Fare kaburga Rezeksiyonu için Cerrahi Prosedür: Büyük Ölçekli Uzun Kemik Onarım İçin Bir Model
Summary
The overall goal of this procedure is to successfully resect a portion of bone from the rib of a mouse. The procedure was developed as a model to study large-scale long bone repair.
Abstract
Bu protokol fare kaburga kullanan büyük ölçekli kemik onarımı için yeni bir model için araştırmacılar tanıttı. , çevredeki interkostal kaslar istenen kaburga açığa göğüs vücut duvarı açılış pnömotoraks neden olmadan kaburga istenilen bölümünü eksize ve kesi kapatılması, ameliyat için hayvan hazırlanması: prosedürü takip ayrıntıları. Apendiküler iskelet kemikleri ile karşılaştırıldığında, kaburga son derece erişilebilir. Komşu kirişleri doğal şekilde sabitlenmesini temin Ek olarak, herhangi bir dahili veya harici bir fiksatör gereklidir. cerrahi, piyasada mevcut kaynakları kullanır öğrenmek için basit ve hayvan tarafından iyi tolere edilir. işlem ile veya çevresindeki periost çıkarmadan gerçekleştirilir ve bu nedenle onarım Perioste- katkısı değerlendirilebilir. 2 ay – Sonuçlar periost kalınırsa, sağlam onarımı 1 oluştuğunu göstermektedir. Yapacaklarımız Bu protokol kullanımının bekliyoruzkaburga onarım içine araştırmaları teşvik ve bulgular vücudun etrafında diğer yerlerde kemik onarımı teşvik için yeni yollar geliştirilmesini kolaylaştıracak olacak.
Introduction
Iskelet yaralanma, kronik osteoartrit zayıflatıcı ve rekonstrüktif cerrahi ile ilgili ciddi sorunlar, ekonomik verimliliği, aile refahı ve yaşam kalitesini etkileyebilir. Küçük molalar ve lezyonlar oldukça iyi iyileşmek mümkün olmakla birlikte, insanlar yapısını ve fonksiyonunu geri rekonstrüktif prosedürleri güvenmek gerekir, bu nedenle büyük kusurları tamir ve yeteneğine sahip değildir. İmar allojeneik veya Heterojenik greft, morcellized kemik, implante iskeleleri, ya da distraksiyon osteogenezisi içerebilir. Ne yazık ki, sadece bu tedaviler ancak tamir kemiğin orijinal gücü nadiren ulaşılır ile ilişkili inatçı morbidite faktörler vardır. Böylece, yeni klinik yaklaşımlara ihtiyaç vardır.
Segmental kusurları tedavi etmek için yenilikçi yöntemler geliştirmek Tek yönlü büyük ölçekli onarım doğal olarak oluştuğu durumları incelemektir. Memeliler th sınırlı olarak kabul edilir ise Amfibi ünlü, iskelet elemanları yeniden olabiliryeteneğidir. Ancak, 20. yüzyılın başlarında bu yana, insan kaburga rejenerasyon birkaç rapor insanlar öylesine 1-4 sınırlı değildir düşündürmektedir yayınlanmıştır. Şu anda bu olay iyi çene, yüz ve kulak rekonstrüksiyonu için kaburga malzeme kullanımı, plastik cerrahlar tarafından bilinir, ama daha geniş 5 takdir edilmez. Daha ayrıntılı olarak bu onarım incelemek için, biz fareyi kullanarak bir cerrahi modeli geliştirdik. Bu protokolü kullanarak, araştırmacılar ilgili doğuştan faktörleri belirlemek ve diğer yerlerde iskelet şifa kolaylaştırmak için bu bilgileri kullanabilirsiniz.
Iskelet onarım çalışmaları için bir model olarak kaburga kullanmanın birçok avantajı vardır. (Femur 6,7 rezeksiyonu kıyasla) İlk olarak, çevreleyen kaburgalar doğal fiksatör sağlar. Bu iç ve dış fiksatör morbidite riskini azaltır ve cerrahi prosedürü kolaylaştırır. Göğüs wa İkincisi, ince kas tabakalarıkolay erişim ve kalvaryal rezeksiyon- 8 kolaylık tahlil karşılaştırılabilir hale mükemmel bir görüş sağlamak ll. Üçüncüsü, intramembranöz kemikleşme, endokondral kemikleşme ile kaburga formu oluşması ve merkezi bir diafiz iki ucunda bulunan büyüme plaklarının de uzatma yoluyla boyu büyüdükçe kafataslarından aksine. Bu nedenle, kaburga tamir apendiküler iskeletin uzun kemiklerin onarımı daha karşılaştırılabilir olabilir. Ayrıca, femur göre, kaburga periost kalındır ve daha kolay bir şekilde manipüle edilebilir olduğunu bulmuşlardır. Böylece, periost okuyan veya hücre tedavileri, farmakolojik ajanlar test ve / veya doku iskelelerinin amacıyla kemik onarımı tahlil etmek isteyen araştırmacılar, bu cerrahi modeli yararlı bulabilirsiniz. Özet olarak, bu yiv rezeksiyon modeli yaygın olarak kullanılan bu tür bir model halen var olduğu memelilerde doğal büyük ölçekli kemik onarım çalışma içinde bir ortam sağlar.
