Summary

Een Rat Model van Orthotopic met behulp van een roman magnetische Anastomosis techniek voor Suprahepatic Vena Cava wederopbouw levertransplantatie

Published: March 19, 2018
doi:

Summary

De wederopbouw van de suprahepatic vena cava (SHVC) blijft een moeilijke stap in rat orthotopic lever transplantatie. In dit artikel tonen we een stapsgewijze protocol voor SHVC wederopbouw in ratten met behulp van een roman magnetische wapendrager-techniek.

Abstract

Het model van de rat van orthotopic lever transplantatie (OLT) is essentieel voor transplantatie-onderzoek. Het is een zeer geavanceerde diermodel en vereist een steile het leren kromme. De invoering van de techniek van de manchet voor wapendrager van de portal vein (PV) en infrahepatic vena cava (IHVC) heeft de haartransplantatie procedure bij ratten aanzienlijk vereenvoudigd. Echter, als gevolg van de korte voorste muur van de ontvangers suprahepatic vena cava (SHVC), de manchet techniek is zeer moeilijk te gebruiken voor de wederopbouw van de SHVC. De meeste onderzoekers in dit veld gebruiken nog steeds de hand-hechtdraad techniek voor de wederopbouw van de SHVC, waardoor het de stap knelpunt in rat orthotopic lever transplantatie. De techniek van de magnetische wapendrager (dat wil zeggen, magnamosis) is een methode voor het verbinden van twee schepen met behulp van de aantrekkelijke kracht tussen twee magneten. Onze recente studie heeft aangetoond dat de magnetische wapendrager techniek superieur aan de hand-hechtdraad techniek voor SHVC wederopbouw bij ratten is. In dit artikel tonen we een stapsgewijze protocol voor SHVC wederopbouw in ratten met behulp van de roman magnetische wapendrager-techniek. In dit model, werd de wederopbouw van de PV en IHVC uitgevoerd door de standaard manchet techniek, terwijl de wederopbouw van de gal buis (BD) werd uitgevoerd door een stent-techniek. De hepatische re arterialization werd niet uitgevoerd. De magnetische wapendrager techniek SHVC wederopbouw gemakkelijker gemaakt en aanzienlijk verkort de anphepatic fase. Na een redelijke leercurve, kunnen zelfs onderzoekers zonder geavanceerde microchirurgische vaardigheden produceren betrouwbare en reproduceerbare resultaten met behulp van dit model van de rat van OLT.

Introduction

Het model van de rat van orthotopic lever transplantatie (OLT) is essentieel voor transplantatie onderzoek1,2. De eerste rat OLT werd beschreven door Lee et al. in 19733. In dat model, werden alle vaartuigen gereconstrueerd door de techniek van de hand-hechtdraad. De hand-hechtdraad techniek vereist geavanceerde microchirurgische vaardigheden, die aanzienlijk beperkt het gebruik. Sindsdien zijn er verschillende wijzigingen in het oorspronkelijke protocol van rat OLT gemeld. Onder hen, de techniek van de manchet voor wapendrager van de portal vein (PV) en infrahepatic vena cava (IHVC) gemeld door Kamada et al. in 1979 wordt beschouwd als een belangrijke verbetering van dit model, aangezien het aanzienlijk vereenvoudigd de wederopbouw procedures4 . Echter, als gevolg van de korte voorste muur van de ontvangers suprahepatic vena cava (SHVC), de manchet techniek is zeer moeilijk te gebruiken voor de wederopbouw van de SHVC. De meeste onderzoekers in dit veld gebruiken nog steeds de hand-hechtdraad techniek voor de wederopbouw van de SHVC, waardoor het de stap knelpunt in rat OLT5,6,7.

De techniek van de magnetische wapendrager (dat wil zeggen, magnamosis) is een methode voor het verbinden van twee schepen of andere buisvormige structuren met behulp van de aantrekkelijke kracht tussen twee magneten8,9,10,11. De magnetische kracht geleidelijk comprimeert en hervormt het weefsel in een sterke, sutureless anastomosis12,13. Deze compressie wapendrager heeft bewezen effectief te zijn in de mens14,15. Wij hebben een paar van magnetische ringen specifiek voor de anastomose van de SHVC bij ratten ontworpen. Onze recente studie heeft aangetoond dat de magnetische wapendrager techniek superieur aan de hand-hechtdraad techniek voor de wederopbouw van de SHVC van de rat OLT16 is. Het doel van dit artikel is een gedetailleerde, stapsgewijze protocol voorzien in SHVC wederopbouw in ratten met behulp van de roman magnetische wapendrager-techniek.

Protocol

Het protocol werd uitgevoerd overeenkomstig de richtsnoeren voor de zorg en het gebruik van proefdieren en werd goedgekeurd door de Commissie op de ethiek van dier experimenten van Xi’an Jiaotong University, Xi’an, Shaanxi Province, China. Opmerking: Geen van de procedures in dit protocol was uitgevoerd onder een chirurgische Microscoop. 1. preoperatieve voorbereiding Het ontwerp en de vorm van de magnetische ringen (Figuur 1)…

Representative Results

Na ongeveer 10 pogingen, de magnetische wapendrager techniek voor SHVC wederopbouw was met succes onder de knie door een onderzoeker die had geen voorafgaande microchirurgische opleiding. De wederopbouw van de SHVC nam minder dan 2 min. De fase van de anhepatic voor de ontvangende rats was ongeveer 10 min. Geen trombose, bloeden of angiostegnosis werd waargenomen op de SHVC anastomotic site op 1, 5 tot 30 dagen na reperfusie. De cavography inferior vena werd uitgevoerd op 2 weken na de tr…

