ניצול חלון גולגולת לדמיין עורק המוח האמצעי במהלך ספיג אנדותלין-1 מושרה מזרח מוחות עורקים
Summary
מאמר זה מתאר שיטה להמחשת עורקי חולדות מוחיים דרך חלון גולגולתי באמצעות craniectomy הזמני כדי להציג חלקים הפרוקסימלי של עורק המוח האמצעי (<strong> איור 1</strong>). שיטה תכליתית זה יכול להיות בשילוב עם טכניקות שונות של החדרת תרופות למדידת תגובתיות עורק המוח<em> In vivo</em>.
Abstract
יצירת חלון גולגולתי היא שיטה המאפשרת הדמיה ישירה של מבנים על פני קליפת המוח של המוח 1-3. טכניקה זו ניתן לבצע במקומות רבים המונחים על מוח החולדה, אבל מתבצעת בקלות על ידי יצירת craniectomy מעל העצמות הקדמיות או הקודקודית הנגישות בקלות. בתדירות הגבוהה ביותר, יש לנו להשתמש בטכניקה זו בשילוב עם מודל אנדותלין-1 עורק המוח האמצעי, החסימה של שבץ איסכמי לכמת את השינויים בקוטר כלי דם עורק מוח אמצעי, המתרחשים עם הזרקה של אנדותלין-1 לparenchyma המוח הסמוכים לMCA הפרוקסימלי 4, 5. על מנת להמחיש את החלק הפרוקסימלי של MCA במהלך אנדותלין -1 המושרה MCAO, אנו משתמשים בטכניקה כדי ליצור חלון גולגולתי דרך העצם הטמפורלית בצד הלטרלי של גולגולת החולדה (איור 1). עורקי מוח יכולים להיות חזותי או עם דורה שלמה או עם הדורה החרוטה וretracted. בדרך כלל, אנו משאירים את הדורה שלמה במהלך ההדמיה מאז אנדותלין-1 המושרה MCAO כרוך מסירה של פפטיד vasoconstricting לparenchyma המוח. זה עוקף את הצורך לחתוך דורה ישירות לעבר הספינות דמיינו למשלוח סמים. פרוטוקול זה יתאר כיצד ליצור חלון גולגולתי לדמיין עורקים מוחיים באופנת צעד חכמה, כמו גם כיצד להימנע מרבות מהמלכודות הפוטנציאליות הנוגעות לשיטה זו.
Protocol
Representative Results
Discussion
לסיכום, חלון טכניקת הכנת גולגולת זו היא מגוונת מאוד כפי שניתן לשנות כדי לענות על הצרכים של ניסויים רבים עם שינויים קלים 4, 5. לדוגמה, יש לנו מעקב זרימת דם במוח בהצלחה בענפים ספציפיים MCA באמצעות flowmetry דופלר הליזר להתמקד ישירות בעורק מוח דמיין דרך חלון גולגולתי (מכת A…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
עבודה זו נתמכה על ידי מענקים משותפי איגוד לב האמריקאים רבתי הדרום (09GRNT2060421), איגוד הרפואה האמריקנית, ומאוניברסיטת פלורידה קליני ומדעי Translational המכון. אדם מכה היא עמית predoctoral NRSA NIH / NINDS, (F30 NS-060335). רוברט Regenhardt קבל תמיכת מלגה predoctoral מאוניברסיטת תכנית הכשרה רבה התחומית בפלורידה יתר לחץ דם (T32 HL-083810).
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| Inhalation anesthesia system | VetEquip Inc., Pleasanton, CA, USA | 901806 | |
| Isoflurane anesthetic | Baxter Pharmaceutics, Deerfield, IL, USA | 1001936060 | |
| Small animal stereotaxic system | David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | 900 | |
| Non-rupture ear bars, rat | David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | 957 | |
| Rat gas anesthesia head holder | David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | 1929 | |
| BAT-12 microprobe thermometer | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | BAT-12 | |
| T/PUMP, Thermal blanket | Gaymar Industries, Inc., Orchard Park, NY, USA | T/PUMP, TP600 | |
| Metzenbaum Scissors | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 501254 | |
| Iris forceps | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 15915 | |
| Bulldog clamp retractors | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14119-G | |
| 10 μl syringe 26-gaugue | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | SGE010RNS | |
| Bovie, high temperature cautery kit | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 500392 | |
| Rat tooth forceps 0.12 | Stotz | E1811 | |
| Micromotor drill | Stoelting, Wood Dale, IL, USA | 51449 | |
| 0.8 mm round drill bur | Roboz Surgical Instrument Co., Inc., Gaithersburg, MD, USA | RS-6280C-1 | |
| STORZ Bonn suturing forceps | Bausch and Lomb, Inc., Rochester, NY, USA | ||
| Nylon Suture, size 3.0 | Oasis, Mettawa, IL, USA | MV-663 | |
| Cotton swabs | Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA | 22-029-488 | |
| Puralube eye ointment | Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA | NC0138063 | |
| Electric hair clippers | Oster, Providence, RI, USA | 78005-301 | |
| ET-1 diluted to 80 μM concentration in PBS | American Peptide, Sunnyvale, CA, USA | 88-1-10A | |
| Chlorhexidine, 2% | Agrilabs, St. Joseph, MO, USA | 1040, Rev. 6-06, NAC No.: 10580322 | |
| Surgical microscope | Seiler Instrument and Manufacturing, St. Louis, MO, USA | Evolution xR6 | |
| Sony Handycam | Sony, Minato, Tokyo, Japan | HDR-SR12 | |
| Fiber optic illuminator | TechniQuip Corp., Livermore, CA, USA | FO1–150 | |
| VLC media Player | (Paris, France) | ||
| Image J software | U.S. National Institutes of Health, Bethesda, MA, USA |
Referências
- Levasseur, J. E., Wei, E. P., Raper, A. J., Kontos, A. A., Patterson, J. L. Detailed description of a cranial window technique for acute and chronic experiments. Stroke. 6, 308-317 (1975).
- Baumbach, G. L., Dobrin, P. B., Hart, M. N., Heistad, D. D. Mechanics of cerebral arterioles in hypertensive rats. Circ. Res. 62, 56-64 (1988).
- Regrigny, O., et al. Effects of melatonin on rat pial arteriolar diameter in vivo. Br. J. Pharmacol. 127, 1666-1670 (1999).
- Mecca, A. P., O’Connor, T. E., Katovich, M. J., Sumners, C. Candesartan pretreatment is cerebroprotective in a rat model of endothelin-1-induced middle cerebral artery occlusion. Exp. Physiol. 94, 937-946 (2009).
- Mecca, A. P., et al. Cerebroprotection by angiotensin-(1-7) in endothelin-1-induced ischaemic stroke. Exp. Physiol. 96, 1084-1096 (2011).
