포털-고혈압 증후군 Cirrhotic 쥐에서의 침입 Hemodynamic 특성화
Summary
여기는 등 포털 압력, splanchnic 혈액 흐름, 조직의 hemodynamics 포털 고혈압 증후군 쥐에 성격을 나타내기 위하여 hemodynamic 매개 변수의 침략 적인 측정을 위한 상세한 프로토콜에 설명 합니다.
Abstract
이것은 침략 hemodynamic 측정 cirrhotic 쥐 포털 고혈압 증후군의 특성을 설명 하는 상세한 프로토콜 이다. 문맥 고혈압 (PHT) 때문에 간 경 변은 간 질환 환자에서 가장 심각한 합병증에 대 한 책임. 포털 고혈압 증후군의 전체 그림 증가 intrahepatic 혈관 저항 (IHVR), hyperdynamic 순환, 및 증가 splanchnic 혈액 흐름 증가 포털 압력 (PP)에 의해 특징입니다. 진보적인 splanchnic 동맥 혈관 확장 그리고 증가 심장 출력 높은 심 박수 (HR) 하지만 낮은 동맥 압력 포털 고혈압 증후군 특징.
새로운 치료는 현재 개발 되 고 PP 감소 하는 목표 중 대상 IHVR에 의해 또는 splanchnic 혈액 흐름을 증가-조직의 hemodynamics에 부작용이 발생할 수 있습니다. 따라서, 정 맥, splanchnic, 포털 및 조직의 hemodynamic 매개 변수의 상세한 특성화에 필요한 PP, 포털 정 맥 혈 (PVBF), mesenteric 동맥 혈, 평균 동맥 압력 (지도), 그리고 HR의 측정을 포함 하 여 전 임상 PHT에 대 한 새로운 치료의 효능 평가. 우리의 비디오 문서 cirrhotic 쥐에서 침략 hemodynamic 측정을 수행 하기 위한 체계적인 프로토콜 리더를 제공 합니다. 특히, 포털 정 맥의 측정 및 대 퇴 동맥 및 ileocolic 정 맥을 통해 포털 정 맥 도관 법 설명 및 splanchnic 혈액 혈관 도플러 초음파 주위 흐름 프로브를 통해 흐름. PHT의 다른 쥐 모델의 대표적인 결과 표시 됩니다.
Introduction
PHT variceal 출혈과 복수1등 간 경 변 환자에서 심각한 합병증을 일으킬 수 있는 포털 정 맥 시스템에 병리학으로 증가 한 혈압으로 정의 됩니다. 사전 키 모 (예를 들어, 포털 정 맥 혈전 증)와 후 키 모 (예를 들어, 버드-Chiari 증후군) PHT 드물다, 간 경 변 증으로 인해 intrahepatic PHT PHT2의 가장 일반적인 원인을 나타냅니다.
간 경 변 증, PP는 주로 높은 IHVR3의 결과로 증가 했다. 고급 단계에서 PHT 증가 심장 출력 인해 증가 PVBF에 의해 악화 됩니다 및 조직의 splanchnic 혈관 저항 감소-포털 고혈압 증후군4정의. 옴의 법칙 (ΔP = Q * R) IHVR 및 혈액 흐름 PP5비례입니다 의미. 환자에서 PP의 직접 측정은 위험 하 고 정기적으로 수행; 대신, 간 정 맥 압력 기온 변화도 (HVPG) PP6,7을 간접적으로 측정 하는 사용 됩니다. HVPG 근육된 간 정 맥 압력 (WHVP), 간 정 맥8에 배치 하는 풍선 카 테 터를 사용 하 여 측정 되는에서 무료 간 정 맥 압력 (FHVP)을 빼서 계산 됩니다. 생리 적 HVPG HVPG ≥10 mmHg 임상적으로 중요 한 문맥 고혈압 (CSPH)를 정의 하 고 나타냅니다 variceal 출혈, 복수, 간 뇌9 등 PHT 관련 합병증에 대 한 위험이 증가 하는 동안 1-5 mmHg 사이 범위 . PP (즉, HVPG)는 PHT 심각도, PHT의 다른 구성 요소에 대 한 정보에 대 한 가장 관련성이 높은 매개 변수 (시간, 지도), hyperdynamic 순환의 심각도 포함 하 여 splanchnic/mesenteric 동맥 혈액 흐름과 IHVR는에 중요 한 PHT의 독특한 기본 메커니즘에 대 한 포괄적인 이해를 얻을.
