Summary
우리는 위관을 가진 식도 카테터화 후에 신생아 토끼에 있는 자궁 내삽관의 기술을 기술합니다.
Abstract
신생아 토끼는 다양한 병리학 및 절차에 대한 유용한 동물 모델입니다. 토끼의 기도 관리는 신생아의 경우 더 복잡 해부학 적 특성으로 인해 복잡하다. 고급 기도 관리의 다른 방법 중, 내막 삽관은 기관 절제술보다 덜 공격적이며, 이러한 작은 크기의 초라글로틱 장치의 부족을 감안할 때 초라게 투여보다 더 가능하다. 직접 글로티스 시각화는 이 크기에서 동물에서 매우 어렵기 때문에, 이 맹목적인 삽관 모델은 특히 장기간 마취를 요구하는 실험에 효과적인 대안으로 제시됩니다. 이 방법을 사용하여 90 %의 성공률로 블라인드 삽관을 수행했습니다.
Introduction
토끼의 호흡기 의 특이한 해부학은 내트라큐어 삽관을 복잡하게 만듭니다. 구강은 입 개구가 제한적이고 상대적으로 큰 혀로 깊고 좁기 때문에 후두1,2를사용하여도 후두의 직접 시각화가 어렵다. 또한, 성인보다 10-20 배 작은 신생아 토끼의 삽관은 더 어려운 절차입니다. 이러한 해부학적 특성 외에도 토끼는 기도조작에 보조적인 후두경련을 일으키기 쉽습니다.
여러 관관 기술은 후두경 기관 삽관, 블라인드 삽관, 이경부 삽관, 역행 삽관, 내시경 삽관, 기관 절제술 및 수프라게인 장치 환기3,4,4,5,6,7,8,9와같은 문헌에 기재되어 있다. 이러한 모든 기술은 성인 토끼에서 성공적으로 수행되었습니다. 그러나 신생아토끼(10)의첨단 기도 관리에 관한 간행물은 거의 없다. 한 연구는 호흡 역학 및 폐 볼륨을 평가하기 위해이 시대의 동물에 있는 기관 절제술을 능력을 발휘하는 것을 기술합니다, 이것은 공격적이고 돌이킬 수 없는 기술이기더라도11. 내과 삽관을 위한 이 방법은 신생아 토끼에 있는 기도 관리의 효과적이고 저가적인 방법인 것으로 입증되었습니다.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
아래에 설명된 관착 절차는 바르셀로나 대학 기관 동물 관리 및 사용 위원회에 의해 승인되었다 (CEEA 180/19)
1. 실험 준비
- 다음 물질을 구하십시오: 직경 2mm 폴리염화염화(PVC) 내막염 관, 6 프랑스어(Fr) 폴리우레탄 공급 튜브, 평평하고 넓은 팁 해부 집게 및 멸균 윤활유(그림1).
- 삽관 및 수술 과정에서 멸균 상태를 유지합니다.
2. 마취
- 동물에게 5 mg/kg 자일라진과 25 mg/kg 케타민을 함께 적용하여 대퇴사삼의 광대한 측면염에 함께 발라주며 동물을 마취시화합니다. 덱스메디토미딘과 같은 알파-2 작용제는 자일라진 대신 사용할 수 있습니다.
- 약물 치료가 효과에 도달할 때까지 3-5분 간 기다립니다.
- 깊은 마취가 달성 될 때까지 동일한 복용량을 읽습니다 (네거티브 페달, palpebral 및 각막 반사 신경). 이상적으로, 토끼는 삽관까지 자발적인 호흡을 유지합니다.
3. 엔트라큐어 삽관
- 토끼를 37°C의 열 담요에 놓습니다. 동물을 등지의 재수선에 머리를 대확장으로 놓습니다. 머리를 가능한 한 직선및 중간선으로 정렬합니다. 목의 등쪽 부위에 배치된 멸균 거즈로 만든 4센티미터 롤은 적어도 45° 연장(그림2)을달성하는 데 도움이 될 수 있다.
- 평평하고 넓은 팁 해부 집게를 사용하여 약 1센티미터 너비의 구강을 엽니다. 입의 외상을 피하기 위해 무딘 넓은 끝으로 집게를 사용합니다.
