وصف متلازمة المدخل-ارتفاع ضغط الدم في الفئران Cirrhotic الفسيولوجية الغازية
Summary
هنا يمكننا وصف بروتوكول مفصل للقياسات الغازية من المعلمات الفسيولوجية بما في ذلك الضغط المدخل وتدفق الدم splanchnic والهليوكبتر النظمية لوصف متلازمة بوابة ارتفاع ضغط الدم في الفئران.
Abstract
هذا بروتوكول مفصلة تصف الغازية القياسات الفسيولوجية في الجرذان cirrhotic لتوصيف مرض ارتفاع ضغط الدم المدخل. بوابة ارتفاع ضغط الدم (PHT) بسبب تليف الكبد المسؤول عن مضاعفات أشد في المرضى الذين يعانون من أمراض الكبد. الصورة الكاملة لمرض ارتفاع ضغط الدم المدخل يتميز بتزايد الضغط المدخل (PP) سبب زيادة مقاومة الأوعية الدموية أحياناً (عفر)، والتداول hyperdynamic، وتدفق الدم سبلانتشنيك زيادة. توسع الأوعية الشريانية سبلانتشنيك التدريجي وزيادة الناتج القلب مع ارتفاع معدل ضربات القلب (HR) ولكن انخفاض الضغط الشرياني يميز متلازمة ارتفاع ضغط الدم المدخل.
العلاجات رواية تقوم حاليا بهدف تقليل PP قبل أما عفر الاستهداف أو زيادة تدفق الدم سبلانتشنيك — ولكن قد تحدث آثار جانبية في الهليوكبتر الجهازية. وهكذا، وصف مفصل المدخل الوريدي، سبلانتشنيك، والمعلمات الفسيولوجية النظامية، بما في ذلك قياس PP، تدفق الدم الوريدي المدخل (بفبف)، وتدفق الدم الشرياني المساريقي العلوي، ومتوسط الضغط الشرياني (خريطة)، والموارد البشرية مطلوب السريري تقييم مدى فعالية العلاجات رواية ل PHT. لدينا المادة فيديو يقدم للقارئ مع بروتوكول منظم لإجراء القياسات الفسيولوجية الغازية في الفئران cirrhotic. على وجه الخصوص، يصف لنا قسطرة شريان فخذي والوريد البابي عن طريق الوريد لفائفي قولوني وقياس مدخل وريدي وتدفق الدم سبلانتشنيك عن طريق المسابير تدفق ارتشاح دوبلر-الموجات فوق الصوتية. وتظهر نتائج تمثيلية لنماذج مختلفة من الفئران من PHT.
Introduction
ويعرف PHT مرضية من ارتفاع ضغط الدم في نظام وريدي المدخل الذي يمكن أن يسبب حدوث مضاعفات خطيرة في المرضى الذين يعانون من تليف الكبد مثل النزيف المتعلق بالدوالي واستسقاء1. بينما الخمائر السابقة (مثلاً، تجلط الوريد البابي) وما بعد الكبد (مثل“متلازمة” بود-خياري) PHT نادرة، PHT أحياناً بسبب تليف الكبد يمثل السبب الأكثر شيوعاً ل PHT2.
