Intrauterine Telemetrie zur Maus Kontraktionsdruck messen<em> In-vivo-</em
Summary
This manuscript provides a protocol for implanting telemeters in the mouse for the purpose of measuring intrauterine pressures during pregnancy.
Abstract
Eine komplexe Integration von molekularen und elektrischen Signalen benötigt wird, um einen Ruhe Uterus in eine Kontraktionsorgan am Ende der Schwangerschaft verändern. Trotz der Erkennung von Schlüsselregulatoren der Uteruskontraktilität dieses Verfahren ist immer noch nicht vollständig verstanden. Transgene Mäuse bieten eine ideale Modell, in dem auf die Geburt zu studieren. Bisher war die einzige Möglichkeit, um die Kontraktilität des Uterus bei der Maus zu untersuchen ex vivo isometrischen Spannung Aufnahmen, die aus mehreren Gründen nicht optimal sind. Der Uterus wird aus seiner physiologischen Umgebung entfernt werden, ist eine begrenzte Zeit während der Untersuchung möglich ist, und die Mäuse geopfert werden muß. Die jüngste Entwicklung der radiometrischen Telemetrie für Längs-, Echtzeitmessungen von in vivo intrauterine Druck in Mäusen erlaubt. Hier ist die Implantation einer intrauterinen Telemeter auf Druckänderungen in der Gebärmutter der Maus aus der Mitte der Schwangerschaft bis zur Geburt zu messen beschrieben. Durch den Vergleich Unterschiede in Pressemen zwischen Wildtyp und transgenen Mäusen kann die physiologische Wirkung eines Gens von Interesse weiter erläutert. Diese Technik sollte die Entwicklung von Therapeutika zur myometrische Erkrankungen während der Schwangerschaft zu behandeln, einschließlich vorzeitige Wehen zu beschleunigen.
Introduction
Frühgeburt ist die häufigste Ursache für perinatale Morbidität und Mortalität in den entwickelten Ländern; es ist für 50% der perinatalen Morbidität und 75% Perinatalsterblichkeit 1,2 verantwortlich. Frühgeburt Arbeit ist vielfältig und kann idiopathisch. Obwohl viel Forschung über die molekularen und elektrischen Bahnen Umwandlung des Myometriums von einem Ruhe Gewebe in eine Kontraktions eine entstanden, bleibt die genaue Pathophysiologie der Frühgeborenen Arbeit schwer. Endokrinen, entzündlichen und Genregulation haben zu vorzeitigen Wehen 3,4 in Verbindung gebracht worden. Jedoch ethische Bedenken beschränken die Möglichkeiten, die Forschung über die Mechanismen der vorzeitigen Wehen bei Menschen führen.
Angesichts dieser Einschränkungen haben viele Forscher an Mäuse als Modellsystem, mit dem die Physiologie der Geburt untersuchen gedreht. Mäuse haben kurze Schwangerschaften Dauer ca. 3 Wochen und kann leicht genetisch manipuliert werden. Darüber hinaus haben mehrere genetische Mausmodellewurde entwickelt, um die Signalwege, die für Arbeits 5 zu bestimmen. Trotz wichtigsten Unterschiede zwischen Maus und Mensch Geburt, Mäusen und Menschen teilen viele der gleichen Mechanismen, die für die Arbeit wesentlich sind, einschließlich intrauterine Entzündung und Infektion 6. So dienen Mäuse als ein unschätzbares Werkzeug für die Untersuchung der Uterusaktivität. Bis heute der Goldstandard Uteruskontraktilität bei Mäusen zu messen war ex vivo isometrische Spannung Aufnahmen; dies ist jedoch begrenzt auf einen Schwangerschaftszeitpunkt pro Versuch und erfordert die Entfernung der Gebärmutter von seiner physiologischen Umgebung. Ein weiterer wichtiger Faktor ist die große Anzahl von Tieren, die für diese Untersuchungen erforderlich. Schließlich ist diese Methode nicht für Langzeitstudien untersucht Einleitung der Wehen und Früh Pathophysiologie ermöglichen.
Jüngste Fortschritte in der radiometrischen Telemetriegeräte zur arteriellen Druck zu studieren gemacht ändert 7 an Mäusen und intrauterine Druck bei Ratten 8 warf die Frage auf, ob die gleiche Technologie verwendet werden, um Veränderungen in der intrauterine Druck bei Mäusen während der Schwangerschaft zu untersuchen. Nach anfänglichen Fehlersuche wurde eine Methode erfolgreich an Arbeits Induktion und Progression in einer Maus messen entwickelt. Diese in vivo-Vorgehensweise kann der Übergang von der Niederdruck-Zustand des Ruhe Uterus mit dem Hochdruckzustand anzeigt kraft Wehen messen. Dieses Verfahren wurde auch in der Lage, erhebliche Druckunterschiede zwischen den transgenen Mäusen mit geschwächtem Geburt und Wildtyp-Mäusen zu erkennen, was die physiologische Wirkung der Genexpression 9. Dieses Protokoll stellt eine Echtzeit-in vivo-Verfahren, um die Mausuterusdruck während der Schwangerschaft zu studieren.
Protocol
Representative Results
Discussion
Untersuchungen der Kontraktilität des Myometriums wurden auf ex vivo Messungen der Muskelspannung verlassen. Diese Methode kann für die Frühphasen-Test von neu entwickelten Uterotonika die nicht verabreicht werden, um Tiere leben werden. Jedoch sind in vivo Ansätze notwendig längs des Fortschreitens der Arbeit zu verstehen. Die in-vivo-Messungen dienen mehreren Zwecken. Erstens können sie Einfang eines vollständigeres Bild der Veränderungen des Uteruskontraktionsmuster über die Dauer …
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This work was supported by funding from the March of Dimes FY12-133 (S.K.E.) and the National Institutes of Health R01HD037831 (S.K.E.). We would like to thank Dr. Deborah Frank for critical review of the manuscript.
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| Surgical Glue | 3M Vetbond | 1469SB | Tissue Adhesive–stored in Drierite |
| Absorbable 6-0 Sutures | Ethicon | J212H | Vicryl |
| Non-absorbable 6-0 Sutures | Ethicon | 8706H | Prolene |
| Water Jacket Blanket + Heating Pad | Gaymer | T/Pump PN 11184-000 Blanket-66N111CC | Specialized for rodents |
| Bead sterilizer | Keller | Z378577 | Steri 250 Sterilizer |
| Disecting Microscope | Nikon | SMZ754 | Fibre optic gooseneck external light source |
| Sterile Surgical Gloves–Latex | Cardinal Health Triflex | 2D7253 | |
| PhysioTel PA-C10 Pressure Transmitter | Data Sciences International | 270-0135-001 | TA11PA-C10 |
| Telemeter Reciever | Data Sciences International | 272-6001-001 | RPC-1 |
| Dataquest ART 4.3.2 Analysis Platinum | Data Sciences International | 271-0147-141 | Analysis software |
| Diet Recovery Gel | Clear H2O | 72-01-5022 | Purified Soft Diet for Rodents |
| Tergazyme | Sigma-Aldrich | Z273287 | Enzyme detergent |
Referências
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