マウス収縮圧力を測定するために子宮内テレメトリ<em>インビボ</em
Summary
This manuscript provides a protocol for implanting telemeters in the mouse for the purpose of measuring intrauterine pressures during pregnancy.
Abstract
分子の電気信号の複雑な統合は、妊娠の終わりに収縮器官に静止子宮を変換するために必要とされる。子宮収縮の重要な調節因子の発見にもかかわらず、このプロセスはまだ十分に理解されていない。トランスジェニックマウスは、分娩を研究するための理想的なモデルを提供する。以前は、マウスに子宮収縮を研究する唯一の方法は、いくつかの理由のために最適ではex vivoでの等尺性張力の録音だった。子宮は、その生理的環境から除去されなければならない、調査の限られた時間的経過が可能であり、マウスを犠牲にしなければならない。放射遠隔測定の最近の開発は、マウスにおけるインビボ子宮内圧の長手方向の、リアルタイム測定を可能にした。送達が記載されるまでここで、子宮内テレメータの注入は、妊娠中期のマウスの子宮内の圧力変化を測定する。プレスの違いを比較することにより野生型およびトランスジェニックマウスとの間の小節がズレ、目的の遺伝子の生理的影響を明らかにすることができる。この技術は、早期陣痛を含む妊娠中に子宮筋障害を治療するために使用される治療薬の開発を促進すべきである。
Introduction
早産は、先進国における周産期の罹患率および死亡率の主要な原因である。それは、周産期の罹患率の50％及び周産期死亡率1,2の75％の原因である。早産は多面的で、特発ことができます。多くの研究は、収縮性の一つに、静止組織から子宮筋層を変換する分子的および電気的な経路に浮上しているが、早期陣痛の正確な病態生理学は、とらえどころのないまま。内分泌、炎症、および遺伝子調節はすべて早産3,4に関連している。しかし、倫理的な懸念は、ヒトにおける早産のメカニズムの研究を実施する能力を制限する。
これらの制限を考えると、多くの研究者が分娩の生理学を研究するためにモデル系としてマウスになっている。マウスは、約3週間持続する短い妊娠期間を有し、容易に遺伝子操作することができる。さらに、複数の遺伝的マウスモデルが持っている労働5に不可欠なシグナル伝達経路を決定するために開発されて。マウスとヒトの分娩の主な違いにもかかわらず、マウスとヒトは、子宮内炎症や感染6を含む労働のために不可欠で同じメカニズムの多くを共有しています。このように、マウスは、子宮活動を調べるための貴重なツールとして役立つ。現在までに、マウスでの子宮収縮を測定するためのゴールドスタンダードは、ex vivo等尺性張力の録音されている。しかし、これは実験ごとに1つの妊娠の時点に限定され、その生理的環境から子宮の除去を必要とする。もう一つの重要な要因は、これらの調査のために必要な多数の動物である。最後に、この方法論は、労働と早産病態生理の誘導を調べる長期的な研究のために許可していません。
動脈圧を研究するために使用される放射テレメトリデバイスで行われた最近の進歩は、マウスの7とint型に変更ラット8でrauterine圧力が同じ技術を妊娠中のマウスにおける子宮内圧力の変化を研究するために使用することができるかどうかに疑問を懇願した。初期トラブルシューティングの後、メソッドが成功したマウスでの分娩誘発および進行を測定するために開発された。このin vivoでのアプローチは、強力な陣痛示す高圧状態に静止子宮の低圧状態からの遷移を測定することができる。この方法はまた、遺伝子発現9の生理学的影響を実証する、損なわ分娩および野生型マウスとトランスジェニックマウスの間に有意な圧力差を検出することができた。このプロトコルは、妊娠中のマウス子宮圧力を研究するためのin vivo方法では、リアルタイムで提供する。
Protocol
Representative Results
Discussion
子宮筋層収縮性の調査は、筋肉の緊張のex vivoでの測定値に依存してきた。この方法論は、動物を生きるために投与することができない、新開発の子宮収縮薬の早期テストのために役立ちます。しかし、 生体内でのアプローチは縦方向に労働の進行を理解する必要がある。 in vivoでの測定は、いくつかの目的を果たす。第一に、彼らは妊娠期間にわたって子宮収縮パターン…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This work was supported by funding from the March of Dimes FY12-133 (S.K.E.) and the National Institutes of Health R01HD037831 (S.K.E.). We would like to thank Dr. Deborah Frank for critical review of the manuscript.
