ウサギの食餌によるメタボリック シンドロームの実験的モデル: 方法論的検討・開発・評価
Summary
我々 は高脂肪、高蔗糖食を使用してウサギの食事誘発代謝症候群 (メッツ) の実験モデルを開発する方法を説明します。動物は、中心性肥満、軽症高血圧、前糖尿病、高脂血症、こうして人間のメッツの主要コンポーネントを再現を開発しました。この慢性的なモデルは、病気の進行のメカニズムを知識の取得になります。
Abstract
近年、肥満および新陳代謝シンドローム (メッツ) 公衆衛生および臨床実習は、座りがちなライフ スタイルや不健康な食習慣の上昇のための彼らの高められた流行を与え成長問題になっています。動物モデルのおかげで基礎研究は、メッツなど病態のメカニズムを調べることができます。ここでは、我々 は食事誘発メッツとその評価の実験的家兎モデルを開発するために使用方法を説明します。風土順化の期間の後、動物は 28 週間高脂肪 (10% 水素化ココナッツ オイルと 5% ラード)、高蔗糖 (15% ショ糖水に溶解) を供給されています。この期間中にいくつか実験的手術はメッツのさまざまなコンポーネントを評価する: 形態と血圧測定、グルコース耐性決定といくつかのプラズマ マーカーの解析。実験期間、動物を開発した中心性肥満、軽症高血圧、糖尿、高脂血症と低 HDL、高 LDL およびトリグリセリド (TG) のレベルの増加の最後に、人間のメッツの主要コンポーネントを再現します。この慢性的なモデルにより新たな視点、リスク、患者の同定や、テストの新しいことができる臨床および臨床マーカーの検出、病気の進行のメカニズムを理解するため治療この複雑な病理学の処置のためのアプローチ。
Introduction
肥満とメタボリック シンドローム (メッツ) 公衆衛生および臨床実習は、座りがちなライフ スタイルと不健康な食べる習慣1の上昇のための彼らの高められた流行を与え成長問題になっています。メッツの複数の定義がありますが、それらのほとんどは、心血管疾患や代謝の変化など腹部肥満、低 HDL と LDL コレステロール、トリグリセリドの上昇、耐糖能異常、高血圧2 のクラスターとしてそれを記述します。 ,3,4。診断は、これらの 5 つの基準のうち 3 人が存在している必要があります。
動物モデルのため基礎研究は、メッツなど病態のメカニズムを調査することができました。いくつかの動物モデルを使用している、しかし、人体病理学 (図 1) の主な臨床症状、選択のモデルを再現非常に重要です。この目的は、(Verkest5と張 & 楯突いて6レビュー参照) 犬と豚では主に、人間に似た動物モデルが開発されました。しかし、動脈硬化症や高血糖食事療法による犬の開発は疑問5モデル犬にはメッツのすべてのコンポーネントは表示されません。実験手順の複雑さとそのメンテナンスに活用が豚モデルは、人間と最も解剖学的および生理学的な類似性を示しメッツの基になるメカニズムを解明するための重要な予測力を提供するためこのモデルの非常に労働集約型、高価な6を実行します。
その一方で、齧歯動物モデル (マウス、ラット) 食餌誘導性自発およびトランスジェニック、広範囲で使用されている文学の異なる臓器やシステム (ウォンを参照してくださいその病理結果とメッツ、高血圧、肥満の研究のためら7レビューのため)。これらのモデルの使用は、犬や豚よりもより手頃な価格は、彼らの重要な欠点があります。確かに、7不在、高インスリン血、高血糖、高血圧など他の人に対し、歪みによって動物はメッツの一部のコンポーネントを開発します。さらに、メッツ、いくつかの遺伝子組み換え系統の肥満の主要なコンポーネントの 1 つはだけ、ダイエットに関連する要因に依存しない、むしろそれはいくつかの動物が正常または減少の食品摂取量8と肥満になることに示されています。最後に、マウスおよびラット コレステリル エステル転送タンパク (CETP) の自然の欠乏を表示して動脈硬化症の発展に比較的抵抗力があるになるコレステロールの輸送の主要な手段として HDL を使用します。これは、CETP を表現し、LDL9を中心に彼らのコレステロールを運ぶ人間と脂質代謝の重要な違いです。
逆に、実験ウサギはより大きい動物と齧歯動物の実験モデルの中間の段階を表します。したがって、人事やメンテナンス、大規模な動物モデルの実験プロシージャでより容易に処理されての最低要件とプロトコルの種類にウサギを簡単に送信できます。さらに、高脂肪食で飼育ウサギ肥満人間8,10,11と同様の血行や神経体液性変化であることが報告されています。脂質代謝に関する注記のウサギ豊富な CETP プラズマでありそのリポタンパク質プロファイル LDL の豊富な12人間のようでもあります。また、ウサギでは高脂血症を非常に急速に開発そう考えると、草食動物、として食餌療法脂肪13に非常に敏感であります。
図 1: メッツ動物モデルの比較。Verkest5チャンと楯突いて6、ウォンらを参照してください。7レビューのため。”
“利点を示しますと”
“の不利な点を示します。*、論争をキャロルらによって研究、 *指摘によって異なります8、いくつかの遺伝子組み換え系統が食品の摂取量とは独立して肥満になります。CEPT: コレステリル エステル転送タンパク質であります。GTT: ブドウ糖負荷試験です。この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください。
さまざまな臓器やシステムにメッツが製造した病理学的改造の基礎となる基本的なメカニズムを解明するために、この複雑な病理学の主要コンポーネントを再現した実験モデルの選択を理解するには人間のメッツは、不可欠です。ウサギは人間生理学および慢性のプロトコルおよび測定で使用の手頃な価格との類似性を与えられる多くの利点を提供できます。このラインで高脂肪・高蔗糖食を使用していくつかのウサギの食事誘発モデルはずっと14,15,16,17,18,19 (表 1) を使用し、メッツのさまざまなコンポーネントの特性評価は、器官の改造と表現型の関連非常に重要なのです。したがって、この記事の主な目的はその病態の研究ができるウサギの食事誘発のメッツと器官の改造の影響のモデルを開発する方法を説明します。
| 研究 | ダイエット | 期間 | 品種 | メッツのコンポーネント | |||
| Ob | HT | HG | Dl | ||||
| 陰 et al. (2002)14 | · 10% の脂肪 | 24 週間 | · 男性 nzw 種 | |
– | |
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| · 37% ショ糖 | · 2 kg | ||||||
| Zhao et al. (2007)15 | · 10% の脂肪 | 36 週間 | · 男性の JW | |
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| · 30% ショ糖 | · 16 週間 | ||||||
| Helfestein et al. (2011)16 | · 10% の脂肪 | 24 週間 | · 男性 nzw 種 | |
– | |
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| · 40% ショ糖 | · 12 週間 | ||||||