في تليف الكبد، زيادة PP هو أساسا نتيجة لارتفاع عفر3. في مراحل متقدمة, PHT تتفاقم بفبف المتزايدة بسبب زيادة الناتج القلب وانخفاض المقاومة الوعائية الجهازية و splanchnic – تعريف مرض ارتفاع ضغط الدم المدخل4. قانون أوم (ΔP = س * ص) يعني أن تدفق الدم وعفر كانت متناسبة مع PP5. في المرضى، القياس المباشر من PP محفوفة بالمخاطر وعدم تنفيذه بشكل روتيني؛ بدلاً من ذلك، يتم استخدام التدرج الضغط الوريدي الكبدي (هفبج) كتدبير غير مباشر من6،ص7. ويحسب هفبج عن طريق طرح الضغط الوريدي الكبدي الحرة (فهفب) من ويدجيد كبدي وريدي الضغط (وفب)، الذي يتم قياسه باستخدام قسطرة بالون توضع في الوريد كبدي8. هفبج الفسيولوجية ويتراوح بين 1-5 مم زئبق، بينما مم زئبق إيه وان زيرو هفبج يعرف ارتفاع ضغط الدم المدخل هامة سريرياً (كسف) ويشير إلى زيادة خطر الإصابة بالمضاعفات المتصلة PHT، مثل النزيف المتعلق بالدوالي واستسقاء، والاعتلال الدماغي الكبدي9 . على الرغم من أن PP (أي، هفبج) هو المعلمة الأكثر ملاءمة لشدة PHT، معلومات حول المكونات الأخرى من PHT، بما في ذلك مدى خطورة التداول hyperdynamic (HR، والخريطة) تدفق الدم الشرياني splanchnic/المساريقي العلوي، وعفر، ذات الأهمية الحاسمة الحصول على فهم شامل للآلية الكامنة وراء متميزة من PHT.
وهكذا، خلافا للقياسات غير المباشرة من PP في البشر، المنهجية التي أدخلت للفئران يوفر ميزة القياس المباشر من PP ويسمح التسجيل لمعلمات إضافية الفسيولوجية التي تميز متلازمة فرط ضغط الدم المدخل. وباﻹضافة إلى ذلك، قياس مباشر PP قراءات تكاملية ممتازة من المبلغ لتليف الكبد (أحد المحددات رئيسية إيهفر) ويتغلب على بعض القيود الكمي التليف المتصلة بأخطاء أخذ العينات أنسجة الكبد.
نماذج القوارض الأكثر استخداماً من cirrhotic PHT تشمل ربط القناة الصفراوية الجراحية (مصرف لبنان) والناجمة عن السمية الكبد الضرر (أي، رابع كلوريد الكربون، ثيواسيتاميدي، أو الإدارة ديميثيلنيتروساميني) والكبد الاستقلابية الناجمة عن النظام الغذائي نماذج المرض. يمكن أن تكون PHT (غير cirrhotic) بريهيباتيك الناجمة عن الجزئية الوريد البابي ربط (بفل)10.
هي مناسبة تماما لأسلوب عرضها، بما في ذلك الفئران، الهامستر، والجرذان أو الأرانب، القوارض الصغيرة والمرتبطة بتكاليف الصيانة منخفضة نسبيا. وعلى الرغم من أن تعتبر جميع التقييمات الفسيولوجية قابلة لأداء في الفئران وتحسين دقتها وإمكانية تكرار نتائج النتائج مع الجرذان أو القوارض أكبر بسبب ميزة واضحة لحجم الحيوان. وباﻹضافة إلى ذلك، تلزم محددة الصغرى-الآلات والأجهزة للحصول على المعلمات الفسيولوجية مماثلة في الفئران. أخيرا، الجرذان أكثر قوة مع انخفاض المرتبطة المراضة والوفيات وهكذا، معدلات التسرب من المحتمل انخفاض في الفئران من الفئران.
المنهجية المقدمة مناسبة تماما لتقييم علاجات محددة لأمراض الكبد (أي، العقاقير المضادة تليفية أو المضادة للالتهابات) أو نهج الرواية الدوائية أن لهجة تأثير الأوعية الدموية و/أو بطانية البيولوجيا؛ وهكذا، الأثر المحتمل المعلمات الفسيولوجية في PHT.
Protocol
Representative Results
Discussion
PP هو المعلمة النتائج الرئيسية لتقييم أعراض ارتفاع ضغط الدم المدخل ويعكس شدة تليف الكبد الأساسي. ترسب مصفوفة (أي، التليف) وتضيق الأوعية جيبية (نظراً لزيادة التعبير الكبد من فاسوكونستريكتورس وتناقص القدرة على الاستجابة ل vasodilators) يسبب زيادة عفر. وقد تبين أهمية PP وتأثيره على أمراض الكبد ?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
ونشكر الأطباء البيطريين والممرضين ومربي الحيوانات في مركز “بحوث الطب الأحيائي” على دعمهم المستمر خلال مشاريعنا البحثية. يعترف الكتاب مدخلاً هاما لكافة المراجعين من هذا البروتوكول. بعض الأبحاث بتمويل من “جائزة علوم الشباب” من “المجتمع النمساوي لأمراض الجهاز الهضمي” والكبد (ÖGGH) إلى PS وجائزة “سكودا” من المجتمع النمساوي للطب الباطني إلى TR.
