116) e Alberta Heritage Foundation for Medical Research para a concessão operacional e fundo de estabelecimento, respectivamente, para apoiar o desenvolvimento deste modelo experimental.
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Referências
- Borke, W. B. Increased myocardial matrix metalloproteinases in hypoxic newborn pigs during resuscitation: effects of oxygen and carbon dioxide. Eur. J. Clin. Invest. 34, 459-466 (2004).
- Munkeby, B. H.
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Reimpressões e permissões