| · 0.5 0.1 コレステロール | |||||||
| 寧ら (2015)17 | · 10% の脂肪 | 8-16 週間 | · 男性 WHHL | |
– | |
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| · 果糖 30% * | · 12 週間 | ||||||
| Liu et al. (2016)18 | · 10% の脂肪 | 48 週間 | · 男性 nzw 種 | |
– | |
|
| · 30% ショ糖 | · 12 週間 | ||||||
| アリア Mutis ら (2017)19 | · 15% の脂肪 | 28 週間 | · 男性 nzw 種 | |
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表 1: 食事誘発メッツ ウサギの高脂肪、高蔗糖食を用いたモデル。シンボル”「を示しない場合は、」“の存在と”-“は評価されません。* 制限。WHHL、渡辺遺伝性 hiperlipidemic ウサギ。JW、日本白色種ウサギ。Ob、肥満。HT、高血圧。HG、高血糖。Dl、高脂血症。
Protocol
Representative Results
Discussion
適切な実験モデルの確立は、メッツの研究開発をより一貫性のある、信頼性の高いメソッドを提供できも臓器や改造システムの根底にある基本的なメカニズムを理解する必要です。ここで、食事誘発メッツとどのようにこのモデルを特徴づける代謝と心血管の異常のこのクラスターの主要なコンポーネントを評価する関連する実験モデルを開発に使用するメソッドを説明: 中心性肥満、高血?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この作品は、セルバンテス ・ デ ・ サラッド カルロス III フェダーイン ・資金 (CIBERCV CB16/11/0486) FJC Generalitat (PROMETEOII/2014/037)、大学バレンシア (UV-INV-PRECOMP14-206372) mz Generalitat (GV2015-062) によって支えられました。
Materials
| Veterinary scale | SOEHNLE | 7858 | Scale https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale |
| Shovel for aluminum feed | COPELE | 10308 | Shovel for aluminum feed http://copele.com/es/herramientas/48-pala-para-pienso-de-aluminio.html |
| Balance | PCE Ibérica | PCE-TB 15 | Balance http://www.pce-iberica.es/medidor-detalles-tecnicos/balanzas/balanza-compacta-pce-bdm.htm |
| Strainer (20 cm diam.) | ZWILLING | 39643-020-0 | Strainer https://es.zwilling-shop.com/Menaje-del-hogar/Menaje-de-cocina/Menaje-especial/Accesorios/Colador-20-cm-ZWILLING-39643-020-0.html |
| Bowl | ZWILLING | 40850-751-0 | Scale https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale |
| Funnel | BT Ingenieros | not available | Funnel http://www.bt-ingenieros.com/fluidos-y-combustibles/961-juego-de-4-embudos-de-plastico.html?gclid=EAIaIQobChMIuInui_y-1QIVASjTCh28Zwf-EAQYBSABEgK7xPD_BwE |
| Introcan Certo 22G blue | B Braun | 4251318 | Peripheral intravenous catheter http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan- |
| Propofol Lipuro 10 mg/ml vial 20 ml | B Braun | 3544761VET | General intravenous anesthetic http://www.bbraun-vetcare.es/producto/propofol-lipuro-1- |
| FisioVet serum solution 500ml | B Braun | 472779 | Scale https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale |
| Askina Film Vet 1,25cm x 5m | B Braun | OCT13501 | Plastic Plaster http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-film-vet |
| Askina Film Vet 2,50cm x 5m | B Braun | OCT13502 | Plastic Plaster http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-film-vet |
| Injekt siringe 10ml luer | B Braun | 4606108V | Injection-aspiration syringe of two single-use bodies http://www.bbraun-vetcare.es/producto/injekt- |
| Seca 201 | seca | seca 201 | Ergonomic tape for measuring perimeters https://www.seca.com/es_es/productos/todos-los-productos/detalles-del-producto/seca201.html#referred |
| Sterican 21Gx1" – 0,8x25mm verde | B Braun | 4657543 | Single Use Hypodermic Needle http://www.bbraun-vetcare.es/producto/agujas-hipodermicas-sterican- |
| CONTOURNEXT-Meter | BAYER | 84413470 | Blood glucose analysis system http://www.contournextstore.com/en/contour-next-meter-2 |