Materials
| Instruments | |||
| LabChart 7 Pro software | ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA | - | Software |
| ML870 PowerLab 8/30 | ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA | - | Electronic multichannel recorder |
| MLT0380/D | ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA | - | Pressure transducer (x2: for Portal Pressure and Arterial Pressure) |
| ML112 Quad Bridge Amplifier | ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA | - | Bridge amplifier |
| TS420 | Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA | - | Flowmeter module |
| Biological Research Apparatus 7025 | UGO BASILE S.R.L., Comerio, Italy | - | Ventilator |
| Vapor 2000 | Dräger Medical AG & Co. KG, Lübeck, Germany | - | Isofluran Vaporizer |
| Perivascular probes (rat) for Transonic systems (Superior Mesenteric Artery) | Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA | #MA1PRB | Ultrasonic flow probe (1mm) |
| Perivascular probes (rat) for Transonic systems (Portal Vein) | Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA | #MA2PSB | Ultrasonic flow probe (2mm) |
| 1st for intubation & 2nd for clean skin incisions | - | - | Mayo scissor [x2] |
| Metzenbaum scissor | - | - | - |
| Cuticle scissor | - | - | - |
| e.g. Adson Brown tissue forceps | - | - | Tissue Forceps |
| High precision 45° angle broad point forceps [x2] | - | - | - |
| Hemostat [x4] | - | - | - |
| e.g. Mikulicz peritoneal clamp | - | - | Curved clamp |
| e.g. Dieffenbach clamp | - | - | Micro clamp |
| e.g. micro spatula with flat ends, width 4 mm, | - | - | Micro metal spatula |
| for transbuccal suture at intubation | - | - | Needle holder |
| Scalpel grip | - | - | - |
| selfmade | - | - | Intubation desk |
| blut, flexible and with a suitable diameter for arterial cannula and venflow | - | - | Blunt steel wire |
| modified arterial line 20G with Flowstich | Becton Dickinson, Farady Road, Swindon, UK | #682245 | Arterial line |
| Heating pad | - | - | - |
| Rectal temerature probe | - | - | - |
| Saline heater | - | - | - |
| Laryngoscope (specific for animal size, e.g. rat) | - | - | - |
| Inductionbox for inhalation anesthesia | - | - | - |
| Scale (able to measure mg) | - | - | - |
| Hair clipper | - | - | - |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Consumables | |||
| e.g. modified BD Venflon Pro Safety 14GA | Becton Dickinson Infusion Therapy, AB, SE251 06 Helsingborg, Sweden | #393230 | Peripheral venous catheter (14G) |
| Fine-Bore Polyethylene Tubing, ID 0.58mm, OD 0.96mm, Portex, | Smiths Medical International Ltd., Kent, UK | #800/100/200 | Catheter tube (PE-50) |
| e.g. Omnifix-F Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | #9161406V | Syringe 1mL |
| e.g. Injekt Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | #4606051V | Syringe 5mL |
| e.g. Injekt Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | #4606205V | Syringe 20mL |
| e.g. BD Microlance 3, 18G – 1 1/2" | Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain | #304622 | Cannula (18G) |
| e.g. BD Microlance 3, 23G – 1" | Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain | #300800 | Cannula (23G) |
| e.g. BD Microlance 3, 30G – 1/2" | Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain | #304000 | Cannula (30G) |
