RNAi in C. elegans

L’interferenza dell’RNA (RNAi) è una tecnica ampiamente utilizzata in cui l’RNA a doppio filamento viene introdotto esogenamente in un organismo, causando l’abbattimento di un gene bersaglio. Nel nematode, C. elegans, l’RNAi è particolarmente facile ed efficace perché può essere erogato semplicemente alimentando i batteri vermi che esprimono RNA a doppio filamento (dsRNA) che è complementare a un gene di interesse. In primo luogo, questo video introdurrà il concetto di interferenza dell’RNA e spiegherà come provoca l’abbattimento mirato del gene. Quindi, dimostreremo un protocollo per l’uso di RNAi in C. elegans, che include la preparazione dei batteri e delle piastre di vermi RNAi, la coltura dei vermi e come valutare gli effetti dell’RNAi sui vermi. L’RNAi viene spesso utilizzato per eseguire screening genetici inversi al fine di rivelare quali geni sono importanti per svolgere specifici processi biologici. Inoltre, gli screening genetici inversi automatizzati consentono l’abbattimento e l’analisi efficienti di una vasta collezione di geni. Infine, RNAi è spesso usato per studiare lo sviluppo di C. elegans. Dalla sua scoperta, gli scienziati hanno usato l’RNAi per fare enormi progressi nella comprensione di molti fenomeni biologici.