从小学的人角质形成细胞器官筏文化的代
Summary
一个<em>在体外</em>方法来模仿<em>在体内</em>上皮细胞分化的描述。许多病毒针对病毒生命周期的一部分上皮细胞，这种方法提供了一种研究病毒的手段：宿主的相互作用，更接近于，<em>在体内</em>。这种技术可用于小学的角质细胞，建立细胞系，以及正常或病变的活检组织。
Abstract
器官的上皮筏子文化的发展提供了一个有效的研究人员在体外系统，忠实地概括上皮细胞分化。这个系统有许多用途。例如，增长角质细胞的三维器官筏文化的能力一直在研究人类乳头状瘤病毒（HPV）的1重要里程碑。人乳头状瘤病毒的生命周期是紧密相连的鳞状上皮分化2。器官的上皮筏子文化展示在这里重现整个乳头状瘤病毒的生命周期，包括病毒生产3,4,5。此外，这些竹筏文化表现不典型增生病变相似， 在体内与HPV感染后观察。因此，该系统也可用于研究上皮细胞癌，以及药物对一般的上皮细胞分化的影响。最初由Asselineau和Prunieras开发<s高达6>和高班等 7修改，器官上皮筏式养殖系统已经成熟到一般，比较容易培养模型，其中包括对胶原细胞的生长，插头保持在气-液界面（图1A）。在10-14天的过程中，细胞分层和分化，形成一个完整的厚度的上皮细胞，产生特定的分化，细胞角蛋白。收获筏可组织学检查，以及标准的分子生物学和生物化学技术。在这篇文章中，我们描述了从初级人角质形成细胞的生成筏文化的方法。可以用同样的技术，建立上皮细胞株，并可以很容易地适应与利用上皮组织正常或病变的活检8。许多病毒目标或者其复制的生命周期的一部分的皮肤或粘膜上皮。在过去的几年中，使用的可行性器官筏邪教作为一个研究病毒宿主细胞相互作用的方法URES已经证明以及几个疱疹病毒，腺病毒，细小病毒，痘病毒9。因此可以适应器官筏文化研究病毒的发病机制，并测试新的抗病毒药物，这些病毒是不是永久细胞株耕地的唯一手段。
Protocol
Discussion
我们在这里介绍一个可以用来研究一般上皮细胞分化的方法，但也可以很容易地适应研究病毒的发病机制，以及潜在疗法的疗效。许多病毒的目标上皮细胞感染的主站点，在人乳头状瘤病毒的情况下，或在一些点在病毒的生命周期，与疱疹病毒。虽然越来越多器官筏文化是费时，忠实地在体内的上皮细胞分化概括提供了一个非常有用的方法来检查病毒：宿主细胞相互作用的能力。成功地培?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
作者要感谢萨莉·罗伯茨（英国伯明翰大学，英国伯明翰）的那种的E1E4抗体的礼物。这项工作是由国家癌症研究所（4R00CA137160-03）的赠款支持。
Materials
| Name of Reagent | Company | Catalog number |
| Rat Tail Collagen type 1 (4-5mg/ml) | BD Biosciences | 354236 |
| DMEM without NaHC03 | Invitrogen | 12100-061 |
| NaHC03 | Sigma | S5761 |
| Hepes | Calbiochem | 391338 |
| Stainless Steel metal grids | Williams and Mettle Co. | CR-03063-040-100-S |
| E medium11 | ||
| Epidermal Growth Factor | BD Biosciences | 354010 |
Referências
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