| e.g. Leukoplast S | BSN medical GmbH, Hamburg, Germany | #47619-00 | Adhesive tape |
| e.g. Gazin RK Mullkompressen (18x8cm) | Lohmann & Rauscher, Vienna, Austria | #10972 | Gauze compress (small) |
| e.g. Gazin RK Mullkompressen (5x5cm) | Lohmann & Rauscher, Vienna, Austria | #10961 | Gauze compress (big) |
| Silk Braided black, USP 4/0, EP 1.5 | SMI AG, St. Vith, Belgium | #2021-04 | Suture (Silk 4/0, EP 1.5) |
| e.g. Mersilk, 2-0 (3 Ph. Eur.), PS-1 Prime | Johnson & Johnson Medical GmbH – Ethicon Deutschland, Germany | #EH7552 | Transbuccal suture |
| e.g. Cottonbuds (2.2mm, 15cm) | Paul Hartmann AG, Heidenheim, Germany | #967936 | Cotton buds |
| e.g. Vue Ultrasoundgel | Optimum Medical Limited, UK | #1157 | Ultrasound gel |
| e.g. Glubran 2 | Gem srl, Viareggio, Italy | #G-NB2-50 | Tissue glue |
| e.g. Surgical scalpell knife Nr. 10 – carbon steel | Swann-Morton, England, B.S. | #202 | Scalpel Knife |
| Heparin, 5000 i.E./mL (Natriumheparin) | Medicamentum Pharma GmbH, Allerheiligen im Mürztal, Austria | - | Heparin |
| Florane | Aesica Queenborough Ltd., Queenborough, UK | - | Isoflurane |
| OeloVital (5g) | Fresenius Kabi Austira Gmbh, Graz, Austria | - | Eye gel |
| Ketasol | aniMedica GmbH, Senden-Bösensell, Germany | - | Ketamine |
| Rompun | Bayer Austria Ges.m.b.H., Vienna, Austria | - | Xylazine |
| Xylocain 10% Pumpspray | AstraZeneca Österreich GmbH, Vienna, Austria | - | Lidocaine pump spray |
| Dipidolor | Jansen-Cilag Pharma GmbH, Vienna, Austria | - | Piritramide |
| NaCl 0.9% Fresenius, 1L | Fresenius Kabi Austira GmbH, Graz, Austria | #13LIP132 | Physiological saline solution |
Referências
- Ripoll, C., et al. Hepatic venous pressure gradient predicts clinical decompensation in patients with compensated cirrhosis. Gastroenterology. 133 (2), 481-488 (2007).
- Bosch, J., Groszmann, R. J., Shah, V. H. Evolution in the understanding of the pathophysiological basis of portal hypertension: How changes in paradigm are leading to successful new treatments. J Hepatol. 62, S121-S130 (2015).
- Blachier, M., Leleu, H., Peck-Radosavljevic, M., Valla, D. C., Roudot-Thoraval, F. The burden of liver disease in Europe: a review of available epidemiological data. J Hepatol. 58 (3), 593-608 (2013).
- Colle, I., Geerts, A. M., Van Steenkiste, C., Van Vlierberghe, H. Hemodynamic Changes in Splanchnic Blood Vessels in Portal Hypertension. Advances in Integrative Anatomy and Evolutionary Biology. 291 (6), 699-713 (2008).
- Laleman, W., Van Landeghem, L., Wilmer, A., Fevery, J., Nevens, F. Portal hypertension: from pathophysiology to clinical practice. Liver International. 25 (6), 1079-1090 (2005).
- Franchis, R. d. . Updating Consensus in Portal Hypertension: Report of the Baveno III Consensus Workshop on definitions, methodology and therapeutic strategies in portal hypertension. Journal of Hepatology. 33 (5), 846-852 (2000).
- Zardi, E. M., Di Matteo, F. M., Pacella, C. M., Sanyal, A. J. Invasive and non-invasive techniques for detecting portal hypertension and predicting variceral bleeding in cirrhosis: a review. Annals of medicine. 46 (1), 8-17 (2014).
- Kumar, A., Sharma, P., Sarin, S. K. Hepatic venous pressure gradient measurement: time to learn. Indian J Gastroenterol. 27 (2), 74-80 (2008).