따라서, 인 간에 있는 PP의 간접 측정, 달리 쥐에 대 한 도입된 방법론 PP의 직접 측정의 이점을 제공 하며 추가 hemodynamic 매개 변수 포털 고혈압 증후군 특성화의 기록 또한, PP의 직접 측정 간 섬유 증 (IHVR의 주요 결정)의 금액의 우수한 통합 판독 이며 간 조직 샘플링 오류와 관련 된 섬유 증 정량화의 특정 한계를 극복 합니다.
Cirrhotic PHT의 가장 일반적으로 사용 되는 설치류 모델 등 수술 담 관 결 찰 (BDL), 독 소 유발 간 손상 (즉, 사염화 탄소, thioacetamide, 또는 dimethylnitrosamine 관리), 다이어트 유발 대사 간 질병 모델입니다. Prehepatic (비 cirrhotic) PHT 부분 포털 정 맥 결 찰 (PPVL)10에 의해 유도 될 수 있다.
작은 설치류 쥐, 햄스터, 쥐, 또는 토끼를 포함 하 여 제시 방법에 적합 하 고 관련 된 상대적으로 낮은 유지 보수 비용. 그럼에도 불구 하 고 hemodynamic 평가 마우스, 더 나은 정확성과 결과의 재현성에 수행 가능한 모든 쥐 또는 더 큰 설치류 동물 크기의 명백한 이점 때문으로 볼 수 있습니다. 또한, 특정 마이크로-악기와 장치 쥐에 있는 유사한 hemodynamic 매개 변수를 얻기 위해 필요 합니다. 마지막으로, 쥐는 낮은 관련된 병 적 상태와 사망률 보다 강력한 고 따라서, 드롭 아웃 요금 가능성이 낮은 쥐에서 보다 쥐에.
제시 하는 방법론은 간 질환 (즉, 반대로 거리 또는 항 염증 성 약물)의 특정 치료를 평가 하는 데 적합 또는 소설 약리학 접근 그 영향 혈관 음색 및 내 피 생물학; 그리고 따라서, 가능성이 효과 hemodynamic 매개 변수 PHT에.
Protocol
Representative Results
Discussion
PP 포털 고혈압 증후군의 평가 대 한 주요 결과 매개 변수 이며 기본 경 변 증의 심각도 반영 합니다. 매트릭스 증 착 (즉, 섬유 증)와 (로 인해 간장 표현의 vasoconstrictors 증가 및 vasodilators 응답을 감소) 정현파 vasoconstriction 증가 IHVR 발생할. PP와 만성 간 질환에 미치는 영향의 중요성은 여러 전 임상11,12,,13<sup class="x…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
우리 우리의 연구 프로젝트 중 수 의사, 간호사, 그리고 동물 계에는 센터의 생물 의학 연구의 지속적인 지원에 대 한 감사합니다. 저자는이 프로토콜의 모든 검토자의 중요 한 입력을 인정합니다. 연구의 일부는 오스트리아 사회 위장 및 간장 학과 (ÖGGH) ps의 “젊은 과학 상”와 “스코다 수상”는 오스트리아 사회의 내과 TR에 의해 투자 되었다.