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| Surgical Glue | 3M Vetbond | 1469SB | Tissue Adhesive–stored in Drierite |
| Absorbable 6-0 Sutures | Ethicon | J212H | Vicryl |
| Non-absorbable 6-0 Sutures | Ethicon | 8706H | Prolene |
| Water Jacket Blanket + Heating Pad | Gaymer | T/Pump PN 11184-000 Blanket-66N111CC | Specialized for rodents |
| Bead sterilizer | Keller | Z378577 | Steri 250 Sterilizer |
| Disecting Microscope | Nikon | SMZ754 | Fibre optic gooseneck external light source |
| Sterile Surgical Gloves–Latex | Cardinal Health Triflex | 2D7253 | |
| PhysioTel PA-C10 Pressure Transmitter | Data Sciences International | 270-0135-001 | TA11PA-C10 |
| Telemeter Reciever | Data Sciences International | 272-6001-001 | RPC-1 |
| Dataquest ART 4.3.2 Analysis Platinum | Data Sciences International | 271-0147-141 | Analysis software |
| Diet Recovery Gel | Clear H2O | 72-01-5022 | Purified Soft Diet for Rodents |
| Tergazyme | Sigma-Aldrich | Z273287 | Enzyme detergent |
Referências
- Slattery, M. M., Morrison, J. J. Preterm delivery. Lancet. 360, 1489-1497 (2002).
- Goldenberg, R. L., Culhane, J. F., Iams, J. D., Romero, R. Epidemiology and causes of preterm birth. Lancet. 371, 75-84 (2008).
- Keelan, J. A. Pharmacological inhibition of inflammatory pathways for the prevention of preterm birth. Journal Of Reproductive Immunology. 88, 176-184 (2011).
- Voltolini, C., et al. Understanding spontaneous preterm birth: from underlying mechanisms to predictive and preventive interventions. Reproductive Sciences. 20, 1274-1292 (2013).
- Ratajczak, C. K., Muglia, L. J. Insights into parturition biology from genetically altered mice. Pediatric research. 64, 581-589 (2008).
- Rajakumar, A., et al. Placental HIF-1 alpha, HIF-2 alpha, membrane and soluble VEGF receptor-1 proteins are not increased in normotensive pregnancies complicated by late-onset intrauterine growth restriction. American Journal Of Physiology. Regulatory, Integrative And Comparative Physiology. 293, (2007).
- Whitesall, S. E., Hoff, J. B., Vollmer, A. P., D’Alecy, L. G. Comparison of simultaneous measurement of mouse systolic arterial blood pressure by radiotelemetry and tail-cuff methods. American journal of physiology. Heart And Circulatory Physiology. 286, H2408-H2415 (2004).
- Mackay, L. B., Shi, L. B., Maul, H. .., Maner, W. L., Garfield, R. E. The effect of bilateral pelvic neurectomy on cervical ripening in pregnant rats. Journal Of Perinatal Medicine. 37, 263-269 (2009).
- Pierce, S. L., Kutschke, W., Cabeza, R., England, S. K. In vivo measurement of intrauterine pressure by telemetry: a new approach for studying parturition in mouse models. Physiol Genomics. 42, 310-316 (2010).
- Imamura, T., Luedke, C. E., Vogt, S. K., Muglia, L. J. Oxytocin modulates the onset of murine parturition by competing ovarian and uterine effects. American Journal Of Physiology. Regulatory, Integrative And Comparative Physiology. 279, R1061-R1067 (2000).
- McCloskey, C., et al. The inwardly rectifying K+ channel KIR7.1 controls uterine excitability throughout pregnancy. EMBO Mol Med. 6 (9), 1161-1174 (2014).