| CONTOUR NEXT test strips | BAYER | 83624788 | Blood glucose test strips http://www.contournextstore.com/en/contour-next-test-strips-100-ct-package |
| MICROLET NEXT LANCING DEVICE | BAYER | 6702 | Lancing device http://www.contournextstore.com/en/new-microlet-next-lancing-device |
| MICROLET 2 Colored Lancets | BAYER | 81264857 | Ultra-thin sterile lancet for capillary puncture http://www.contournextstore.com/en/microlet2-colored-lancets-100s |
| Injekt 20ml luer siringe | B Braun | 4606205V | Scale https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale |
| Askina Mullkompressen 7,5×7,5cm – sterile | B Braun | 9031219N | Sterile gauze packets in envelopes http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-mullkompressen-esteril |
| Emla lidocaine/prilocaine | AstraZeneca | not available | Local anesthetics https://www.astrazeneca.es/areas-terapeuticas/neurociencias.html |
| Introcan Certo 18G short | B Braun | 4251342 | Peripheral intravenous catheter http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan- |
| Introcan Certo 20G | B Braun | 4251326 | Peripheral intravenous catheter http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan- |
| Blood Pressure Transducers-MA1 72-4497 | Harvard Apparatus | 724497 | Transducer for monitoring blood pressure http://www.harvardapparatus.com/physiology/physiological-measurements/transducers/pressure-transducers/research-grade-pressure-transducers.html |
| PowerLab 2/26 | AD Instruments | ML826 | Amplifier https://www.adinstruments.com/products/powerlab |
| LabChart ver. 6 | AD Instruments | not available | Acquisition software https://www.adinstruments.com/products/labchart |
| Animal Bio Amp | AD Instruments | FE136 | Amplifier https://www.adinstruments.com/products/bio-amps#product-FE136 |
| K2EDTA 7.2mg | BD | 367861 | Blood collection tubes http://catalog.bd.com/nexus-ecat/getProductDetail?productId=367861 |
| Centrifuge | SciQuip | 2-16KL | Centrifuge http://www.sigma-centrifuges.co.uk/store/products/refrigerated-sigma-2-16k-centrifuge/ |
| Eppendorf Reference 2, 100 – 1000 μL | Eppendorf | 4920000083 | Pipette https://online-shop.eppendorf.es/ES-es/Pipeteo-44563/Pipetas-44564/Eppendorf-Reference2-PF-42806.html |
| Eppendorf Safe-Lock Tubes, 0.5 mL | Eppendorf | 30121023 | Tubes https://online-shop.eppendorf.es/ES-es/Puntas-tubos-y-placas-44512/Tubos-44515/Eppendorf-Safe-Lock-Tubes-PF-8863.html |
| NZW rabbits (16-18 weeks old) | Granja San Bernardo | not available | New Zealand White rabbits http://www.granjasanbernardo.com/en/welcome/ |
| Sucrose | Sigma | S0389-5KG | Sucrose for drinking solution http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/s0389?lang=es®ion=ES |
| Rabbit maintenance control diet | Ssniff | V2333-000 | Control diet http://www.ssniff.com/ |
| Rabbit high-fat diet | Ssniff | S9052-E020 | High-fat diet http://www.ssniff.com/ |
| Rabbit rack and drinker | Sodispan | not available | Rack for rabbits https://www.sodispan.com/jaulas-y-racks/racks-conejo-y-cobaya/ |
| Rabbit restrainer | Zoonlab | 3045601 | http://www.zoonlab.de/en/index.html |
Referências
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