Materials
| Instruments | |||
| LabChart 7 Pro software | ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA | - | Software |
| ML870 PowerLab 8/30 | ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA | - | Electronic multichannel recorder |
| MLT0380/D | ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA | - | Pressure transducer (x2: for Portal Pressure and Arterial Pressure) |
| ML112 Quad Bridge Amplifier | ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA | - | Bridge amplifier |
| TS420 | Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA | - | Flowmeter module |
| Biological Research Apparatus 7025 | UGO BASILE S.R.L., Comerio, Italy | - | Ventilator |
| Vapor 2000 | Dräger Medical AG & Co. KG, Lübeck, Germany | - | Isofluran Vaporizer |
| Perivascular probes (rat) for Transonic systems (Superior Mesenteric Artery) | Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA | #MA1PRB | Ultrasonic flow probe (1mm) |
| Perivascular probes (rat) for Transonic systems (Portal Vein) | Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA | #MA2PSB | Ultrasonic flow probe (2mm) |
| 1st for intubation & 2nd for clean skin incisions | - | - | Mayo scissor [x2] |
| Metzenbaum scissor | - | - | - |
| Cuticle scissor | - | - | - |
| e.g. Adson Brown tissue forceps | - | - | Tissue Forceps |
| High precision 45° angle broad point forceps [x2] | - | - | - |
| Hemostat [x4] | - | - | - |
| e.g. Mikulicz peritoneal clamp | - | - | Curved clamp |
| e.g. Dieffenbach clamp | - | - | Micro clamp |
| e.g. micro spatula with flat ends, width 4 mm, | - | - | Micro metal spatula |
| for transbuccal suture at intubation | - | - | Needle holder |
| Scalpel grip | - | - | - |
| selfmade | - | - | Intubation desk |
| blut, flexible and with a suitable diameter for arterial cannula and venflow | - | - | Blunt steel wire |
| modified arterial line 20G with Flowstich | Becton Dickinson, Farady Road, Swindon, UK | #682245 | Arterial line |
| Heating pad | - | - | - |
| Rectal temerature probe | - | - | - |
| Saline heater | - | - | - |
| Laryngoscope (specific for animal size, e.g. rat) | - | - | - |
| Inductionbox for inhalation anesthesia | - | - | - |
| Scale (able to measure mg) | - | - | - |
| Hair clipper | - | - | - |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Consumables | |||
| e.g. modified BD Venflon Pro Safety 14GA | Becton Dickinson Infusion Therapy, AB, SE251 06 Helsingborg, Sweden | #393230 | Peripheral venous catheter (14G) |
| Fine-Bore Polyethylene Tubing, ID 0.58mm, OD 0.96mm, Portex, | Smiths Medical International Ltd., Kent, UK | #800/100/200 | Catheter tube (PE-50) |
| e.g. Omnifix-F Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | #9161406V | Syringe 1mL |
| e.g. Injekt Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | #4606051V | Syringe 5mL |
| e.g. Injekt Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | #4606205V | Syringe 20mL |
| e.g. BD Microlance 3, 18G – 1 1/2" | Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain | #304622 | Cannula (18G) |
| e.g. BD Microlance 3, 23G – 1" | Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain | #300800 | Cannula (23G) |
| e.g. BD Microlance 3, 30G – 1/2" | Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain | #304000 | Cannula (30G) |
| e.g. Leukoplast S | BSN medical GmbH, Hamburg, Germany | #47619-00 | Adhesive tape |
| e.g. Gazin RK Mullkompressen (18x8cm) | Lohmann & Rauscher, Vienna, Austria | #10972 | Gauze compress (small) |
| e.g. Gazin RK Mullkompressen (5x5cm) | Lohmann & Rauscher, Vienna, Austria | #10961 | Gauze compress (big) |
| Silk Braided black, USP 4/0, EP 1.5 | SMI AG, St. Vith, Belgium | #2021-04 | Suture (Silk 4/0, EP 1.5) |
| e.g. Mersilk, 2-0 (3 Ph. Eur.), PS-1 Prime | Johnson & Johnson Medical GmbH – Ethicon Deutschland, Germany | #EH7552 | Transbuccal suture |
| e.g. Cottonbuds (2.2mm, 15cm) | Paul Hartmann AG, Heidenheim, Germany | #967936 | Cotton buds |
| e.g. Vue Ultrasoundgel | Optimum Medical Limited, UK | #1157 | Ultrasound gel |
| e.g. Glubran 2 | Gem srl, Viareggio, Italy | #G-NB2-50 | Tissue glue |
| e.g. Surgical scalpell knife Nr. 10 – carbon steel | Swann-Morton, England, B.S. | #202 | Scalpel Knife |
| Heparin, 5000 i.E./mL (Natriumheparin) | Medicamentum Pharma GmbH, Allerheiligen im Mürztal, Austria | - | Heparin |
| Florane | Aesica Queenborough Ltd., Queenborough, UK | - | Isoflurane |
| OeloVital (5g) | Fresenius Kabi Austira Gmbh, Graz, Austria | - | Eye gel |
| Ketasol | aniMedica GmbH, Senden-Bösensell, Germany | - | Ketamine |
| Rompun | Bayer Austria Ges.m.b.H., Vienna, Austria | - | Xylazine |
| Xylocain 10% Pumpspray | AstraZeneca Österreich GmbH, Vienna, Austria | - | Lidocaine pump spray |
| Dipidolor | Jansen-Cilag Pharma GmbH, Vienna, Austria | - | Piritramide |
| NaCl 0.9% Fresenius, 1L | Fresenius Kabi Austira GmbH, Graz, Austria | #13LIP132 | Physiological saline solution |
Referências
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