Discussion

Veel klinische vordert in lever transplantatie kunnen worden toegeschreven aan dierproeven. Rat OLT is een veel gebruikte en goed aanvaard model in het onderzoek van orgel behoud, transplantatie-immunologie, fysiologie en pathologie. Echter het is ook een zeer ingewikkelde procedure en geavanceerde microchirurgische vaardigheid vereist. Ondanks vele verbeteringen in de procedure voor rat OLT bleef de SHVC anastomosis een uitdagende stap. In dit artikel beschrijven we een nieuwe magnetische wapendrager techniek voor de we…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Dit werk werd gesteund door subsidies van het ministerie van onderwijs innovatie Team ontwikkeling programma van China (nr. IRT16R57), National Natural Science Foundation van China (nr. 81470896), en een onderzoek financieren voor Jong Talent werven plannen van Xi’an Jiaotong University (RW).

Materials

Anesthesia Machine Harvard  tabletop Animal anaesthesia
PLX7000B HF Mobile Digital C-arm System Perlong Medical PLX7000B It is mainly used for the angiography and photography of various operations
Syringe Pump Mindray BeneFusion SP5 intravenous infusion
Isoflurane RWD life Science Co. anesthetic:for the induction and maintenanceof anesthesia
iohexol Shanghai General Pharmaceutical Co  intravascular contrast media  
heparin sodium injection SPH No.1 Biochemical & Pharmaceutical Co., LTD   prevent the formation of thrombosis 
cefuroxime  Glaxo Operations UK Limited  an antibiotic
buprenorphine  TIPR Pharmaceutical Responsible Co.,Ltd an analgesic
curved microforceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. W40350 surgical tool
hemostatic forceps(straight) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J31010 surgical tool
hemostatic forceps(curved) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J31020 surgical tool
Satinsky clamp Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. XEC050 surgical tool
needle holder Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J32010 surgical tool
microneedle holder Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WBA040 surgical tool
notched forceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J42010 surgical tool
tissue forceps(with hook) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J41010 surgical tool
tissue scissor Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Y00040 surgical tool
surgical scissors Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Y00030 surgical tool
micro scissors Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. MR-S121T surgical tool
microvessel clips Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. XEC240 surgical tool
straight microforceps(titanium alloy) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WCC010 surgical tool
curved microforceps  (titanium alloy) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WCC020 surgical tool

Referências

  1. Aller, M. A., et al. A half century (1961-2011) of applying microsurgery to experimental liver research. World journal of hepatology. 4, 199-208 (2012).
  2. Aller, M. A., et al. The value of microsurgery in liver research. Liver international : official journal of the International Association for the Study of the Liver. 29, 1132-1140 (2009).
  3. Lee, S., Charters, A. C., Chandler, J. G., Orloff, M. J. A technique for orthotopic liver transplantation in the rat. Transplantation. 16, 664-669 (1973).
  4. Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
  5. Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic liver transplantation in rats. Journal of visualized experiments : JoVE. , (2012).
  6. Nagai, K., Yagi, S., Uemoto, S., Tolba, R. H. Surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction. Journal of visualized experiments : JoVE. , e4376 (2013).
  7. Liu, X., He, C., Huang, T., Gu, J. Development of a New Technique for Reconstruction of Hepatic Artery during Liver Transplantation in Sprague-Dawley Rat. PloS one. 10, e0145662 (2015).
  8. Jamshidi, R., Stephenson, J. T., Clay, J. G., Pichakron, K. O., Harrison, M. R. Magnamosis: magnetic compression anastomosis with comparison to suture and staple techniques. Journal of pediatric surgery. 44, 222-228 (2009).
  9. Pichakron, K. O., et al. Magnamosis II: Magnetic compression anastomosis for minimally invasive gastrojejunostomy and jejunojejunostomy. Journal of the American College of Surgeons. 212, 42-49 (2011).
  10. Gonzales, K. D., et al. Magnamosis III: delivery of a magnetic compression anastomosis device using minimally invasive endoscopic techniques. Journal of pediatric surgery. 47, 1291-1295 (2012).
  11. Wall, J., et al. MAGNAMOSIS IV: magnetic compression anastomosis for minimally invasive colorectal surgery. Endoscopy. 45, 643-648 (2013).
  12. Xue, F., et al. Choledochojejunostomy with an innovative magnetic compressive anastomosis: How to determine optimal pressure?. World journal of gastroenterology. 22, 2326-2335 (2016).
  13. Yan, X., et al. Portacaval shunt established in six dogs using magnetic compression technique. PloS one. 8, e76873 (2013).
  14. Dorman, R. M., Vali, K., Harmon, C. M., Zaritzky, M., Bass, K. D. Repair of esophageal atresia with proximal fistula using endoscopic magnetic compression anastomosis (magnamosis) after staged lengthening. Pediatric surgery international. 32, 525-528 (2016).
  15. Russell, K. W., Rollins, M. D., Feola, G. P., Scaife, E. R. Magnamosis: a novel technique for the management of rectal atresia. BMJ case reports. , (2014).
  16. Shi, Y., et al. Magnetic ring anastomosis of suprahepatic vena cava: novel technique for liver transplantation in rat. Transplant international : official journal of the European Society for Organ Transplantation. 28, 89-94 (2015).

Play Video

Citar este artigo
Yang, L., Lu, J., Wang, Y., Zhang, M., Shi, Y., Wei, S., Liu, P., Wu, Z., Lv, Y., Wu, R. A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction. J. Vis. Exp. (133), e56933, doi:10.3791/56933 (2018).

View Video