चूहे के हिंडमेंड में माध्यमिक लिम्फेमा को प्रेरित करने के लिए एक संशोधित विधि
Summary
इस पशु मॉडल शोधकर्ताओं चूहों के hindlimb में सांख्यिकीय महत्वपूर्ण माध्यमिक लिम्फेडेमा प्रेरित करने के लिए सक्षम बनाता है, कम से कम 8 सप्ताह तक चलने. मॉडल लिम्फेडेमा के pathophysiology का अध्ययन करने के लिए और उपन्यास उपचार विकल्पों की जांच करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.
Abstract
पशु मॉडल रोग के pathophysiology को समझने के लिए, लेकिन यह भी संभावित उपचार विकल्पों का पता लगाने के क्रम में लिम्फेडेमा के अनुसंधान में सर्वोपरि महत्व के हैं। इस माउस मॉडल शोधकर्ताओं महत्वपूर्ण lymphedema कम से कम 8 सप्ताह तक चलने प्रेरित करने के लिए अनुमति देता है. लसीकाओं के भिन्न रेडियोथेरेपी और सर्जिकल अपाहिज के संयोजन का उपयोग करके लिम्फेडेमा प्रेरित होता है। इस मॉडल की आवश्यकता है कि चूहों से पहले और सर्जरी के बाद 10 ग्रे (जी) विकिरण की एक खुराक मिलता है. मॉडल के सर्जिकल भाग में तीन लसीका वाहिकाओं का लिगेशन और माउस हिंदलिम्ब से दो लिम्फ नोड्स की निकासी शामिल है। चूहों के छोटे शारीरिक संरचनाओं के कारण माइक्रोसर्जिकल उपकरणों और माइक्रोस्कोप तक पहुंच होना आवश्यक है। इस मॉडल का लाभ यह है कि यह सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण लिम्फेडेमा में परिणाम है, जो विभिन्न उपचार विकल्पों के मूल्यांकन के लिए एक अच्छा आधार प्रदान करता है. यह भी microsurgical प्रशिक्षण के लिए एक महान और आसानी से उपलब्ध विकल्प है. इस मॉडल की सीमा यह है कि प्रक्रिया समय लगता है, खासकर अगर अग्रिम में अभ्यास नहीं किया जा सकता है. मॉडल चूहों में निष्पक्ष परिमाणात्मक लिम्फेडेमा में परिणाम, गंभीर रुग्णता के कारण के बिना और तीन अलग अलग परियोजनाओं में परीक्षण किया गया है.
Introduction
लसीका द्रव का संचय है जो स्थानीय ऊतक सूजन की ओर जाता है, जो मुख्य रूप से लसीका वाहिकाओं में लसीका तरल पदार्थ के बिगड़ा या बाधित प्रवाह के कारण होताहै 1. लसीका प्रवाह लसीका प्रणाली2में संक्रमण, बाधा, चोट या जन्मजात दोषों से बाधित या बाधित हो सकता है। इन etiologies लसीका तरल पदार्थ के संचय में परिणाम है, जो सूजन की एक पुरानी स्थिति की ओर जाता है, बाद में फाइब्रोसिस में जिसके परिणामस्वरूप, साथ ही वसा ऊतक3के जमाव. लिम्फेडेमा को प्राथमिक या द्वितीयक लिम्फेडेमा के रूप में वर्गीकृत किया जा सकता है। प्राथमिक लिम्फेडेमा विकासात्मक असामान्यताओं या आनुवंशिक उत्परिवर्तन2,4के कारण होता है . माध्यमिक लिम्फेडेमा अंतर्निहित प्रणालीगत रोग, शल्य चिकित्सा या आघात2,4के कारण होता है . द्वितीयक लिम्फेडेमाविश्व2 में लिम्फेडेमा का सबसे सामान्य रूप है। विकसित देशों में, माध्यमिक लिम्फेडेमा का सबसे आम कारण सहायक रेडियोथेरेपी और लिम्फ नोड विच्छेदन5जैसे ओन्कोलॉजिकल थेरेपी है। लिम्फेडेमा स्तन कैंसर के रोगियों के बीच सबसे अधिक बार होता है, लेकिन यह भी gynecologic, मेलेनोमा, genitourinary या गर्दन के कैंसर6के साथ रोगियों में विकसित कर सकते हैं। यह सुझाव दिया गया है कि स्तन कैंसर के साथ का निदान सभी महिलाओं में से, 21% लिम्फेडेमा7का विकास होगा.