- 입과 위 부위(첫 번째 갈비뼈) 사이의 거리를 측정합니다. 윤활6 프랑스어(Fr) 폴리우레탄 위관을 미리 측정된 마크(도3-4)에소개한다.
- 수유 튜브를 왼쪽으로 이동하고 접착 테이프로 수술장으로 고정합니다.
- 멸균 윤활유로 덮인 2mm 직경의 PVC 엔타락을 3cm 마크에 소개합니다.
- 튜브를 진행하는 데 어려움이 있는 경우 완전히 이동하여 매끄러운 글라이드가 이루어질 때까지 다시 시도하십시오. 후두와 후두에 외상의 위험은 여러 삽관 시도와 함께 중요하다. 수술장에 접착 테이프로 튜브를 고정합니다(그림5-6).
- 다음과 같은 설정과 인공 호흡기에 내막 튜브를 연결 : 조수 볼륨 - 10 mL / kg; 호흡 속도: 40 호흡/분; FiO2 100%, PEEP 6.
- 외투(ETCO2)에서CO2를 검출하여 튜브의 정확한 위치를 확인한다. 맥박 산소 측정 및 폐 고생에 의한 동물의 모니터링도 도움이 될 수있다(도 7).
- 실험의 결론에, 펜토바르비탈의 정맥 투여로 구성된 표준화된 안락사 프로토콜을 사용 하 여 120-240 mg/kg. 호흡 중단, 반사 부재 및 asystole가 달성 될 때까지 반복 복용량.
참고 : 수술 실험에서, 동물은 환기 과정 동안 살아 마지막으로 안락사된다.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
실험실에서,이 기술은 뉴질랜드 토끼와 실험 경험과 소아 기도 관리에 대한 전문 지식을 가진 의료 인력에 의해 수행됩니다. 이 절차는 90 %의 글로벌 성공률을 가진 10 마리의 동물중 한 명의 조사관에 의해 수행되었습니다. 이전에는 다른 연구원이 동물의 위치와 올바른 튜브 고정 길이를 모두 최적화하는 연습을 했습니다. 어떤 동물도 식도에 삽관되지 않았습니다. 한 번의 시도(10%)만 시도합니다. 동물의 크기가 매우 작기 때문에 실패(표 1). 일단 블라인드 삽관이 실행되면, 절차는 이전에 토끼 기도 관리에서 훈련되지 않은 직원에 의해 수행되는 경우에도, 대부분의 경우 첫 번째 시도에 성공이 달성된다. 120g 이상의 동물의 한두 번의 시도에서 100% 삽관 성공률을 달성했습니다.
그림 1: 실험에 필요한 재료 : 해부 집게, 먹이 튜브, 내막 튜브, 멸균 윤활유.
그림 2: 삽관 하기 전에 동물의 위치: 등산 및 가벼운 hyperextension. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 3: 해부 집게로 입개. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 5-6: 내시경 튜브는 3cm 맹목적으로 도입되어 수유관과 함께 수술장에 고정됩니다.
| 동물 번호 | 무게 (g) | 성공 | 시도 | 죽음 |
| 1 | 150 | + | 1 | - |
| 2 | 125 | + | 2 | - |
| 3 | 180 | + | 1 | - |
| 4 | 210 | + | 1 | - |
| 5 | 120 | + | 2 | - |
| 6 | 140 | + | 2 | - |
| 7 | 200 | + | 1 | - |
| 8 | 190 | + | 1 | - |
| 9 | 180 | + | 1 | - |
| 10 | 110 | - | 3 | + |
| 총 | 160.5 | 90% | 1.5 | 10% |
표 1: 동물 샘플 기능 및 내트라큐레이션 삽관 시도.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
토끼는 가용성, 짧은 세대 간 시간으로 높은 번식율, 취급이 용이하기 때문에 동물 실험에 널리 사용된다2. 우리의 센터에서, 우리는 5-7 일 된 뉴질랜드 토끼(Oryctolagus cuniculus)를신생아 모델로 사용하여 발달 중인 뇌에 대한 외피 수술의 신경학적 영향을 연구합니다. 그 결과, 우리는 깊은 마취를 필요로 하는 절차를 이용하고 1 시간까지 시간의 기간 동안 내트라큐레이션 삽관을 사용해야합니다.