- Tsochatzis, E. A., Bosch, J., Burroughs, A. K. Liver cirrhosis. Lancet. 383 (9930), 1749-1761 (2014).
- Abraldes, J. G., Pasarín, M., García-Pagán, J. C. Animal models of portal hypertension. World Journal of Gastroenterology : WJG. 12 (41), 6577-6584 (2006).
- Reiberger, T., et al. Sorafenib attenuates the portal hypertensive syndrome in partial portal vein ligated rats. Journal of Hepatology. 51 (5), 865-873 (2009).
- Schwabl, P., et al. Pioglitazone decreases portosystemic shunting by modulating inflammation and angiogenesis in cirrhotic and non-cirrhotic portal hypertensive rats. Journal of Hepatology. 60 (6), 1135-1142 (2014).
- Reiberger, T., et al. Nebivolol treatment increases splanchnic blood flow and portal pressure in cirrhotic rats via modulation of nitric oxide signalling. Liver International. 33 (4), 561-568 (2013).
- Schwabl, P., et al. The FXR agonist PX20606 ameliorates portal hypertension by targeting vascular remodelling and sinusoidal dysfunction. Journal of Hepatology. 66 (4), 724-733 (2017).
- Mandorfer, M., et al. Sustained virologic response to interferon-free therapies ameliorates HCV-induced portal hypertension. J Hepatol. 65 (4), 692-699 (2016).
- Schwabl, P., et al. Interferon-free regimens improve portal hypertension and histological necroinflammation in HIV/HCV patients with advanced liver disease. Aliment Pharmacol Ther. 45 (1), 139-149 (2017).
- Reiberger, T., Mandorfer, M. Beta adrenergic blockade and decompensated cirrhosis. Journal of Hepatology. 66 (4), 849-859 (2017).
- Reiberger, T., et al. Carvedilol for primary prophylaxis of variceal bleeding in cirrhotic patients with haemodynamic non-response to propranolol. Gut. 62 (11), 1634-1641 (2013).
- Reiberger, T., et al. Austrian consensus guidelines on the management and treatment of portal hypertension (Billroth III). Wiener klinische Wochenschrift. 129 (3), 135-158 (2017).
- de Franchis, R. Expanding consensus in portal hypertension. Journal of Hepatology. 63 (3), 743-752 (2015).
- Pinter, M., et al. The effects of sorafenib on the portal hypertensive syndrome in patients with liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma – a pilot study. Alimentary Pharmacology & Therapeutics. 35 (1), 83-91 (2012).
- Schwabl, P., Laleman, W. Novel treatment options for portal hypertension. Gastroenterol Rep (Oxf). 5 (2), 90-103 (2017).
- Klein, S., Schierwagen, R., Uschner, F., Trebicka, J. . Mouse and Rat Models of Induction of Hepatic Fibrosis and Assessment of Portal Hypertension. , (2017).
- Russell, W. M. S., Burch, R. L. . The Principles of Humane Experimental Technique. , (1959).
- Langhans, W., Myrtha, A., Riediger, T., Lutz, T. A. . Routine animal use procedures. , (2016).
- Animal Care and Use Program. . Rat and Mouse anesthesia and analgesia: Formulary and General Drug Information. , (2016).
- Davis, J. A. . Current Protocols in Neuroscience. , (2001).
- Albrecht, M., Henke, J., Tacke, S., Markert, M., Guth, B. Effects of isoflurane, ketamine-xylazine and a combination of medetomidine, midazolam and fentanyl on physiological variables continuously measured by telemetry in Wistar rats. BMC Veterinary Research. 10 (1), 198 (2014).
- Redfors, B., Shao, Y., Omerovic, E. Influence of anesthetic agent, depth of anesthesia and body temperature on cardiovascular functional parameters in the rat. Laboratory Animals. 48 (1), 6-14 (2014).
- Becker, K., et al. . Statement on anesthesia methodologies: Recommondations on anaesthesia methodologies for animal experimentation in rodents and rabbits. , (2016).