लिम्फेडेमा रोगी के लिए शारीरिक और मानसिक रूप से तनावपूर्ण हो सकता है। लिम्फेडेमा के रोगियों में संक्रमण का खतरा बढ जाता है5,8,9, जीवन की खराब गुणवत्ता और अवसाद10के सामाजिक चिंता और लक्षण विकसित कर सकते हैं . पुरानी लिम्फेडेमा की जटिलताओं के कारण देखभाल की लागत अधिक होती है और रोग का बोझ9,11में बढ जाता है . निष्कर्षों से यह भी पता चला है कि लिम्फेडेमा स्तन कैंसर के उपचार के बाद मृत्यु का खतरा बढ़ सकता है12. प्रभावित क्षेत्र के संपीड़न, मैनुअल लसीका जल निकासी और सामान्य skincare के रूप में कंजर्वेटिव प्रबंधन पहली पंक्ति दृष्टिकोण रहते हैं. वर्तमान में कोई उपचारात्मक उपचार6है . हालांकि शल्य चिकित्सा और चिकित्सा चिकित्सा के क्षेत्र में प्रगति की गई है, वहाँ अभी भी सुधार के लिए जगह है. अधिक शोध, रोग के pathophysiology और प्रगति में अंतर्दृष्टि प्रदान करने के लिए चिकित्सकों रोगियों के लिए बेहतर उपचार विकल्प प्रदान करने के लिए सक्षम करने की जरूरत है5.
पशु मॉडल रोगों के pathophysiology को समझने और संभावित उपचार विकल्प विकसित करने के लिए पूर्व नैदानिक अनुसंधान में इस्तेमाल किया जा रहा है। कई अलग लिम्फेडेमा पशु मॉडल कैनियों13,14,खरगोश15, भेड़16, सूअर17,18 और कृन्तकों19,20में स्थापित किया गया है, 21,22,23,24. कृंतक मॉडल सबसे अधिक लागत प्रभावी मॉडल लगता है, जब लसीका समारोह के पुनर्निर्माण की जांच, कृन्तकों के कारण आसानी से सुलभ और अपेक्षाकृत कम कीमत25जा रहा है. अधिकांश चूहों के मॉडलों ने चूहों की पूंछ में लिम्फेडेमा को प्रेरित करने पर ध्यान केंद्रित किया है21,22,23. पूंछ मॉडल बहुत विश्वसनीय है, लेकिन lymphedema प्रेरित करने के लिए सटीक शल्य तकनीक पिछले प्रकाशित सामग्री में काफी भिन्न होता है. इसके परिणामस्वरूप ज्ञात कूड़े-कचरे में प्रस्तुत विकसित लिम्फेडेमा की अवधि में उतार-चढ़ाव और मजबूतीहोतीहै . विभिन्न तकनीकों को भी hindlimb मॉडल में lymphedema inducing के लिए इस्तेमाल किया जा रहा है और वे भी अलग परिणाम उपज, लेकिन hindlimb मॉडल एक translational परिप्रेक्ष्य से समझने के लिए आसान हो सकता है. पिछला लिम्फेडेमा मॉडल सहज लिम्फेडेमा संकल्प द्वारा बाधित किया गया है और इसलिए एक पुन: उत्पादनीय और स्थायी लिम्फेडेमा मॉडल की आवश्यकता है25. शोधकर्ताओं ने पहले विकिरण की खुराक बढ़ाने की कोशिश की है, सहज लिम्फेडेमा संकल्प को रोकने के लिए, लेकिन यह अक्सर बाद में गंभीर रुग्णता के लिए नेतृत्व किया है25.