성인 토끼에서, 몇몇 기도 관리 기술은 일반적으로 외과 문맥에서 기술되었습니다. 토끼 키트에 이러한 기술을 추정하려고 할 때 몇 가지 문제가 발생했습니다. 토끼의 무게는 110에서 210 그램 사이이고 1cm의 최대 입 개방 범위를 가지고 있습니다. 이러한 특성은 후두의 직접 시각화를 어렵게 만들고 내시경 물질을 충분히 작게 찾는 것이 복잡합니다. 문헌에 설명된 또 다른 옵션은 구강에 이경을 배치하고 PVC 튜브7을소개하는 가이드로 사용하는 것입니다. 신생아 토끼에서 혀의 존재와 입의 작은 크기는 모두 글로티스의 직접 시각화가 어려워지도록합니다. 또한 신생아에게 적합한 치수의 수중 장치가 없습니다.
위에서 언급 한 상황으로 인해, 아주 작은 토끼의 기도를 확보하기 위한 두 가지 기본 메커니즘이 있습니다: 기관 절제술과 맹목적인 삽관. 기관 절제술은 성인과 신생아 토끼10,12모두에서 사용 된 침습적 인 접근 방식입니다. 그것은 직접 기관 시각화의 장점을 가지고, 확률리스트는 내막 관의 정확한 위치를 식별 할 수 있도록. 그러나, 시술이완료되면동물의 생존율이 감소하는 것 외에도 절개 부위의 기계적 합병증 및 감염의 위험이 높다. 내시경/광섬유 삽관은 수술 없이 직접 시각화를 허용하는방법이다 5. 후두 외상을 예방하는 또 다른 옵션은 최적이 아닌 환기 및 위 팽만감과 같은 몇 가지 추가 단점이있는 단단한 얼굴 마스크를 사용하는 것입니다.
실험실에서, 맹목적인 삽관은 신생아 토끼 기도를 관리하는 데 사용됩니다. 이 방법은 성인 토끼에서 높은 성공 지수6을가진 실현 가능한 기술로 설명되었습니다. 초기 실험에서, 우리는 소화관의 폐색없이이 기술을 수행하려고 노력했다. 그 결과 식도에 대한 내막세이관의 도입률이 높았다. 그러나 관착 전에 위관을 삽입하면 90%의 경우 성공적인 삽관을 달성했습니다. 엔노트라큐튜브의 크기에 대해서는 처음에 직경 14게이지까지 말초 정맥 카테터를 사용하려고 시도했으며, 삽입(더 큰 강성)과 환기(직경이 너무 작고 인공호흡기에 연결하는 데 어려움)의 어려움을 관찰했습니다. 우리의 경험에서, 3cm 이하 깊이에 도입 된 2mm 내부 직경 내막 관의 사용은 올바른 gasometric 및 ETCO2 값에 의해 표시된 작은 토끼를 환기시키는 데 가장 효과적이었다. 성인 토끼의 삽관은 일반적으로 테이블의 수평 표면에 본질적으로 90 ° 각도로 머리의 하이퍼 확장을 필요로하지만, 우리는 단지 가벼운 머리 확장으로 절차를 수행 할 수 있었다.
이 절차를 수행 할 때 고려해야 할 중요한 요소 중 하나는 신생아 토끼 기관의 friable 특성입니다. 이를 염두에 두고, 기관 천포를 피하기 위해 사전 윤활 튜브를 천천히 조심스럽게 소개합니다. 연습 시도 중에 최적의 길이로 밝혀졌기 때문에 튜브를 3cm 이상 삽입하지 말고 프코세두리스트가 저항과 부딪히면 삽관을 중단하는 것이 좋습니다. 이 상황에서, 튜브를 제거하고 다시 시작하는 것이 바람직하다. 우리는 코호트에서 가장 작은 동물에서 가능성이 기관 천포의 한 경우를 경험했다.
