RNAi em C. elegans

A interferência de RNA (RNAi) é uma técnica amplamente utilizada na qual o RNA de duplar encalha é exogenoumente introduzido em um organismo, causando o knockdown de um gene alvo. No nematode, C. elegans, RNAi é particularmente fácil e eficaz porque pode ser entregue simplesmente alimentando as bactérias vermes que expressam RNA duplo encalhado (dsRNA) que é complementar a um gene de interesse. Primeiro, este vídeo introduzirá o conceito de interferência de RNA e explicará como ele causa knockdown genético direcionado. Em seguida, demonstraremos um protocolo para o uso de RNAi em C. elegans,que inclui a preparação das bactérias e placas de verme RNAi, cultivo dos vermes, e como avaliar os efeitos do RNAi sobre os vermes. O RNAi é frequentemente usado para realizar telas genéticas reversas, a fim de revelar quais genes são importantes para realizar processos biológicos específicos. Além disso, telas genéticas reversas automatizadas permitem a derrubada eficiente e a análise de uma grande coleção de genes. Por fim, a RNAi é frequentemente usada para estudar o desenvolvimento de C. elegans. Desde sua descoberta, os cientistas têm usado a RNAi para fazer um tremendo progresso na compreensão de muitos fenômenos biológicos.