इस मॉडल सांख्यिकीय महत्वपूर्ण लिम्फेडेमा में परिणाम, गंभीर रुग्णता के कारण के बिना, विकिरण के साथ microsurgery के संयोजन के द्वारा. मॉडल एक पिछले शल्य चिकित्सा मॉडल से संशोधित किया गया है विकिरण की एक खुराक है कि lymphedema लाती है, गंभीर रुग्णता के कारण के बिना जोड़ने के द्वारा26. यह भी microsurgical प्रशिक्षण के लिए एक महान अवसर प्रदान करता है. चूहों के छोटे शारीरिक संरचनाओं के कारण माइक्रोसर्जिकल उपकरणों और माइक्रोस्कोप तक पहुंच होना आवश्यक है। शल्य प्रक्रिया जब उपयोगकर्ता बुनियादी microsurgical तकनीक सिखाया गया है किया जा सकता है, इस तरह के microsurgical उपकरणों के साथ suturing के रूप में. ऑपरेटरों है कि इस प्रक्रिया का प्रदर्शन सभी microsurgical कौशल (1981) और बुनियादी microsuture तकनीक (1985) की पूर्व शर्तों पर Acland द्वारा ट्यूटोरियल वीडियो देखा. हम इसे अनुसंधान में उपयोग करने से पहले शल्य प्रक्रिया 8 -10 बार अभ्यास की सलाह देते हैं। प्रक्रिया का अभ्यास सुनिश्चित करता है कि कम गलतियाँ की जाती हैं और प्रक्रिया और अधिक कुशलता से किया जा सकता है. जब महारत हासिल है, शल्य प्रक्रिया 45 मिनट में किया जा सकता है.
Protocol
Representative Results
Discussion
इस प्रोटोकॉल में कुछ महत्वपूर्ण चरण हैं। सबसे पहले, यह महत्वपूर्ण है कि शोधकर्ताओं ने सुरक्षा सावधानियों ले जब रेडियोधर्मिता के साथ काम कर रहा है. दूसरे, इस प्रोटोकॉल के सर्जिकल भाग के दौरान, माउस को एन…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
लेखक पीटर Bollen, माइक्रोस्कोप के माध्यम से देखा फुटेज रिकॉर्ड करने के लिए आवश्यक उपकरण उधार देने के लिए जैव चिकित्सा प्रयोगशाला के प्रमुख धन्यवाद.
Materials
| 10-0 Nylon suture | S&T | 12051-10 | |
| 6-0 Nylon suture – Dafilon | B Braun | C0933112 | |
| Coagulator – ICC 50 | ERBE | ||
| Cotton tipped applicators | Yibon medical co | ||
| Dissecting forceps | Lawton | 09-0190 | |
| Elastic retractors | Odense University Hospital | ||
| Electrical clipper | Aesculap | GT420 | |
| Fentanyl 0,315 mg/ml | Matrix | ||
| Heating pad – PhysioSuite | Kent Scientific Corp. | ||
| Isoflurane 1000mg Attane | Scan Vet | ||
| Isoflurane vaporizer – PPV | Penlon | ||
| Micro jewler forceps | Lawton | 1405-05 | |
| Micro Needle holder | Lawton | 25679-14 | |
| Micro scissors | Lawton | 10128-15 | |
| Micro tying forceps | Lawton | 43953-10 | |
| Microfine U-40 syringe 0,5ml | BD | 328821 | |
| Microlance syringe 25g | BD | ||
| Microlance syringe 27g | BD | ||
| Midazolam 5 mg/ml (hameln) | Matrix | ||
| Needle holder – Circle wood | Lawton | 08-0065 | |
| Non woven swabs | Selefa | ||
| Opmi pico microscope F170 | Zeiss | ||
| Patent blue V – 25 mg/ml | Guerbet | ||
| Scissors – Joseph | BD | RH1630 | |
| Siemens INVEON multimodality pre-clinical scanner | Siemens pre-clinical solutions | ||
| Source of radiation – D3100 | Gulmay | ||
| Stata Statistical Software: Release 15 | StataCorp LLC | ||
| Temgesic – 0,2 mg | Indivior | ||
| Vet eye ointment – viscotears | Bausch & Lomb |
Referências
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