이 기술의 주요 한계는 일단 소개된 엔트라큐어 관의 정확한 위치를 검출하는 데 어려움이다. 우리의 경험에서, 저항없이 장치의 발전, 적절한 ETCO2의검출, 환기 시 흉부 팽창의 안개 및 시각화뿐만 아니라 활력 징후의 유지 보수는 모든 경우에 절차의 적합성을 확증하기에 충분했습니다. 실험 대상자 중 일부에서는, 동맥 학묘한 이산화탄소와 산소 농도의 적당한 수준을 보여주는 환기 도중 수행되었다. 또한, 조직 병리학 분석이 수행되지 는 않았지만, 이전에 발표된 문헌은삽관(14)에이차적인 임상 적 변화가 없는 상태에서 기관에 점막 손상을 설명했다.
결론적으로, 우리가 설명한 신생아 토끼의 삽관 모델은 기본 공급을 사용하고 효과적인 환기를 허용하는 빠른 기술입니다. 우리는 이 기술이 신생아 토끼의 기도 관리의 군비관리에 통합될 수 있다고 믿습니다.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
저자는 공개 할 것이 없습니다.
Acknowledgments
이 작품은 인스티투토 드 살루드 카를로스 III [PFIS2017-0224], 소시에다드 에스파냐오 데 쿠이다도스 인텐시보스 페디아트리코스와 밴더빌트 의학 학자 프로그램의 보조금에 의해 지원되었다.
스폰서는 데이터의 수집, 분석 또는 해석에 관여하지 않았습니다.
우리는 동물 실험실에서 제공하는 도움 이사벨 살라스와 산조안 드 데우 병원의 시청각 테크인칼 팀의 젬마 페르난데스-아센시오(Gemma Fernandez-Asensio) 씨에게 비디오 녹화 및 제작에 대한 기술 지원을 부탁드립니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 2 mm diameter Polyvinyl Chloride (PVC) endotracheal tube | Vygon | 520.20 | |
| 6 French polyurethane feeding tube | Vygon | 310.06 | |
| Anesthesia (Ketamine and Xylazine) | |||
| Multiparameter monitor Intellivue MP5 | Phillips | ||
| Plain and wide tip dissection forceps | LensforVision | AK005 | |
| Sterile lubricant (Silkospray) | Rush | ||
| Ventilator Servo 900c | Maquet |
References
- Gilroy, B. A. Endotracheal intubation of rabbits and rodents. Journal of the American Veterinary Medical Association. 179 (11), 1295 (1981).
- Graham, J.
- Fick, T. E., Schalm, S. W. A simple technique for endotracheal intubation in rabbits. Laboratory Animals. 21 (3), 265-266 (1987).
- Conlon, K. C., et al. Atraumatic endotracheal intubation in small rabbits. Laboratory Animal Science. 40 (2), 221-222 (1990).
- Johnson, D. H. Endoscopic intubation of exotic companion mammals. The Veterinary Clinics of North America. Exotic Animal Practice. 13 (2), 273-289 (2010).
- Falcão, S. C., et al. Technique of blind tracheal intubation in rabbits (Oryctolagus cuniculi) supported by previous maneuver of esophageal cannulization. Acta Cirurgica Brasileira. 26 (5), 352-356 (2011).
- Miura, H., et al.
- Thompson, K. L., et al. Endotracheal Intubation of Rabbits Using a Polypropylene Guide Catheter. Journal of Visualized Experiments. (129), (2017).
- Comolli, J., et al. Comparison of endoscopic endotracheal intubation and the v-gel supraglottic airway device for spontaneously ventilating New Zealand white rabbits undergoing ovariohysterectomy. Veterinary Record. , 1-8 (2020).
- Hua, S., et al. Effects of different ventilation strategies on lung injury in newborn rabbits. Pediatric Pulmonology. 47 (11), 1103-1112 (2012).
- Kitchen, M. J., et al. The role of lung inflation and sodium transport in airway liquid clearance during lung aeration in newborn rabbits. Pediatric Research. 73 (4-1), 443-449 (2012).
- Boon, M. S., et al. Tubeless tracheotomy for survival airway surgery in the leporine model. The Laryngoscope. 125 (3), 680-684 (2015).
- Dion, G. R., et al. Morbidity and mortality associated with preclinical tracheostomy models. The Laryngoscope. 128 (2), 68-71 (2018).
- Phaneuf, L. R., et al. Tracheal injury after endotracheal intubation and anesthesia in rabbits. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 45 (6), 67-72 (2006).