Protocol
Representative Results
Discussion
Önce bu protokolü öğrenirken, nerede zor olabilir başlangıç kesi yerini belirlerken. Ancak, ötenazi fareler üzerinde uygulama cerrah ilk kesi yerleştirin ve rezeke istenen kaburga maruz nerede öğrenmenize yardımcı olur. Kadavra üzerinde çalışmak aynı zamanda veya periost olmadan kaburga kısmını kaldırmak için gerekli ince motor becerilerini geliştirir. Ayrıca, bu prosedüre yeni biri ince araçlar ve ince sütür manipüle zor bulabilir. Off bağlama sırasında, aşırı sütür çekerek…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
We thank members of the Mariani lab for critical reading of the manuscript. Our funding sources were: the Baxter Medical Scholar Research Fellowship (to M.K.S.), USC undergraduate fellowships and the Provost, Dean Joan M. Schaeffer, and Rose Hills Fellowships, (to M.K.S.). We also acknowledge a CIRM BRIDGES fellowship through Pasadena City College (to T.T.T). and the James H. Zumberge Research and Innovation Fund, the USC Regenerative Medicine Initiative, and the NIAMS NIH under Award Number R21AR064462 (to F.V.M).
Materials
| Name of Reagent/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| Medium sized micro-dissection scissors (Vannas-Tübingen Spring Scissors 5 mm) | Fine Science Tools | 15003-08 | |
| Fine micro-dissection scissors (Vannas Spring Scissors – 2mm Cutting Edge) | Fine Science Tools | 15000-04 | curved tip is beneficial |
| Micro-scalpel 5.0 mm | Fine Science Tools | 10315-12 | other fine scalpels can be substituted |
| Dumont 55 forceps | Fine Science Tools | 11295-51 | |
| Retractor | Fine Science Tools | 17004-05 | adjustability is convenient |
| Micro-needle holders | Fine Science Tools | 12060-01 | |
| 9.0 nylon sutures (Ethilon), taper point best | Ethicon | 2819G or similar | taper point best but reverse cutting is also good |
| 7.0 prolene sutures (Prolene) | Ethicon | 8700H or similar | 6-0 can be used too, needle point can vary |
| Large forceps (Adson Forceps) | Fine Science Tools | 11006-12 | other brands are fine |
| Lubricant Eye Ointment (Akwa Tears) | Akorn | 17478-062-35 | |
| Suture glue (GLUture Topical Tissue Adhesive) | Abbot | 32046-01 | has excellent working time |
| Shaver | Wahl | 9918-6171 or similar | |
| Clamp lamp | Zoo Med | LF-5 | |
| Infrared Bulb, 75W | Zoo Med | RS-75 | |
| RC2 Rodent Anesthesia System | VetEquip | 922100 | |
| IsoFlo (Isoflurane) | Abbot | 05260-05 | |
| Buprenorphine (Buprenex) | Reckitt Benckiser | 12496-0757-1 | |
| Betadine | Purdue Frederick | 67618015017 | |
| Flavored Gelatin, raspberry | Jell-O | B000E1FYL0 | made up firm, to the consistency of 'jigglers' |
Referências
- Philip, S. J., Kumar, R. J., Menon, K. V. Morphological study of rib regeneration following costectomy in adolescent idiopathic scoliosis. Eur Spine J. 14 (8), 772-776 (2005).
- Munro, I. R., Guyuron, B. Split-rib cranioplasty. Ann Plast Surg. 7 (5), 341-346 (1981).
- Taggard, D. A., Menezes, A. H. Successful use of rib grafts for cranioplasty in children. Pediatric neurosurgery. 34 (3), 149-155 (2001).
- Head, J. R. Prevention of Regeneration fo the Ribs: A problem in thoracic surgery. Archives of Surgery. 14 (6), 1215-1221 (1927).
- Kawanabe, Y., Nagata, S. A new method of costal cartilage harvest for total auricular reconstruction: part I. Avoidance and prevention of intraoperative and postoperative complications and problems. Plastic and reconstructive surgery. 117 (6), 2011-2018 (2006).
- Cheung, K. M., et al. An externally fixed femoral fracture model for mice. Journal of orthopaedic research : official publication of the Orthopaedic Research Society. 21 (4), 685-690 (2003).
- Matthys, R., Perren, S. M. Internal fixator for use in the mouse. Injury. 40, S103-S109 (2009).
- Cooper, G. M., et al. Testing the critical size in calvarial bone defects: revisiting the concept of a critical-size defect. Plastic and reconstructive surgery. 125 (6), 1685-1692 (2010).
- . Ask the Vet. JAX NOTES. 499, (2005).
- Flecknell, P. A., Roughan, J. V., Stewart, R. Use of oral buprenorphine (‘buprenorphine jello’) for postoperative analgesia in rats–a clinical trial. Laboratory animals. 33 (2), 169-174 (1999).
- Rigueur, D., Lyons, K. M. Whole-mount skeletal staining. Methods in molecular biology. 1130, 113-121 (2014).
- Evans, D. J. Contribution of somitic cells to the avian ribs. Developmental biology. 256 (1), 114-126 (2003).
- Colnot, C., Thompson, Z., Miclau, T., Werb, Z., Helms, J. A. Altered fracture repair in the absence of MMP9. Development. 130 (17), 4123-4133 (2003).
- Lu, C., et al. Cellular basis for age-related changes in fracture repair. Journal of orthopaedic research : official publication of the Orthopaedic Research Society. 23 (6), 1300-1307 (2005).
- Zilberman, Y., Gafni, Y., Pelled, G., Gazit, Z., Gazit, D. Bioluminescent imaging in bone. Methods in molecular biology. 455, 261-272 (2008).
- Pelled, G., Gazit, D. Imaging using osteocalcin-luciferase. Journal of musculoskeletal. 4 (4), 362-363 (2004).
- Elefteriou, F., Yang, X. Genetic mouse models for bone studies–strengths and limitations. Bone. 49 (6), 1242-1254 (2011).
- Srour, M. K., et al. Natural large-scale regeneration of rib cartilage in a mouse. J. Bone Miner. , (2014).
